FAK+/+ Thawing小鼠成纤维细胞系

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中文名称:FAK+/+ Thawing小鼠成纤维细胞系	英文名称:FAK+/+ Thawing
保存条件: 低温避光	纯度规格: 1x10(6)viable cells/ml
产品类别: 有机化学品

"FAK+/+ Thawing小鼠成纤维细胞系

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：成纤维细胞样

FAK+/+ Thawing小鼠成纤维细胞系

细胞生长：贴壁

细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)

细胞传代方法：１：４-１：８传代；

冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。

细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

FAK+/+ Thawing小鼠成纤维细胞系

细胞生长特性：贴壁生长

细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。

细胞形态特性：成纤维细胞

A72细胞系相关产品：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞

SF 126细胞系相关产品：B16/BL6细胞、BSC-1细胞、SUM102细胞

293 F细胞系相关产品：Huh-7.5.1细胞、RS4-11细胞、U87细胞

GRSL细胞系相关产品：Granta519细胞、DBTRG-05MG细胞、NCI-H1836细胞

P3HR1-BL细胞系相关产品：Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞

HCC-1419细胞系相关产品：Adeno 293细胞、MCFs细胞、INS-1E细胞

COLO-205细胞系相关产品：NCI-H1105细胞、COV 434细胞、NMCG-1细胞

RK13细胞系相关产品：CCLP1细胞、AMJ2C8细胞、H-2444细胞

LICR-LON-HN6-R细胞系相关产品：751细胞、VM-CUB-1细胞、IGR.OV1细胞

PTK-1细胞系相关产品：H2052细胞、CFPAC细胞、MuM-2B细胞

BT 325细胞系相关产品：BCaP-37细胞、KNS-62细胞、DU-4475细胞

J82 COT细胞系相关产品：TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞

OK细胞系相关产品：Y3-Ag123细胞、C-8161细胞、KU 812细胞

HPAF2细胞系相关产品：EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞

N-2a细胞系相关产品：SUDHL16细胞、Mel RM细胞、Nittby-Salford 1细胞

Mel526细胞系相关产品：LC-MS细胞、NCI-522细胞、HCT.116细胞

NCIH1436细胞系相关产品：RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞

H64细胞系相关产品：EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞

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H460细胞系相关产品：Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞

RBL-I细胞系相关产品：PFSK1细胞、B16细胞、Institute for Medical Research-32细胞

T98-G细胞系相关产品：H-28细胞、D341 Med细胞、OV1/P细胞

NCIH1770细胞系相关产品：J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞

SNUC2A细胞系相关产品：A 549细胞、Panc_02_03细胞、Michigan Cancer Foundation-12A细胞

HS688AT细胞系相关产品：OPM2细胞、COV 504细胞、Adeno 293细胞

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AR42J细胞系相关产品：COR-L88细胞、TI-73细胞、HeLa S 3细胞

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公司简介

上海宾穗生物科技有限公司是一家集研发、生产、销售与服务于一体的专业生物制品和化学品供应商。公司总部位于上海市莘庄工业区，拥有现代化办公大楼、标准实验室与生产厂房。上海宾穗生物科技有限公司拥有一支由教授和博士为核心的技术团队，提供超过100000的生物、化学产品，产品涵盖化学、医药、材料、能源、生物等科研领域。公司秉承“客户至上、服务一流”的发展理念，致力于将优质的产品和服务提供给客户。上海宾穗生物科技有限公司整合众多的优势市场资源，以匠心服务广大客户，我们可以为客户提供Binsui、TCI等国内外各种品牌的高品质试剂产品，充分满足客户的试剂需求。

成立日期	2018-01-10 （7年）	注册资本	635万元人民币
员工人数	50-100人	年营业额	￥ 500万-1000万
主营行业	通用试剂,高纯试剂,催化试剂,基础无机试剂	经营模式	试剂

上海宾穗生物科技有限公司

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公司成立：7年
注册资本：635万元人民币
企业类型：有限责任公司(自然人投资或控股)
主营产品：生物试剂、化学试剂、标准品、化工试剂
公司地址：李经理（手机号和微信号：18301908279 QQ：1292752157）上海市紫竹科学园区

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