"NCI-N87 Thawing人胃癌细胞系
细胞背景资料:NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72,并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体。它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc,L-myc,myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B2RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达:N-myc,L-myc,c-cis,IGF-2,或胃泌激素释放肽。报道NCI-N87细胞的植板率为4.3%。
细胞形态:上皮细胞样
NCI-N87 Thawing人胃癌细胞系
细胞生长:贴壁
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:消化15-20分钟。1:2。4-5天长满。
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-N87 Thawing人胃癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞冻存知识普及:细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1到-2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。
细胞形态特性:上皮细胞样
NCIH1436细胞系相关产品:RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞
A-172 MG细胞系相关产品:HCC-827细胞、COLO-824细胞、MEC1细胞
AHH1细胞系相关产品:GOTO细胞、DKMG细胞、NCI-HUT-596细胞
U373 MG细胞系相关产品:D-341细胞、NUGC-4细胞、H-1395细胞
A20细胞系相关产品:HNE2细胞、HME1细胞、95C细胞
CWR22-R1细胞系相关产品:Bat lung细胞、MCF-7B细胞、LS-411细胞
HeLa 229细胞系相关产品:NTERA-2cl.D1细胞、LS 180细胞、FRTL5细胞
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MDA-MB-453细胞系相关产品:H-2444细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞、HS-729细胞
MDA-MB-134VI细胞系相关产品:OCI-AML3细胞、LM-TK-细胞、NCI-H2087细胞
J-82细胞系相关产品:293EBNA细胞、MDA-175细胞、NCI-H2172细胞
NCI H2106细胞系相关产品:IPLB-SF-21细胞、Human podocyte细胞、TE671/RD细胞
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CT-26细胞系相关产品:Immortal Pig Intestinal-2I细胞、Hs-606-T细胞、A2780/Taxol细胞
ReNcell CX细胞系相关产品:HM06.A1细胞、NCIH2122细胞、Pro-5WgaRI3C细胞
BALB/3T3 (clone A31)细胞系相关产品:OVCAR5细胞、CORL279细胞、AR-42J细胞
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VP229细胞系相关产品:SW-1222细胞、HUT 226细胞、OCM-1A细胞
F81细胞系相关产品:UPCI-SCC-90细胞、Natural Killer-92细胞、BHK21细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品:OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
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RPMI 8226/S细胞系相关产品:AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
WERI-Rb1细胞系相关产品:GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞
NCI-N87 Thawing人胃癌细胞系
SKMEL5细胞系相关产品:C57 Mouse Tumor 93细胞、PC-3M-1E8细胞、293-EBNA1细胞
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OCI-AML-4细胞系相关产品:SK-N-DZ细胞、MC9细胞、SW 837细胞
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Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞系相关产品:SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞
LS513细胞系相关产品:OCI Ly1细胞、A-10细胞、NCI-H102细胞
J-774细胞系相关产品:IMR 90细胞、A9细胞、Rat-1细胞
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NCI-N87 Thawing人胃癌细胞系
ARPE-19细胞系相关产品:CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞
SKLU1细胞系相关产品:BTI-Tn-5B1-4细胞、H2085细胞、CNE2细胞
MIA PaCa-2细胞系相关产品:NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞
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