"AAV-293 Thawing腺病毒转化的人胚肾细胞系
细胞背景资料:我们推荐使用AAV-293细胞株繁殖腺病毒相关重组病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293细胞株,但产生的病毒滴度更高。 HEK293细胞是剪切过的腺病毒5型DNA转染的人胚肾细胞。 跟HEK293细胞一样,AAV-293细胞反式表达腺病毒E1基因,当共转染三个AAV助质粒(一个含ITR的质粒,pAAV-RC, 和E1缺失助质粒)时,可以产生有感染力的腺病毒-相关病毒颗粒。
细胞形态:上皮细胞样
AAV-293 Thawing腺病毒转化的人胚肾细胞系
细胞生长:贴壁
如何进行细胞复苏:1)从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化;2)从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;3)离心,1000rpm,5min;4)弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;5)次日更换一次培养液,继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液;2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作(戴棉手套),以免冻伤;3)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候,有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后,放在室温下,经常发生冻存管爆炸,该怎么避免出现这种情况吗?其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的?一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口,再稍拧松盖子,再放37度水浴锅中摇溶,在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中,迅速离心,再用培养基洗一遍。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞培养无菌操作步骤和注意事项:1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯,消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯,打开超净台风机,等待30min以上,以排尽臭氧。3.穿好隔离衣,戴好口罩,帽子。4.风淋2分钟。5.0.1%水泡手,擦干。6.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管,滴管,试管,培养瓶等均事先灭菌。7.打开各类瓶盖前先过火,以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰,镊子使用前应经火焰烧灼。8.水平式风机的超净台,应使瓶口斜置,应尽量避免瓶口敞开直立。9.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系;吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm,避免伸入培养瓶口或试管口;以防止细胞系的互相混杂污染。10.漏在培养瓶上或台上的液体,立即用酒精棉球擦净。11.操作完毕后恢复工作台面。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
AAV-293 Thawing腺病毒转化的人胚肾细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞形态特性:上皮细胞
RM-1细胞系相关产品:ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞
UCD-MLA-144细胞系相关产品:SW-900细胞、L132细胞、SK MEL 5细胞
Saos2细胞系相关产品:BHK21细胞、CL MC/9细胞、RH-30细胞
SNU368细胞系相关产品:NB-4细胞、GM02219细胞、Detroit562细胞
A-427细胞系相关产品:D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞
U-343-MG细胞系相关产品:OUMS-27细胞、CMT 93细胞、H1568细胞
P-388D1细胞系相关产品:OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞
V79-4细胞系相关产品:LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞
H1373细胞系相关产品:Opossum Kidney细胞、SUP-T1细胞、JEKO细胞
C4-2 Bone metastatic细胞系相关产品:H-82细胞、SW-527细胞、NBL-7细胞
HEL 92.1.7细胞系相关产品:MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
OKT 3细胞系相关产品:SNU-638细胞、ROS17/2.8细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞
HEL-92-1-7细胞系相关产品:HCC-70细胞、Panc-3_27细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞
Baby Hamster Kidney 21细胞系相关产品:H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞
HSC1细胞系相关产品:PC 61 5.3细胞、KG1细胞、OE-21细胞
Hep 2细胞系相关产品:RA细胞、MOLM-13细胞、LLC-PK-1细胞
HOS TE 85细胞系相关产品:293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞
WIL2 Secreting细胞系相关产品:H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞
KPL4细胞系相关产品:GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞
Tn5B1-4细胞系相关产品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、B16/F10细胞、RCC10RGB细胞
