"ECC12 Thawing人子宫内膜癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
ECC12 Thawing人子宫内膜癌细胞系
细胞生长：贴壁
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
ECC12 Thawing人子宫内膜癌细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞复苏基本方法：１．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。３．剪开纱布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加１０ml培养液，吹打使细胞悬浮。４．低速离心（５００～１０００转/分）５分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。５．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。收到T２５ flask细胞时，处理方式为：在寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，T２５ flask均加满培养基。请检查flask外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室。将原封之T２５ flask静置于３７°C，５%CO２培养箱中，使细胞回温至３７°C，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后，于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用)，仅留约５-１０ml培养基于flask内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。
细胞形态特性：详见细胞说明书
L428细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、MCF-7/AdrR细胞、H82细胞
T.T细胞系相关产品：SNU5细胞、H1838细胞、KNS81细胞
Functional Liver Cell-7细胞系相关产品：OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞
HOS TE 85细胞系相关产品：293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞
CCC-HEL-1细胞系相关产品：SF763细胞、MDA.MB.231细胞、WM-266-mel细胞
GP293细胞系相关产品：KU 812细胞、CL-11细胞、BMSC/hBMSCs细胞
Hx-147细胞系相关产品：PLB 985细胞、MES-23.5细胞、PG-4细胞
ACC-2细胞系相关产品：NCIH226细胞、U373 MG细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞
BL-6细胞系相关产品：CAL62细胞、Hs729细胞、HemECs细胞
LN382细胞系相关产品：526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
Nthy-ori 3-1细胞系相关产品：Hs 636 T细胞、LYR细胞、L 929细胞
MESSADX5细胞系相关产品：MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞
H-1522细胞系相关产品：KNS-42细胞、CAL-78细胞、Hs 766.T细胞
PLA801D细胞系相关产品：P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞
NCI-H358细胞系相关产品：OCI Ly3细胞、LIPF178C细胞、C918细胞
HS 683T细胞系相关产品：NCI-H522细胞、MCF-12F细胞、SKRC-52细胞
C-4 I细胞系相关产品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、THP-1(ATCC)细胞、CCRF/CEM细胞
MARC-145细胞系相关产品：MC-26细胞、HUVEC细胞、HOMEC细胞
PAa细胞系相关产品：ML2细胞、HCC2218细胞、C-8161细胞
SKGIIIA细胞系相关产品：Strain L-929细胞、MDAMB415细胞、H1672细胞
SF-767细胞系相关产品：SNU251细胞、IOSE-Mar细胞、CT 26细胞
SF-767细胞系相关产品：SNU251细胞、IOSE-Mar细胞、CT 26细胞
HIC细胞系相关产品：hA549细胞、GP2d细胞、SF 763细胞
L-cells细胞系相关产品：UPCI-SCC-090细胞、HCT 116细胞、Hopkins-92细胞
UPCI-SCC-154细胞系相关产品：C-28/I2细胞、NCIH209细胞、WM-115细胞
NCIH208细胞系相关产品：L6565细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、M-G63细胞
ECC12 Thawing人子宫内膜癌细胞系
LC-2-Ad细胞系相关产品：SKRC 39细胞、HLFa细胞、WB-F344细胞
H2591细胞系相关产品：Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞
H-196细胞系相关产品：HCC941122细胞、NCIH510细胞、X63Ag8-653细胞
NCTC clone 1469细胞系相关产品：Hs 729T细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM 239细胞
MDA-MB 361细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、HUASMC细胞、SF-126细胞
HT细胞系相关产品：WM35细胞、MIHA细胞、SNU1细胞
HCC-1833细胞系相关产品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、Panc 5.04细胞、HOCF细胞
H1648细胞系相关产品：HFSF细胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、HBE细胞
NW38细胞系相关产品：H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞
CNE2细胞系相关产品：WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞
SUDHL1细胞系相关产品：GC-1 spg细胞、ZR7530细胞、Huh 7.5.1细胞
LUDLU1细胞系相关产品：OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞
NCI-H187细胞系相关产品：RCK8细胞、Y 1细胞、HEK-293H细胞
HO8910/PM细胞系相关产品：Bac12F5细胞、U-118-MG细胞、MUS-M1细胞
Granta519细胞系相关产品：TE15细胞、Balb/c 3T3细胞、Ishikawa细胞
WIL2 Secreting细胞系相关产品：H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞
Fetal Rhesus Kidney-4细胞系相关产品：IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞
Leghorn Male Hepatoma cell line细胞系相关产品：2V6.11细胞、P-19细胞、COR-L 105细胞
Anip 973细胞系相关产品：OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞
Hs 870.T细胞系相关产品：RPVSMC细胞、MRC5细胞、KYSE510细胞
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞
293A细胞系相关产品：WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
MILE SVEN 1细胞系相关产品：AN3 CA细胞、Ha Fe细胞、GM04154细胞
Hs 281.T细胞系相关产品：COLO-320-DM细胞、NCM460细胞、ARH-77细胞
KYSE 180细胞系相关产品：H2108细胞、OVCAR-8细胞、SBC-3细胞
K562/ADR细胞系相关产品：LCMS细胞、PG-4细胞、HSC-I细胞
NCI-H740细胞系相关产品：LA-N-6细胞、AM细胞、Panc_08_13细胞
H-2444细胞系相关产品：CAL85-1细胞、PA-1细胞、NCI-H1341细胞
PanC1细胞系相关产品：TB1 Lu细胞、OLN-93细胞、M-20细胞
STO细胞系相关产品：NCIH1092细胞、WEHI3B细胞、H-146细胞
LS513细胞系相关产品：OCI Ly1细胞、A-10细胞、NCI-H102细胞
Centre Antoine Lacassagne-51细胞系相关产品：LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞
LIM 1215细胞系相关产品：U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞
ECC12 Thawing人子宫内膜癌细胞系
ELD-1细胞系相关产品：SKNEP-1细胞、22Rv-1细胞、BT-483细胞
HARAB细胞系相关产品：EA. hy 926细胞、Jurkat FHCRC细胞、FUOV1细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞系相关产品：MDA-MB361细胞、SW-837细胞、Cloudman M3细胞
769P细胞系相关产品：AHH1细胞、AU-565细胞、H-1770细胞
HEL-92细胞系相关产品：Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
SK-Col-1细胞系相关产品：H-1838细胞、NIE-115细胞、TYK-nu细胞
HN-6细胞系相关产品：ANA-1细胞、MDA-MB 453细胞、OSA细胞
NALM 6细胞系相关产品：MDA-1386细胞、BT-549细胞、EC-109细胞
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品：OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞
RGC-5细胞系相关产品：B16F0细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞、A 72细胞
SHP-77细胞系相关产品：NG108-15细胞、COLO-679细胞、Hs-27细胞
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