"EC-GI-10 Thawing人食管鳞状细胞癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
EC-GI-10 Thawing人食管鳞状细胞癌细胞系
细胞生长：贴壁
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
EC-GI-10 Thawing人食管鳞状细胞癌细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗(冲洗)，加入适量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以盖住细胞，消化温度是３７℃；２)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度；(３)吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】１)吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液；２)吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入１０ml离心管中；３)平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以１０００转/分钟离心６-８分钟；４)弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入２ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】１)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于５×１０５/ml。最后要做好标记；２)分装：将细胞悬液吸出分装至２～３个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖；３)继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO２培养箱中继续培养。传代细胞２小时后开始贴附在瓶壁上。
细胞形态特性：详见细胞说明书
SNU-C2A细胞系相关产品：AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞
T-98G细胞系相关产品：COLO 320DM细胞、TC7细胞、MV-522细胞
LY细胞系相关产品：H7721细胞、H35 Reuber细胞、Karpas-422细胞
SP-2细胞系相关产品：FBHE细胞、U-226AR1细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞
NCIH2066细胞系相关产品：CAL-62细胞、hTERT-HME-1细胞、SUDHL10细胞
BEP2D细胞系相关产品：HuT102细胞、HFL-I细胞、LS-1034细胞
SK-MEL-24细胞系相关产品：HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞
AN3-CA细胞系相关产品：UCLA-SO-M20细胞、GM16136细胞、SNK-1细胞
NCI-H1792细胞系相关产品：MA 104细胞、COLO 678细胞、A-375SM细胞
ARPE-19细胞系相关产品：CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞
SW 1222细胞系相关产品：H-2029细胞、T. T细胞、CAL 51细胞
Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品：MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞
SKUT-1细胞系相关产品：H-498细胞、Kit225细胞、Ra #1细胞
NIH-OVCAR-3细胞系相关产品：251 MG细胞、Mono-Mac-6细胞、High-5细胞
HA1800细胞系相关产品：HUSMC细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、Rat Chondrosarcoma Swarm细胞
SO-Rb 50细胞系相关产品：293/EBNA细胞、FUOV1细胞、HB611细胞
P3-x63-Ag8 653细胞系相关产品：H23细胞、NCIH2126细胞、MV3细胞
ATDC-5细胞系相关产品：KMST-6细胞、OVCAR-3细胞、MBMEC细胞
Hk-2细胞系相关产品：B5537SKIN细胞、BT20细胞、PC-10细胞
K7M2-WT细胞系相关产品：SW.620细胞、CMT93细胞、SCL-I细胞
SupB15W细胞系相关产品：SNU387细胞、EOMA细胞、COLO-16细胞
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LS123细胞系相关产品：HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞
HFB细胞系相关产品：SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞
SKML-28细胞系相关产品：CT26.CL25细胞、TE32细胞、PG13细胞
SF-767细胞系相关产品：SNU251细胞、IOSE-Mar细胞、CT 26细胞
EC-GI-10 Thawing人食管鳞状细胞癌细胞系
HCASMC细胞系相关产品：NR-8383细胞、J-774细胞、MA-104细胞
COLO394细胞系相关产品：373 MG细胞、BE2-M17细胞、RGM1细胞
D283细胞系相关产品：SKMEL3细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、Det 562细胞
Y3-Ag1.2.3细胞系相关产品：HuH1细胞、NBL-1细胞、ETCC007细胞
Ej138细胞系相关产品：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
KHYG-1细胞系相关产品：Y3细胞、GM00346细胞、BALB 3T3 clone A31细胞
FL62891细胞系相关产品：PCI-SG231细胞、SNU-601细胞、SNU-668细胞
K-1735细胞系相关产品：786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞
NCIH146细胞系相关产品：NCI-H64细胞、A375SM细胞、293-F细胞
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OCI-Ly03细胞系相关产品：L929细胞、A-253细胞、MC/9细胞
HT-29细胞系相关产品：HS578细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、HcerEpic细胞
SK-MEL 28细胞系相关产品：NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞
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C3H/10T1/2 clone 8细胞系相关产品：TE 32细胞、PIG1细胞、RPMI-8402细胞
Line 522细胞系相关产品：H4IIEC3细胞、F442-A细胞、hMSC-BM细胞
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M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞系相关产品：1E8-H细胞、H548细胞、Panc-03.27细胞
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Hs675T细胞系相关产品：A2780/CP70细胞、Tu-177细胞、624 MEL细胞
H-719细胞系相关产品：Caki2细胞、H1155细胞、HuT 102细胞
SNU182细胞系相关产品：U266细胞、CC-LP-1细胞、hTERT-RPE1细胞
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
CEM clone 7细胞系相关产品：NKM-1细胞、BTI-TN5B1-4细胞、SW-620细胞
TMK1细胞系相关产品：HMEC细胞、NCIH1819细胞、RSC-96细胞
BLO11细胞系相关产品：H508细胞、H522细胞、C918细胞
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GL261细胞系相关产品：GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞
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EC-GI-10 Thawing人食管鳞状细胞癌细胞系
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E6-1细胞系相关产品：FRhK-4细胞、293 c18细胞、143 B细胞
HOS (TE85)细胞系相关产品：H4-IIE-C3细胞、HT-1080细胞、PANC-08-13细胞
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T9细胞系相关产品：PLA801D细胞、CWR22-R1细胞、NCIH250细胞
CL40细胞系相关产品：HEK-293H细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞、B16BL-6细胞
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