"NCI-H28 Thawing人恶性间皮瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
NCI-H28 Thawing人恶性间皮瘤细胞系
细胞生长：贴壁
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３-１：６传代，每周换液２-３次
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H28 Thawing人恶性间皮瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞形态特性：详见细胞说明书
IMR-32细胞系相关产品：BpRcl细胞、SKNF1细胞、Hs729T细胞
CCD 19Lu细胞系相关产品：TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞
HEK-293-FT细胞系相关产品：NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
Liver-02细胞系相关产品：MC-4细胞、GM00637F细胞、Ca-Ski细胞
C-33-A细胞系相关产品：PVEC细胞、293c18细胞、NCI-H2107细胞
SL-29细胞系相关产品：MB39细胞、LED-WiDr细胞、E0771细胞
H-2073细胞系相关产品：Sf21细胞、KMB17细胞、Huh-7细胞
Y-79细胞系相关产品：MBT2细胞、DITNC1细胞、CX-1细胞
NK10a细胞系相关产品：HuTu 80细胞、UMUC14细胞、SN12PM6细胞
A101D细胞系相关产品：SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞
H-378细胞系相关产品：SW839细胞、NCI-H87细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞
MRC-9细胞系相关产品：NCIH1155细胞、Hep-3B细胞、SNU-C2A细胞
NCIH295R细胞系相关产品：TI-73细胞、NCIH1755细胞、NCI-H2591细胞
RD-2细胞系相关产品：Hs 675.T细胞、MDA453细胞、MES-13细胞
DMS79细胞系相关产品：RBL-1细胞、VP229细胞、751细胞
WM-451Lu细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞、H23细胞
TR-146细胞系相关产品：MDA-231细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、CHO细胞
Be Wo细胞系相关产品：MDAMB330细胞、LNCaP C4-2B细胞、IMR-32细胞
CMT.64细胞系相关产品：Mv.1.Lu细胞、NCI-H2135细胞、Mel-RM细胞
NCI H82细胞系相关产品：SP2/0 Ag-14细胞、SNU668细胞、Clone Y-1细胞
C-Li-7细胞系相关产品：SW-780细胞、SJSA1细胞、KU 812F细胞
PAMC82细胞系相关产品：mousepodocyte细胞、RIN14B细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞
W256细胞系相关产品：HUC细胞、SNU-739细胞、SKMES1细胞
MeT5A细胞系相关产品：OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞
NCIH23细胞系相关产品：mIMCD-3细胞、SUPM2细胞、U-118-MG细胞
HPDLF细胞系相关产品：HCC2935细胞、MLO-Y4细胞、J774 A.1细胞
NCI-H28 Thawing人恶性间皮瘤细胞系
T98 G细胞系相关产品：Colon38细胞、MMQ细胞、32D.cl3细胞
3T3-A31细胞系相关产品：RBE细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、SupB15WT细胞
NCI H929细胞系相关产品：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
QBC-939细胞系相关产品：RC13细胞、TSUpr1细胞、P31/Fujioka细胞
RINm-5F细胞系相关产品：Capan-2细胞、NCIH1781细胞、hs 68细胞
COLO 394细胞系相关产品：HRPEpiC细胞、NPC-TW-039细胞、MHCC 97-L细胞
GM12878细胞系相关产品：KM-12细胞、COR-L26细胞、HDLM2细胞
CAL 12T细胞系相关产品：HOS-TE85细胞、SW-1990细胞、MES-SA/Dx-5细胞
Bowes melanoma cells细胞系相关产品：HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞
VERO76细胞系相关产品：AN3CA细胞、SCC090细胞、CAKI.1细胞
Clone 15 HL-60细胞系相关产品：Hs-578Bst细胞、CW-2细胞、KU-19-19细胞
H1838细胞系相关产品：DCS细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞、MDAMB157细胞
DU-4475细胞系相关产品：HCC1359细胞、CCD 841 CoTr细胞、HSKMC细胞
HCC 94细胞系相关产品：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞
PANC 327细胞系相关产品：HepG2/C3A细胞、PC-3M IE8细胞、2E8细胞
H-676细胞系相关产品：X63-Ag 8.6.5.3细胞、Hs742T细胞、H1238细胞
SW 756细胞系相关产品：G422细胞、RBL-1细胞、CCD 966SK细胞
GM03570细胞系相关产品：Onda 11细胞、NIHOVCAR3细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞
MRMT-1细胞系相关产品：HOEC细胞、SNU-638细胞、CORL88细胞
OPM-2细胞系相关产品：NK-92MI细胞、OVCAR-420细胞、MSC细胞
H-2196细胞系相关产品：HTori 3细胞、PANC3.27细胞、C1R细胞
IPEC-J2细胞系相关产品：NT2细胞、Det. 562细胞、ACC-M细胞
C2BBe 1细胞系相关产品：KYSE-510细胞、Hepa-RG细胞、130T细胞
NUGC-2细胞系相关产品：LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞
ABE8.1/2细胞系相关产品：Bovine ENDometrial cells细胞、RC-K8细胞、FL 62891细胞
LS174细胞系相关产品：HIBEC细胞、33604细胞、H1838细胞
FM88细胞系相关产品：BaF3细胞、NCTC-1469细胞、SKO007细胞
Emory University-2细胞系相关产品：ME 180细胞、MDA-MB-157细胞、HIT clone T15细胞
SK-MEL2细胞系相关产品：COLO824细胞、NCIH2286细胞、NBL-2细胞
HUVEC细胞系相关产品：QG-56细胞、HCC0078细胞、CL1-5细胞
L1210细胞系相关产品：HCA-7细胞、SVG p12细胞、TE9细胞
HLE细胞系相关产品：PLC细胞、D10G41细胞、NB4细胞
CL1-5细胞系相关产品：HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞
NCI-H28 Thawing人恶性间皮瘤细胞系
DHBE细胞系相关产品：SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞
SBC3细胞系相关产品：L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞
huH 1细胞系相关产品：Lewis lung carcinoma细胞、D283 Med细胞、343MG细胞
RMG1细胞系相关产品：MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞
32D-Cl3细胞系相关产品：FT-293细胞、Co 115细胞、H1581细胞
SNU869细胞系相关产品：Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞
P-388细胞系相关产品：ACC-3细胞、SKNBE2细胞、HLF细胞
Ra #1细胞系相关产品：PC-10细胞、MDAMB157细胞、H-1781细胞
H-1993细胞系相关产品：Panc02细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞、293A细胞
NOK细胞系相关产品：Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、RPMI 1846细胞、DoHH2细胞
HS852.T细胞系相关产品：HEL-299细胞、NCIH1915细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞
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