"NCI-H498 Adherent人结直肠腺癌细胞系
细胞背景资料：结肠腺癌；男性
细胞形态：上皮细胞样
细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒好的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H498 Adherent人结直肠腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
RMS13细胞系相关产品：WM115-mel细胞、P3 NS1 Ag4细胞、SP2细胞
H510A细胞系相关产品：DHL-5细胞、PLB 985细胞、COLO-741细胞
PL-45细胞系相关产品：KPNRTBM1细胞、SAOS 2细胞、DHL-4细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Wien-133细胞系相关产品：NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞
IGROV 1细胞系相关产品：HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
Michigan Cancer Foundation-12F细胞系相关产品：HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞
细胞生长特性：半贴壁
NCI-H498 Adherent人结直肠腺癌细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
以下对初次培养细胞人员来说，是非常好的开门教程：准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台；配液室的设备：扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)；培养室的设备：液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-８０℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录)；必须放在无菌间的设备：离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO２孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、４℃冰箱(放置serum和培养用液)。无菌室的灭菌：定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用３‰来苏尔或者新洁尔灭或者０.５％擦拭；CO２孵箱(培养箱)灭菌：先用３‰新洁尔灭擦拭，然后用７５％酒精擦拭或者０.５％，再用紫外灯照射；实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各２０-３０分钟；实验后灭菌：用７５％酒精(３‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台；实验人员的无菌准备：肥皂洗手、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋、用７５％酒精棉球擦净双手。
H660细胞系相关产品：TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞
Roswell Park Memorial Institute 6666细胞系相关产品：BC-019细胞、UM2细胞、LU-65M细胞
SW1222细胞系相关产品：HRA 19细胞、Normal Rat Kidney-49F细胞、HCC941122细胞
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NCI-H498 Adherent人结直肠腺癌细胞系
Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞系相关产品：SSP-25细胞、H6c7细胞、HANK细胞
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EA.Hy926细胞系相关产品：NCI-H1770细胞、SCCVII细胞、P36细胞
Hs839T细胞系相关产品：U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞
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Potorous tridactylus Kidney 2细胞系相关产品：KYSE30细胞、RCC 7860细胞、Farage细胞
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SW1222细胞系相关产品：HRA 19细胞、Ketr3细胞、Vero E-6细胞
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