RASMC Adherent大鼠主动脉平滑肌细胞系

"RASMC Adherent大鼠主动脉平滑肌细胞系
细胞背景资料：主动脉；平滑肌细胞
细胞形态：成纤维细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
RASMC Adherent大鼠主动脉平滑肌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
MOLP2细胞系相关产品：MDA231细胞、Panc2.03细胞、PTK1细胞
EOC20细胞系相关产品：COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞
CHO细胞系相关产品：MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TC-1 [Mouse lung]细胞系相关产品：Hs 274细胞、HuH-28细胞、NCIH2023细胞
Hepatoma-22细胞系相关产品：NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞
A-427细胞系相关产品：D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞
细胞生长特性：贴壁
RASMC Adherent大鼠主动脉平滑肌细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：１)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；２)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；３)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，３７度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
Madison 109细胞系相关产品：NCI-BL2141细胞、SK RC 52细胞、H510细胞
GC-2spd(ts)细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞
L1210细胞系相关产品：HCA-7细胞、SVG p12细胞、TE9细胞
B104 [Rat neuroblastoma]细胞系相关产品：C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞
T/G HA VSMC细胞系相关产品：10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
L428细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、MCF-7/AdrR细胞、H82细胞
C4-2 Bone metastatic细胞系相关产品：H-82细胞、SW-527细胞、NBL-7细胞
KYSE0030细胞系相关产品：hOMF细胞、P31/Fujioka细胞、Human Epithelioma-2细胞
H-378细胞系相关产品：SW839细胞、NCI-H87细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞
GB1细胞系相关产品：COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞
293EBNA细胞系相关产品：GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞
PLA802细胞系相关产品：CaES-17细胞、HS-5细胞、CCD-19Lu细胞
Karpas 422细胞系相关产品：WC00059细胞、NS-1细胞、TC7细胞
RASMC Adherent大鼠主动脉平滑肌细胞系
Bac12F5细胞系相关产品：RERF-LCMS细胞、WEHI 164细胞、H-28细胞
KS-SLK细胞系相关产品：SNU-668细胞、Mink Lung细胞、Nthy-ori 3-1细胞
WIL2S细胞系相关产品：TGW细胞、HOC细胞、SF-539细胞
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C33A细胞系相关产品：NCIH1770细胞、HCC2157细胞、Chinese Hamster Ovary细胞
LK2细胞系相关产品：H3396细胞、PaTu 8988 S细胞、PC-3M 2B4细胞
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Walker/LLC-WRC 256细胞系相关产品：GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞
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U-226AR1细胞系相关产品：H-1417细胞、U-937细胞、WML2细胞
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SBC3细胞系相关产品：L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞
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RASMC Adherent大鼠主动脉平滑肌细胞系
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Hs 739.T细胞系相关产品：U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞
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Epithelioma Papulosum Cyprini细胞系相关产品：EOMA细胞、Caco-2/BBe 1细胞、AR41P细胞
L-1210细胞系相关产品：Cattle chondrocytes细胞、MALME 3M细胞、MOLT.4细胞
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