"B95-8 Thawing绒猴EBV转化的白细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
B95-8 Thawing绒猴EBV转化的白细胞系
细胞生长：贴壁
如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
B95-8 Thawing绒猴EBV转化的白细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞形态特性：详见细胞说明书
H774细胞系相关产品：IAR 20细胞、C28/I2细胞、Functional Liver Cell-7细胞
FO [Mouse myeloma]细胞系相关产品：P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞
SU8686细胞系相关产品：BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞
DMS 153细胞系相关产品：Hs852T细胞、CHO细胞、T/G HA VSMC细胞
DU4475细胞系相关产品：LNCaP细胞、MT-4细胞、KTC1细胞
DoTc2-4510细胞系相关产品：MS-751细胞、RPMI no. 8226细胞、SG231细胞
TE-1细胞系相关产品：OC316细胞、Sf-21细胞、HCC-1395细胞
A10细胞系相关产品：SK-MEL2细胞、alphaTC clone 6细胞、OV90细胞
V79-GalK1细胞系相关产品：GM05372E细胞、NCIH322细胞、NCIH2196细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品：H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
FHL124细胞系相关产品：GCT0404细胞、MADISON LUNG TA-109细胞、HeLa-229细胞
SKMES-1细胞系相关产品：PCI-04B细胞、MDBK细胞、GES1细胞
HMO6细胞系相关产品：NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
IBRS-2细胞系相关产品：Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞
HLEC-B3细胞系相关产品：MOLT 16细胞、COLO 205细胞、E.G7-OVA细胞
NK-92MI细胞系相关产品：SLMT1细胞、CTV-1细胞、HEK-293H细胞
HEK-293-F细胞系相关产品：201T细胞、NCI-H1048细胞、STO细胞
NCTC1469细胞系相关产品：SkChA1细胞、RL952细胞、Madison 109细胞
Caco-2 BBe细胞系相关产品：RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞
ML-2细胞系相关产品：CAMA细胞、H2452细胞、NCIH508细胞
GM2219C细胞系相关产品：AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞
GM2219C细胞系相关产品：AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞
MDA MB 361细胞系相关产品：H3255_DA细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HFF-1细胞
TE 32.T细胞系相关产品：SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞
CCD 1112SK细胞系相关产品：OVCAR-432细胞、OV1-P细胞、H-1650细胞
H-1417细胞系相关产品：CFPAC1细胞、NCIH1581细胞、KOSC-2 cl3-43细胞
B95-8 Thawing绒猴EBV转化的白细胞系
Hep-G2/C3A细胞系相关产品：alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞
ChaGo-K-1细胞系相关产品：Michigan Cancer Foundation-7细胞、LS123细胞、CAKI1细胞
H-548细胞系相关产品：HHL-5细胞、BMSC/hBMSCs细胞、HR8348细胞
CAL 148细胞系相关产品：TPC-1细胞、SNK-1细胞、HRA-19细胞
MB468细胞系相关产品：Pt-K2细胞、BT325细胞、HEK-293A细胞
BSC-1细胞系相关产品：COV 504细胞、Tn5B1-4细胞、RBMVEC细胞
NCI H226细胞系相关产品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC78细胞、BAR-T细胞
L 929细胞系相关产品：SUNE-1细胞、HPAF-II/CD18细胞、H711细胞
LAD2细胞系相关产品：IPEC-1细胞、RGB细胞、WERIRb1细胞
HTori 3细胞系相关产品：P3.653细胞、MEC1细胞、PGLH7细胞
PTK1细胞系相关产品：UPCISCC154细胞、CHP 100细胞、GLRK 13细胞
MS 751细胞系相关产品：OVCA5细胞、BALB 3T3 clone A31细胞、NCI-H520细胞
D283MED细胞系相关产品：Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
GAK细胞系相关产品：RSC-364细胞、C-28I2细胞、SVEC4-10细胞
A-10细胞系相关产品：Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞
SHZ-88细胞系相关产品：PF382细胞、NCIH1648细胞、Metastatic Variant 522细胞
SHZ-88细胞系相关产品：PF382细胞、NCIH1648细胞、Metastatic Variant 522细胞
TF1细胞系相关产品：NB1-RGB细胞、SHEP1细胞、BetaTC6细胞
MDA-MB 361细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、HUASMC细胞、SF-126细胞
TE-12细胞系相关产品：SKNBE细胞、U2-OS细胞、SuDHL 1细胞
MCA 205细胞系相关产品：SW 1417细胞、Vero-E6细胞、SCL1细胞
MKN-7细胞系相关产品：KM12 SM细胞、108CC15细胞、NR-8383细胞
NK-92 MI细胞系相关产品：H2291细胞、GP293细胞、BE(2)M17细胞
C8D1A细胞系相关产品：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞
SiHa细胞系相关产品：SW 620细胞、HCT8细胞、A.704细胞
HCT.116细胞系相关产品：SO-Rb 50细胞、P3-X63-Ag8-653细胞、SHSY-5Y细胞
Hk-2细胞系相关产品：B5537SKIN细胞、BT20细胞、PC-10细胞
VMM5细胞系相关产品：NuTu 19细胞、HCC9724细胞、EM3细胞
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品：HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞
L 428细胞系相关产品：SNU475细胞、HCC-1833细胞、QGP1细胞
alphaTC clone 6细胞系相关产品：L细胞、PK(15)细胞、Hs 683.T细胞
SP2-0-Ag14细胞系相关产品：KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞
NCI-H460细胞系相关产品：SK Mel28细胞、NCI-H1793细胞、SW 480细胞
B95-8 Thawing绒猴EBV转化的白细胞系
H660细胞系相关产品：TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞
SKHEP-1细胞系相关产品：SNT-8细胞、NCI-H1436细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞
DoTc2-4510细胞系相关产品：MS-751细胞、RPMI no. 8226细胞、SG231细胞
NP-69细胞系相关产品：H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞
MHH-CALL-2细胞系相关产品：HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞
Hmy.2 CIR细胞系相关产品：Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞
VMM5A细胞系相关产品：CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
HO-1-N-1细胞系相关产品：PGLH7细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、HUSMC细胞
H35细胞系相关产品：OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞
HOCF细胞系相关产品：Psi2-DAP细胞、RPMI1788细胞、Clone Y1细胞
Kasumi 1细胞系相关产品：Nb2-11细胞、PC.3细胞、SK_N_FI细胞
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