MOLT-3 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系

"MOLT-3 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
细胞背景资料：急性T淋巴细胞白血病；男性
细胞形态：淋巴母细胞样
MOLT-3 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
细胞生长：悬浮
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MOLT-3 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
细胞生长特性：悬浮
细胞培养相关问题总结：冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂；细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有１０-１５ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题；可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活；培养细胞时应使用５%或１０%CO２？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO３-/CO３２-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO３的含量将决定细胞培养时应使用的CO２浓度。当培养基中NaHCO３含量为每公升３.７g时，细胞培养时应使用１０%CO２；当培养基中NaHCO３为每公升１.５g时，则应使用５%CO２培养细胞。何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素？除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NE1-E6E7细胞系相关产品：SNU668细胞、H-1105细胞、MOLT 4细胞
H-647细胞系相关产品：Kit225/K6细胞、P3X63 AG 8.653细胞、NRK49F细胞
SCL1细胞系相关产品：NCTC clone 1469细胞、HTR-8细胞、RWPE1细胞
UMNSAH-DF1细胞系相关产品：PC10细胞、BE(2)-M17细胞、CAL-12T细胞
H64细胞系相关产品：EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞
LY-R细胞系相关产品：EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
TK10细胞系相关产品：KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞
HuTu-80细胞系相关产品：Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
MeSoTheliOma-211H细胞系相关产品：BIU-87细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、SU-DHL-1细胞
SW 954细胞系相关产品：A375-S2细胞、Mel526细胞、SUIT 2细胞
HBSMC细胞系相关产品：Hs 832(C).T细胞、SW1222细胞、CWR22R细胞
BT 549细胞系相关产品：DU4475细胞、HS-729细胞、Mouse podocyte细胞
SKLMS1细胞系相关产品：SCLC-21H细胞、PLA 802细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞
LNCaP.FGC细胞系相关产品：NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞
MAD109细胞系相关产品：Karpas422细胞、BC-PAP细胞、CL34细胞
HBZY 1细胞系相关产品：HOS-MNNG细胞、SK 1细胞、UPCISCC090细胞
NCI-H2073细胞系相关产品：Gerner 7666细胞、HS-68细胞、B35细胞
MDCC-MSB-1细胞系相关产品：C-33-A细胞、RDES-1细胞、NCI-H1623细胞
U118MG细胞系相关产品：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
Lu-65细胞系相关产品：LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞
NCIADR.RES细胞系相关产品：SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞
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MOLT-3 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
MHCC 97-L细胞系相关产品：CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞
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NCI-SNU-119细胞系相关产品：NRK clone 49F细胞、MDAMB134细胞、H-2172细胞
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EFM192C细胞系相关产品：C3H/10T1/2-clone8细胞、LS411N细胞、H3255_DA细胞
MSTO-211H细胞系相关产品：H-748细胞、Bx-PC3细胞、ECGI10细胞
P3X63 AG8-653细胞系相关产品：T-CAM2细胞、HMEC细胞、HELF细胞
ES2细胞系相关产品：OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞
NCI-H1092细胞系相关产品：RPMI 2650细胞、COR-L105细胞、KOSC-2细胞
HeLa细胞系相关产品：Panc2_03细胞、SK-N-SH细胞、PC-9S1细胞
Panc2_03细胞系相关产品：H-1836细胞、D 407细胞、UCLA SO M21细胞
HHL-5细胞系相关产品：PL 5细胞、NCI-H1963细胞、LAD2细胞
HT-3细胞系相关产品：TE353.SK细胞、SK-N-BE2细胞、WM-239细胞
Bat lung细胞系相关产品：LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞
H1155细胞系相关产品：HM细胞、C32 [Human melanoma]细胞、NCIH526细胞
MOLT-3 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
A204细胞系相关产品：HuT 102细胞、KY-270细胞、TK10细胞
CAMA1细胞系相关产品：HL-7702细胞、MX-1细胞、2V6.11细胞
AML 12细胞系相关产品：Kit225 K6细胞、NCI-H1882细胞、NCIN87细胞
VMRCLCD细胞系相关产品：L-5178-Y-R细胞、PaTu-8988s细胞、Astrocyte type I clone细胞
HPAFII细胞系相关产品：UM-UC-1细胞、SKG-3a细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞系相关产品：SNU-869细胞、SK-Col-1细胞、D341细胞
PFSK-1细胞系相关产品：GT38细胞、Tu-212细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞系相关产品：CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞
343MG细胞系相关产品：Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
AML12细胞系相关产品：MC-3T3-E1细胞、PIG3细胞、Panc-08.13细胞
SNU761细胞系相关产品：NCIH1694细胞、H1755细胞、Bac 1.2F5细胞
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