"NCI-H1666 Thawing人肺支气管癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
NCI-H1666 Thawing人肺支气管癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用，如细胞密度高于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：４传代；每周换液２次。
悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到最低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H1666 Thawing人肺支气管癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长，松散
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗(冲洗)，加入适量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以盖住细胞，消化温度是３７℃；２)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度；(３)吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】１)吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液；２)吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入１０ml离心管中；３)平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以１０００转/分钟离心６-８分钟；４)弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入２ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】１)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于５×１０５/ml。最后要做好标记；２)分装：将细胞悬液吸出分装至２～３个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖；３)继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO２培养箱中继续培养。传代细胞２小时后开始贴附在瓶壁上。
细胞形态特性：上皮细胞
SKM-1细胞系相关产品：HGMC细胞、GM00637H细胞、L cells细胞
TEC细胞系相关产品：BNL.CL2细胞、SK Mel 2细胞、LM3细胞
MBdSMC细胞系相关产品：NCIH810细胞、MC3T3-E细胞、HCT.116细胞
NUGC-3细胞系相关产品：H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞
LX-2细胞系相关产品：MDA-MB-435S细胞、OVCA433_Bast细胞、GM04678细胞
ECC1细胞系相关产品：MC3T3-E1 Subclone 24细胞、GM-3573细胞、DKMG细胞
H-838细胞系相关产品：CCLP-1细胞、ACC3细胞、IMR 90细胞
NTera2/D1细胞系相关产品：PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞
KU812-F细胞系相关产品：639V细胞、B35细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞
GM00346细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、BT474细胞、HFL-1细胞
NSC34细胞系相关产品：NTera 2/cl.D1细胞、H.Ep. #2细胞、LC1-Sq细胞
VCaP细胞系相关产品：Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞
PANC0813细胞系相关产品：293c18细胞、P3/ag细胞、BRL-3A细胞
HCC-94细胞系相关产品：RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞
IFRS1细胞系相关产品：SNU-423细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、OVCAR 4细胞
FCCH1018细胞系相关产品：VP 229细胞、McA-RH 7777细胞、HeLa 229细胞
H.Ep.-2细胞系相关产品：SNU-886细胞、PLA802细胞、BT-B细胞
RL95-2细胞系相关产品：Clone 166细胞、GM03570细胞、Molm 13细胞
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MOLM-16细胞系相关产品：McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞
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NIH:OVCAR-8细胞系相关产品：X63-Ag8.653细胞、QBI-HEK 293A细胞、IEC-6细胞
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NCI-H1666 Thawing人肺支气管癌细胞系
BLO11细胞系相关产品：H508细胞、H522细胞、C918细胞
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Ramos (RA 1)细胞系相关产品：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
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SU-86-86细胞系相关产品：HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞
LK-2细胞系相关产品：RAEC细胞、COLO 829细胞、A1847细胞
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NTERA-2 clone D1细胞系相关产品：NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞
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NCI-H1666 Thawing人肺支气管癌细胞系
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