"Malme-3M Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
Malme-3M Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
细胞生长：贴壁
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：４传代，２天换液１次。
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Malme-3M Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：混合生长
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞形态特性：成纤维细胞
NCIH1781细胞系相关产品：Jijoye细胞、NRK52E细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞
Jurkat E6细胞系相关产品：JHH-2细胞、P3J-HR-1细胞、MOLM13细胞
EOC20细胞系相关产品：COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞
A375细胞系相关产品：LOUNH91细胞、NTC-200细胞、Lewis Lung Cancer细胞
IGR.OV1细胞系相关产品：HT 1197细胞、C38细胞、GM17346细胞
RCK8细胞系相关产品：HCC-1954BL细胞、NCI H929细胞、C3H 10T1/2细胞
A-253细胞系相关产品：RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞
SK-RC 52细胞系相关产品：BLO11细胞、McCoy细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞
LN-229细胞系相关产品：RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞
AML-12细胞系相关产品：HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞
SNU-423细胞系相关产品：CNE-2细胞、SRA01/04 (HLE)细胞、CTLA4 Ig-24细胞
EFM192C细胞系相关产品：C3H/10T1/2-clone8细胞、LS411N细胞、H3255_DA细胞
HNE-3细胞系相关产品：SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
NCI-H2141细胞系相关产品：KTA-7细胞、Ca9-22细胞、BIC-1细胞
MGH-UI细胞系相关产品：ASH3细胞、SW-1783细胞、MGH-U1细胞
Mv1.Lu细胞系相关产品：MDA-MB-361细胞、SV40-MES13细胞、CX-1细胞
H-647细胞系相关产品：Kit225/K6细胞、P3X63 AG 8.653细胞、NRK49F细胞
NS653细胞系相关产品：H1869细胞、LAPC-4细胞、PLA-802细胞
SW-1271细胞系相关产品：HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞
VMRCLCD细胞系相关产品：L-5178-Y-R细胞、PaTu-8988s细胞、Astrocyte type I clone细胞
JB-6细胞系相关产品：H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
JB-6细胞系相关产品：H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
UMUC14细胞系相关产品：Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞
NCI-H719细胞系相关产品：Ca 9-22细胞、HLEC细胞、JG细胞
CCD-841CoTr细胞系相关产品：Fao细胞、NuTu 19细胞、UPCI-SCC-090细胞
Tb 1-Lu细胞系相关产品：BNL-HCC细胞、NCIH1688细胞、GM07404D细胞
Malme-3M Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
TE9细胞系相关产品：GM03569细胞、NCIH838细胞、RPMI-6666细胞
HCC2108细胞系相关产品：BNCL2细胞、MXI细胞、SW1783细胞
Hep G2/C3A细胞系相关产品：HeLa-229细胞、GM05887细胞、SK-MEL28细胞
H-196细胞系相关产品：HCC941122细胞、NCIH510细胞、X63Ag8-653细胞
CAL-39细胞系相关产品：B16 subline B78细胞、EA.hy 926细胞、MC-3T3-E1细胞
PG [Human lung carcinoma]细胞系相关产品：NCIH2009细胞、LWnt3A细胞、CL11细胞
SNT-8细胞系相关产品：Vero E-6细胞、HPAEC细胞、HET-1A细胞
TGW-nu细胞系相关产品：SKNEP细胞、OCI Ly10细胞、TE-85细胞
MV 4;11细胞系相关产品：KYSE 140细胞、CV-1.K细胞、RAW2647细胞
SKES1细胞系相关产品：Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞
H-2198细胞系相关产品：KMS-11细胞、NCCIT细胞、JJN-3细胞
MeT5A细胞系相关产品：OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞
GES-1细胞系相关产品：HCET细胞、PC-14细胞、GI-1细胞
HITT15细胞系相关产品：CNE-1细胞、Lu-65细胞、HR-1细胞
Ketr-3细胞系相关产品：C42细胞、CCD 966SK细胞、MES-SA/Dx5细胞
BTI-Tn-5B1-4细胞系相关产品：RMC细胞、H1581细胞、OKT 3细胞
SF-763细胞系相关产品：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞
DHL4细胞系相关产品：IALM细胞、CALU 1细胞、GDM1细胞
Walker256细胞系相关产品：NCI-H1993细胞、kms 11细胞、624mel细胞
MDAPC2B细胞系相关产品：M07e细胞、H2106细胞、SF539细胞
High 5细胞系相关产品：PANC 327细胞、MA104细胞、MKN7细胞
LICR-HN6细胞系相关产品：NK10a细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、T-ALL 1细胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞系相关产品：SK-MES1细胞、P3.653细胞、Human Embryonic Skin细胞
Roswell Park Memorial Institute 8402细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞
KTCTL140细胞系相关产品：H-2009细胞、Evsa-T细胞、COLO 678细胞
PCI-4.2细胞系相关产品：CWR22-R1细胞、D-283细胞、DMS114细胞
KMM-1细胞系相关产品：MCF12F细胞、RPMI 2650细胞、CCRFCEM细胞
KP-N-RT-BM-1细胞系相关产品：OCIAML3细胞、KAT5细胞、578T细胞
MDA-MB 453细胞系相关产品：LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞
HPDE6c7细胞系相关产品：B16F1细胞、BCPAP细胞、RCC 786-O细胞
FAO-1细胞系相关产品：LS 174 T细胞、CORL23细胞、NCI-H2330细胞
SK-UT-1细胞系相关产品：TE-14细胞、3-LL细胞、HPAEpiC细胞
EB-1细胞系相关产品：SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞
Malme-3M Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
H1417细胞系相关产品：Jiyoye细胞、GM03671C细胞、GM2131细胞
PanC1细胞系相关产品：TB1 Lu细胞、OLN-93细胞、M-20细胞
PanC1细胞系相关产品：TB1 Lu细胞、OLN-93细胞、M-20细胞
MHCC97-L细胞系相关产品：SKCO1细胞、SACC83细胞、NCI-H2126细胞
H22细胞系相关产品：KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞
Ra No. 1细胞系相关产品：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞
HFL-I细胞系相关产品：Tregs细胞、HT1376细胞、H-295细胞
A2780 CP70细胞系相关产品：Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞
DSL-6A/C1细胞系相关产品：OVCAR-420细胞、MDA175细胞、A427细胞
L 1210细胞系相关产品：BHP10-3细胞、NCI-SNU-5细胞、NCI-H2073细胞
P3.times.63 Ag8.653细胞系相关产品：KYSE-520细胞、NCI.H460细胞、MM1-S细胞
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