"16HBE14o- Thawing人支气管上皮样细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
16HBE14o- Thawing人支气管上皮样细胞系
细胞生长：贴壁
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
16HBE14o- Thawing人支气管上皮样细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞形态特性：详见细胞说明书
Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞系相关产品：Capan-1细胞、HIT.T15细胞、MB 157细胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品：ECC-12细胞、HCC2108细胞、CHP 100细胞
TE3A细胞系相关产品：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞
WEHI-3细胞系相关产品：BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞
NCI-H1755细胞系相关产品：BEAS2B细胞、Leukemia 1210细胞、LCLC103H细胞
MV4:11细胞系相关产品：P30OHK细胞、K1细胞、BXPC3细胞
P30/0HK细胞系相关产品：UMUC3细胞、H2107细胞、293 Ad5细胞
QGY-7703细胞系相关产品：FLC7细胞、PFSK1细胞、MDCK2细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞系相关产品：AGS细胞、P388.D1细胞、P3X63 AG8-653细胞
OCI-AML-4细胞系相关产品：SK-N-DZ细胞、MC9细胞、SW 837细胞
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞
TM-4细胞系相关产品：OAC-P4C细胞、HEC-1-B细胞、CCD966SK细胞
A3细胞系相关产品：SF-763细胞、X63-Ag8-653细胞、NPA87细胞
NCI-H526细胞系相关产品：P3-X63-Ag8.653细胞、HS-940-T细胞、MCMEC细胞
BxPC-3细胞系相关产品：RPMI-7666细胞、VE细胞、RPMI6666细胞
QSG-7701细胞系相关产品：SW 626细胞、Calu 3细胞、C2A细胞
P 3 HR 1细胞系相关产品：SK-MEL-31细胞、Monomac-1细胞、NCI-HUT-460细胞
TE6细胞系相关产品：MEF细胞、Hs 274.T细胞、DLM8细胞
NCI-H735细胞系相关产品：OVCA433细胞、MES-SA Dx5细胞、OsACL细胞
J774A1细胞系相关产品：H676细胞、OVCAR 432细胞、CaEs17细胞
SK-RC-42细胞系相关产品：LoMeT-ccRcc细胞、U87细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞
SK-RC-42细胞系相关产品：LoMeT-ccRcc细胞、U87细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞
HFB细胞系相关产品：SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞
H2171细胞系相关产品：LS513细胞、293T/17细胞、HSC-4细胞
HS578T细胞系相关产品：MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞
EFM192A细胞系相关产品：X63-Ag8-653细胞、HSC（Human Schwann）细胞、SU-DHL-8细胞
16HBE14o- Thawing人支气管上皮样细胞系
WM-2664细胞系相关产品：Mahlavu细胞、SNUC2B细胞、MDCK supertube细胞
SuDHL 1细胞系相关产品：HSKMC细胞、BE2M17细胞、NCIH3255细胞
MHH-CALL-2细胞系相关产品：HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞
CAL-85-1细胞系相关产品：SW837细胞、WIL2 Secreting细胞、NCI-H1688细胞
Me Wo细胞系相关产品：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞
HCoEpiC细胞系相关产品：P36细胞、C8D1A细胞、HONE-1细胞
STO细胞系相关产品：NCIH1092细胞、WEHI3B细胞、H-146细胞
A549ATCC细胞系相关产品：H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞
SV40-MES13细胞系相关产品：KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞
Danio rerio Gill细胞系相关产品：SKG-3a细胞、343MG细胞、FHs74Int细胞
ssMCF7细胞系相关产品：Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
U118MG细胞系相关产品：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
Vx-2细胞系相关产品：HuPT3细胞、GL-261细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞
FO [Mouse myeloma]细胞系相关产品：P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞
MDAPCa2b细胞系相关产品：TE3细胞、JM1细胞、Lieming Xu-2细胞
Vero E-6细胞系相关产品：OCI-AML4细胞、T84细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞
U87细胞系相关产品：PANC1005细胞、ECC10细胞、RCM1细胞
HOP 62细胞系相关产品：SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞
TE 32.T细胞系相关产品：SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞
CHL-CL-11细胞系相关产品：AE1201细胞、H-2228细胞、H125细胞
RPE-hTERT细胞系相关产品：alpha TC1.6细胞、NTERA2细胞、D-283MED细胞
Neuro2a细胞系相关产品：DKMG细胞、IPAM-WT细胞、H-1651细胞
TE-32细胞系相关产品：P3-Jiyoye细胞、hTERT-RPE细胞、EVSAT细胞
EO771细胞系相关产品：NCIH841细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞、Hs 852.T细胞
SKMEL28细胞系相关产品：Panc 05.04细胞、Pt K1细胞、PC3M-1E8细胞
LM6细胞系相关产品：NFS 60细胞、NCI-H735细胞、P30-OHKUBO细胞
H-1694细胞系相关产品：HEL 92.1.7细胞、526-mel细胞、SKMEL-2细胞
Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品：G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞
T. T细胞系相关产品：Experimental Mammary Tumour-6细胞、FDC-P1细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞
Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品：G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞
HSC（Human Schwann）细胞系相关产品：CCC-HHM-2细胞、SupB15W细胞、GM17219细胞
ARO细胞系相关产品：2PK3细胞、MOLM-14细胞、A375.S2细胞
Calu3细胞系相关产品：PY8119细胞、CV1细胞、TM3细胞
16HBE14o- Thawing人支气管上皮样细胞系
373 MG细胞系相关产品：OEC19细胞、MAVER1细胞、NCIH295R细胞
MV-4-11细胞系相关产品：OCILY-3细胞、SPC-A1细胞、UACC-893细胞
MV-4-11细胞系相关产品：OCILY-3细胞、SPC-A1细胞、UACC-893细胞
C-4-I细胞系相关产品：Capan2细胞、beta-TC6细胞、Jijoye细胞
HEK 293A细胞系相关产品：ESC-410细胞、LC-1/sq细胞、RGC5细胞
MOLM-14细胞系相关产品：C-643细胞、OCI-Ly07细胞、PANC0203细胞
RCC10细胞系相关产品：LAPC4细胞、H2108细胞、P116细胞
Jurkat E6细胞系相关产品：JHH-2细胞、P3J-HR-1细胞、MOLM13细胞
CATH-a细胞系相关产品：M210B4细胞、HCFB（HCF）细胞、Hs-688A-T细胞
H766T细胞系相关产品：Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞
MFM223细胞系相关产品：TMD8细胞、Hepatoma 22细胞、P3J-HR-1细胞
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