"MDBK Thawing牛肾细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
MDBK Thawing牛肾细胞系
细胞生长：贴壁
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MDBK Thawing牛肾细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞形态特性：详见细胞说明书
LCD细胞系相关产品：NCI-SNU-520细胞、ISHI细胞、GM12878细胞
PC615.3细胞系相关产品：HCC827细胞、LIM1215细胞、BEL7402细胞
AsPC-1细胞系相关产品：MCF12A细胞、HCT-8/V细胞、LSECs细胞
OVCAR3细胞系相关产品：BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞
Hs 636.T细胞系相关产品：EFO-27细胞、HCC1428细胞、PAa细胞
Madison 109细胞系相关产品：NCI-BL2141细胞、SK RC 52细胞、H510细胞
T/G HA VSMC细胞系相关产品：10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
SW48细胞系相关产品：NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
AZ 521细胞系相关产品：A72细胞、H1651细胞、U-343-MG细胞
8305-C细胞系相关产品：CDC/EU.HMEC-1细胞、TGHAVSMC细胞、MCF12F细胞
GC-2细胞系相关产品：OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞
SN12PM6细胞系相关产品：COLO679细胞、HeLa细胞、KYSE180细胞
H-2066细胞系相关产品：OVCA433_Bast细胞、RKO-AS-45-1细胞、Panc 02细胞
ssMCF-7细胞系相关产品：NCI-SNU-C1细胞、NCI.H522细胞、AZ 521细胞
H719细胞系相关产品：CAL-78细胞、OKT 3细胞、NIH:OVCAR-10细胞
3T6 Swiss Albino细胞系相关产品：D283-MED细胞、WEHI 3细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞
Colo741细胞系相关产品：KYSE-410细胞、EnCa1细胞、TE671细胞
GP-293细胞系相关产品：Mo7e细胞、NCI-522细胞、LCMS细胞
L-M(TK-)细胞系相关产品：GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞
SNB19细胞系相关产品：TOV21细胞、PFSK-1细胞、H748细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品：NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品：NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
Ly3细胞系相关产品：NCI-H295R细胞、MDA-MB-330细胞、LLC-WRC 256细胞
U-87细胞系相关产品：LLC-WRC 256细胞、TE-12细胞、McArdle RH-7777细胞
NCIH1651细胞系相关产品：KG-1细胞、HuT 78细胞、NCIH1792细胞
WIL2-S细胞系相关产品：COLO 824细胞、TH1细胞、HRPEpiC细胞
MDBK Thawing牛肾细胞系
ML-2细胞系相关产品：CAMA细胞、H2452细胞、NCIH508细胞
L-363细胞系相关产品：H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
PAa细胞系相关产品：ML2细胞、HCC2218细胞、C-8161细胞
TGW细胞系相关产品：Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞
KYSE50细胞系相关产品：HMVEC细胞、OCI-Ly10细胞、EJ-1细胞
MB 157细胞系相关产品：UPCI:SCC090细胞、Z-138细胞、Hepatoma 22细胞
786O细胞系相关产品：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
NCI-H1651细胞系相关产品：Caco-2/ATCC细胞、NCI/ADRRES细胞、ARO 81-1细胞
BNL CL2细胞系相关产品：BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
HEEpiC细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞
W133细胞系相关产品：HN 4细胞、UPCISCC090细胞、Sp2/0细胞
IOSE29细胞系相关产品：C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞
Ramos 2G6 4C10细胞系相关产品：PANC-04-03细胞、TE-85细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞
OCI Ly10细胞系相关产品：SCL-1细胞、HD-LM-2细胞、A2780-CP细胞
NOMO1细胞系相关产品：Keio University-19-19细胞、Evsa T细胞、Kit 225 K6细胞
SEG1细胞系相关产品：NCI H929细胞、MDA-435细胞、Jurkat E6细胞
QBC(939)细胞系相关产品：HSC（Human Schwann）细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞
HLEB3细胞系相关产品：McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞
Michigan Cancer Foundation-10A细胞系相关产品：ST486细胞、VP303细胞、3T3-J2细胞
TE-5细胞系相关产品：Leydig细胞、KU1919细胞、T.T细胞
MOLT.4细胞系相关产品：H295细胞、A2780S细胞、DCS细胞
Institute for Medical Research-90细胞系相关产品：CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
FBHE细胞系相关产品：NCI-H1781细胞、A2780/CP细胞、MHCC97L细胞
INS1细胞系相关产品：OVCAR-8细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、MRCV细胞
ASH3细胞系相关产品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、MM1细胞、NCTC-929细胞
SNB.19细胞系相关产品：LLC-MK2细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞、KYSE-180细胞
HN6细胞系相关产品：HPB-ALL细胞、NOZ细胞、MOPC细胞
Psi2 DAP细胞系相关产品：NCIH128细胞、A9(Hamprecht)细胞、ML2细胞
KMST6细胞系相关产品：MH7A细胞、SUM102PT细胞、NB19-RIKEN细胞
3T3细胞系相关产品：Me-Wo细胞、WERIRb1细胞、Line 207细胞
MDAMB134VI细胞系相关产品：R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞
KP-4细胞系相关产品：ES-2细胞、IR983F细胞、P-19细胞
HCT8细胞系相关产品：P3 NS1 Ag4细胞、G361mel细胞、MDA MB231细胞
MDBK Thawing牛肾细胞系
WEHI-3细胞系相关产品：BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞
A431细胞系相关产品：HS688AT细胞、H740细胞、HCC 94细胞
LS-1034细胞系相关产品：NCI-H2107细胞、OsACL细胞、A 549细胞
IPEC-1细胞系相关产品：P3 (Jiyoye)细胞、CCRF/CEM/0细胞、SKNO1细胞
C-Lu65细胞系相关产品：MOLP-2细胞、RCC10细胞、NCIH2009细胞
HPDLF细胞系相关产品：HCC2935细胞、MLO-Y4细胞、J774 A.1细胞
HDLM-2细胞系相关产品：MHCC-97细胞、D407细胞、H2106细胞
SkChA1细胞系相关产品：REC1细胞、H-146细胞、LU165细胞
SCC 25细胞系相关产品：NCI-H1650细胞、hESC细胞、PAN 02细胞
SW-1222细胞系相关产品：SEG1细胞、GTL 16细胞、RCK-8细胞
HARAB细胞系相关产品：EA. hy 926细胞、Jurkat FHCRC细胞、FUOV1细胞
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