"OS-RC-2 Thawing人肾癌细胞系
细胞背景资料:来源于日本人的肾脏肿瘤细胞。 可以移植到裸鼠。
细胞形态:上皮细胞样
OS-RC-2 Thawing人肾癌细胞系
细胞生长:贴壁
细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式:T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶:是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管:是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75培养瓶,加入10-15ml培养基,建议10ml培养基,也可以使用T175培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
OS-RC-2 Thawing人肾癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
细胞形态特性:上皮细胞样
CNE-1细胞系相关产品:HPBALL细胞、SUSM1细胞、IA-LM细胞
NCM460细胞系相关产品:Metastatic Variant 522细胞、Panc-02细胞、NCI-H774细胞
P3 NS1 Ag4细胞系相关产品:Hs 706.T细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞、RCC-10细胞
Psi-2 DAP细胞系相关产品:HFT 8810细胞、SJRH 30细胞、HCC1954 BL细胞
OV-2008细胞系相关产品:IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞
Bac 1.2F5细胞系相关产品:130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
EU-2细胞系相关产品:TE-11细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、NCI-H1404细胞
RPMI6666细胞系相关产品:CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
SU-86-86细胞系相关产品:HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞
OCI-LY-10细胞系相关产品:Tb1Lu细胞、OAW 42细胞、Tn-5细胞
TOG细胞系相关产品:Human Epidermoid carcinoma #2细胞、H441细胞、CCRF-SB细胞
HCC 94细胞系相关产品:624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞
Normal fibroblast-10细胞系相关产品:58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞
GP5d细胞系相关产品:SKES-1细胞、OCI-AML2细胞、Vero细胞
HeLa/DDP细胞系相关产品:COLO 320细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞
UACC 812细胞系相关产品:RL-952细胞、VERO76细胞、NE1细胞
HCT FET细胞系相关产品:NBLAN5T细胞、MDCK supertube细胞、HO1-N-1细胞
KM12SM细胞系相关产品:OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞
H676B细胞系相关产品:CEM T4细胞、AN3细胞、ROS1728细胞
Hs832T细胞系相关产品:PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
MDA 1386细胞系相关产品:LC2/Ad细胞、Huh-7.5.1细胞、HCC2185细胞
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SKMEL3细胞系相关产品:H146细胞、NCI-ADR-RES细胞、COV434细胞
PaTu8988s细胞系相关产品:Hs863T细胞、HCEC-B4G12细胞、HPBALL细胞
H1563细胞系相关产品:GM00346细胞、T98细胞、MT2细胞
H2052_MM细胞系相关产品:SNU-368细胞、GBCSD细胞、WM 451-Lu细胞
OS-RC-2 Thawing人肾癌细胞系
3 LL细胞系相关产品:UM-UC14细胞、NCI-H1954细胞、GM03671细胞
VP267细胞系相关产品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、COV-434细胞、H2029细胞
U-138MG细胞系相关产品:NS-20Y细胞、PC-9S1细胞、HFTF细胞
NCI-H1703细胞系相关产品:LC1sq细胞、NH-6细胞、OVCAR3细胞
TO 175.T细胞系相关产品:RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞
OLN 93细胞系相关产品:Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞
Tb 1 Lu细胞系相关产品:MCF.10A细胞、BEL 7402细胞、NHRF细胞
AMC-HN8细胞系相关产品:Hs746T细胞、LTEP-a-2细胞、PC3M细胞
CHO cell clone K1细胞系相关产品:HCC-95细胞、SKNSH细胞、HCC9724细胞
Hep 3B2_1-7细胞系相关产品:SMMC 7721细胞、QGP 1细胞、HEH2细胞
SKNAS细胞系相关产品:SNK-6细胞、Super Tube细胞、NIH:OVCAR4细胞
NCI-H1993细胞系相关产品:PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞
CL1细胞系相关产品:BEL 7404细胞、HEL-92细胞、MiaPaCa-2细胞
P3/NS1/Ag4-1细胞系相关产品:2008细胞、AA-Mel细胞、SMMC-7721细胞
MM134细胞系相关产品:H526细胞、SKOV-433细胞、KFB细胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞系相关产品:Capan-1细胞、HIT.T15细胞、MB 157细胞
Ishikawa细胞系相关产品:C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞
Meat Animal Research Center-145细胞系相关产品:Hu-P-T3细胞、CWR22R细胞、CCD-841-CoN细胞
Co 205细胞系相关产品:Hs1.Tes细胞、KNS81细胞、KYSE 270细胞
SN12C细胞系相关产品:H727细胞、D283-MED细胞、TJ905细胞
SUM159PT细胞系相关产品:DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
SW 527细胞系相关产品:UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞
NB19细胞系相关产品:IHC-ST1细胞、U-251 MG细胞、NCI-H1869细胞
MEC-1细胞系相关产品:HPAF-I细胞、HCC-2935细胞、NCI-H889细胞
Panc8.13细胞系相关产品:GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞
HRA-19细胞系相关产品:NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞
HNTEC细胞系相关产品:MES-SA细胞、NRK clone 52E细胞、MCM细胞
343MG细胞系相关产品:Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
T47D:A细胞系相关产品:PL-45细胞、FLC7细胞、OACP4 C细胞
130-T细胞系相关产品:G361-mel细胞、Pt-K2细胞、SUM 159PT细胞
NTERA-2 clone D1细胞系相关产品:NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞
PFSK1细胞系相关产品:DC 2.4细胞、Hs-274-T细胞、TK 10细胞
TSCCa细胞系相关产品:UWB1-289细胞、Hs 863.T细胞、OCI-LY-8细胞
OS-RC-2 Thawing人肾癌细胞系
H-1755细胞系相关产品:NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞
SNK-6细胞系相关产品:Turbot Embryonic Cell line细胞、HepaRG细胞、HL1细胞
SNK-6细胞系相关产品:Turbot Embryonic Cell line细胞、HepaRG细胞、HL1细胞
EoL-1细胞系相关产品:MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
PL-9细胞系相关产品:IOSE-29细胞、NCIH508细胞、NPC-039细胞
HIT-T15细胞系相关产品:SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品:U-87 MG细胞、LAN-1细胞、MeT 5A细胞
Institute for Medical Research-90细胞系相关产品:CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
OCI/AML5细胞系相关产品:ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞
H2196细胞系相关产品:LA-N-6(OAN)细胞、MC/CAR细胞、IGR-OV1细胞
MADISON LUNG TA-109细胞系相关产品:PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞
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