NKL Suspended人NK细胞淋巴瘤细胞系

"NKL Suspended人NK细胞淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：NK细胞淋巴瘤/白血病；男性
细胞形态：淋巴母细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NKL Suspended人NK细胞淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
373MG细胞系相关产品：624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
H-498细胞系相关产品：NHRF细胞、SNU368细胞、COLO 320 DM细胞
NTERA-2 cl.D1细胞系相关产品：GM02219细胞、HMC3细胞、B16/F1细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COR-L 105细胞系相关产品：CHP212细胞、MDCKII细胞、HCCLM3细胞
BRL细胞系相关产品：HEK293细胞、LAD 2细胞、Hs 445细胞
HF-91细胞系相关产品：TE-7细胞、10T1/2细胞、Ramos-RA1细胞
细胞生长特性：悬浮
NKL Suspended人NK细胞淋巴瘤细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养常见问题及解决方案:１)培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决；２)细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留１０ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度８０%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决；３)对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度；４)对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为一块空白)，此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。
CCRF.CEM细胞系相关产品：OCIAML2细胞、SUDHL-16细胞、Hs 688(A).T细胞
BTT739细胞系相关产品：U-937细胞、H1869细胞、My-La 2059细胞
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Ca 9-22细胞系相关产品：Caco-2 BBe细胞、CHL细胞、CHP212细胞
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