hFOB 1.19细胞系相关产品:HTR8细胞、MiaPaCa2细胞、THP-1(ATCC)细胞
Centre Antoine Lacassagne-27细胞系相关产品:MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞
B/C3T3细胞系相关产品:NCI-H1672细胞、HMC细胞、HNE3细胞
HFL细胞系相关产品:HeLaS3细胞、hTERT RPE-1细胞、SKLU-1细胞
SuDHL 4细胞系相关产品:Evsa T细胞、H-1876细胞、WTRL1细胞
NCIH196细胞系相关产品:YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞
AAV-293 Thawing腺病毒转化的人胚肾细胞系
Clone Y-1细胞系相关产品:C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞
HNTEC细胞系相关产品:MES-SA细胞、NRK clone 52E细胞、MCM细胞
Hs 578.T细胞系相关产品:OUMS-23细胞、CT26WT细胞、UMUC-14细胞
MOLM-13细胞系相关产品:NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞
D341MD细胞系相关产品:SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞
SJSA细胞系相关产品:CAL 12T细胞、MHCC-LM3细胞、Th17细胞
P3HR1-BL细胞系相关产品:Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞
Jurkat clone A3细胞系相关产品:LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞
Hs-688A-T细胞系相关产品:LNCaP.FGC细胞、ANA1细胞、HTR-8/SV-neo细胞
PLB 985细胞系相关产品:SHI1细胞、OEC33细胞、FRH-0201细胞
TF1细胞系相关产品:NB1-RGB细胞、SHEP1细胞、BetaTC6细胞
EOC-20细胞系相关产品:SU-DHL-10细胞、KYSE-30细胞、MTC-TT细胞
H2591细胞系相关产品:Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞
CAL85-1细胞系相关产品:COLO-684细胞、GM03569D细胞、SGC-7901/DDP细胞
C-33A细胞系相关产品:NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞
F442A细胞系相关产品:TO 175.T细胞、H23细胞、SN12-PM6细胞
BHK-21细胞系相关产品:QGP 1细胞、U266-B1细胞、SUM-190细胞
A2780 CP70细胞系相关产品:Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞
SW 13细胞系相关产品:CCD18Co细胞、UMUC-14细胞、CAOV4细胞
KATO III细胞系相关产品:MES 23.5细胞、PLC8024细胞、TGW-I-nu细胞
HLE-SRA-01/04细胞系相关产品:Panc2.03细胞、CEMC7细胞、NTera 2细胞
SMMC 7721细胞系相关产品:EBNA293细胞、NCIH1792细胞、H2347细胞
HS766T细胞系相关产品:CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞
SUM-52PE细胞系相关产品:GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞
PLC/PRF/5细胞系相关产品:Ramos.G6.C10细胞、HEY A8细胞、OS-RC-2细胞
MC/CAR细胞系相关产品:A-2058细胞、A 72细胞、WEHI 3B细胞
SK-LMS-1细胞系相关产品:HNE1细胞、MDCC-MSB-1细胞、NCI-SNU-1细胞
VP267细胞系相关产品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、COV-434细胞、H2029细胞
HCT_116细胞系相关产品:RT4-D6P2T细胞、Hs-675-T细胞、WB F344细胞
WM-239-A细胞系相关产品:Daudi细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞、MKN-28细胞
Med 283细胞系相关产品:MeT5A细胞、CHO-Lec1细胞、MS751细胞
MSCs(mUCMSCs)细胞系相关产品:NCIH64细胞、NIH:OVCAR4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞
J.E6-1细胞系相关产品:JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
AAV-293 Thawing腺病毒转化的人胚肾细胞系
NCIH2171细胞系相关产品:CAL-148细胞、NCI-H2073细胞、LICR-LON-HN6细胞
OCILY3细胞系相关产品:Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞
H-1650细胞系相关产品:IPLB-SF 21细胞、DAKIKI Clone 1细胞、U 266细胞
HPAFII细胞系相关产品:UM-UC-1细胞、SKG-3a细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞
McG-1细胞系相关产品:Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞
C22 (Clara)细胞系相关产品:EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞
BHK-21细胞系相关产品:QGP 1细胞、U266-B1细胞、SUM-190细胞
MCA 38细胞系相关产品:MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞
Hep-3B细胞系相关产品:Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞
J774 A1细胞系相关产品:Hs 895.T细胞、C-26细胞、OCIAML3细胞
HCC-1569细胞系相关产品:WSUDLCL2细胞、AN3 CA细胞、Hs606T细胞
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