AML12 小鼠肝细胞系

"AML12 小鼠肝细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
AML12 小鼠肝细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
细胞培养更好经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很好时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
AML12 小鼠肝细胞系
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗(冲洗)，加入适量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以盖住细胞，消化温度是３７℃；２)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度；(３)吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】１)吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液；２)吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入１０ml离心管中；３)平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以１０００转/分钟离心６-８分钟；４)弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入２ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】１)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于５×１０５/ml。最后要做好标记；２)分装：将细胞悬液吸出分装至２～３个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖；３)继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO２培养箱中继续培养。传代细胞２小时后开始贴附在瓶壁上。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
CBRH-7919细胞系相关产品：MH-S细胞、J774A.1细胞、BT20细胞 
Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞系相关产品：T-84细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、PA I细胞 
NCI-H2347细胞系相关产品：KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞 
EA. hy 926细胞系相关产品：SUM190PT细胞、THLE-2细胞、AU 565细胞 
HCC-1500细胞系相关产品：SKMES1细胞、Nb-2细胞、SW-1783细胞 
Co 115细胞系相关产品：COLO829细胞、JHH7细胞、NCIH1688细胞 
JROECL21细胞系相关产品：OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞 
ANA-1细胞系相关产品：RBE4细胞、Rat 2细胞、NCI-460细胞 
SW-403细胞系相关产品：TF-1a细胞、HSC5细胞、Lewis-Lung细胞 
LIPF155C细胞系相关产品：DMS-114细胞、MonoMac6细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞 
OCILY-10细胞系相关产品：P3-X63-Ag8-653细胞、WM 239A细胞、Cor L51细胞 
MFD-1细胞系相关产品：LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞 
H-1573细胞系相关产品：HUCEC细胞、RCSMC细胞、SkChA-1细胞 
MCF 7B细胞系相关产品：J-111细胞、CCD 1112SK细胞、Hep 2细胞 
Me Wo细胞系相关产品：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞 
ST-2细胞系相关产品：SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞 
ST-2细胞系相关产品：SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞 
Hs 274细胞系相关产品：CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞 
FHC细胞系相关产品：HELA-GFP细胞、T-24细胞、S91细胞 
HIBEpiC细胞系相关产品：HEK 293A细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞、H2107细胞 
AML12 小鼠肝细胞系
A375-SM细胞系相关产品：RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞 
KMST-6细胞系相关产品：DF-1细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、NCIH441细胞 
L5178Y TK+/-3.7.2c细胞系相关产品：293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞 
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞 
786-O RCC细胞系相关产品：SMA 560细胞、Murine Carcinoma-38细胞、VK2/E6E7细胞 
PC3M细胞系相关产品：BMSC/hBMSCs细胞、KM12SM细胞、PNT-1A细胞 
L-5178-Y-R细胞系相关产品：WPE-int细胞、SW260细胞、OUMS23细胞 
NCIH128细胞系相关产品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞 
McA-RH8994细胞系相关产品：LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞 
CF PAC-1细胞系相关产品：WSU-DLCL(2)细胞、NCI-H841细胞、TE12细胞 
SJRH 30细胞系相关产品：NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞 
COS-1细胞系相关产品：OACP4C细胞、H-2172细胞、CL-34细胞 
PANC 203细胞系相关产品：TE4细胞、WEHI-3细胞、L-WRN细胞 
Rat Chondrosarcoma Swarm细胞系相关产品：HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞 
V-79-4细胞系相关产品：HBZY 1细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞、A204细胞 
COLO320-DM细胞系相关产品：HuO9细胞、RBMEC细胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞 
P3/NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品：H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞 
HBEpiC细胞系相关产品：RWPE-2细胞、SKO3细胞、GM03571细胞 
SKLU01细胞系相关产品：WM 239细胞、MM-1S细胞、ATDC-5细胞 
THP-1(ATCC)细胞系相关产品：J.E6-1细胞、BLO-11细胞、Vero 76细胞 
Cloudman M3细胞系相关产品：Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞 
RT-112细胞系相关产品：C32-mel细胞、HeLa/DDP细胞、RCC10细胞 
SKGT2细胞系相关产品：Hs 895 T细胞、SK LU 1细胞、TE 32细胞 
HDMEC细胞系相关产品：Hs895.T细胞、GLC-82细胞、Karpas 422细胞 
LNCaP FGC细胞系相关产品：H446细胞、SMC-1细胞、H1092细胞 
HemECs细胞系相关产品：Beta-TC-6细胞、H-1184细胞、COS-7细胞 
IFRS1细胞系相关产品：SNU-423细胞、GM06141细胞、TE13细胞 
U-373MG细胞系相关产品：Astrocyte type I clone细胞、FU-97细胞、DoTc2 4510细胞 
YES2细胞系相关产品：MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞 
TK10细胞系相关产品：KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞 
Evsa-T细胞系相关产品：PC-9S1细胞、C42细胞、NCI-H1703细胞 
MT2细胞系相关产品：HS-294-T细胞、BIU87细胞、DMS273细胞 
N1E-115细胞系相关产品：87MG细胞、MDA-MB-175-VII细胞、AML193细胞 
L5178YR细胞系相关产品：D10细胞、L M (TK-)细胞、NCIH748细胞 
EVSAT细胞系相关产品：MB49细胞、HCC0044细胞、PVEC细胞 
OCI Ly10细胞系相关产品：SCL-1细胞、HD-LM-2细胞、A2780-CP细胞 
HeLa/S3细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞 
NCIH209细胞系相关产品：LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞 
CAL-27细胞系相关产品：CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞 
P388细胞系相关产品：KG1细胞、H-378细胞、NH-6细胞 
NCI H747细胞系相关产品：NKL细胞、HeLa-S3细胞、Colon 26细胞 
AML12 小鼠肝细胞系
b.End3细胞系相关产品：Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞 
RCC-10细胞系相关产品：SKCO-1细胞、OCI-Ly 18细胞、NCIH1355细胞 
UMUC-14细胞系相关产品：HCAEC细胞、NS-20Y细胞、CTLL2细胞 
SRA 01/04细胞系相关产品：HN4细胞、CEM-0细胞、MC38细胞 
HCC-15细胞系相关产品：MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞 
KE39细胞系相关产品：HFT8810细胞、ChaGo K-1细胞、HBE 135-E6/E7细胞 
ZYM-SVEC01细胞系相关产品：EB-1细胞、HOS-143B细胞、KTCTL-140细胞 
EoL-1-cell细胞系相关产品：BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞 
MDA-330细胞系相关产品：SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞 
NIHOVCAR3细胞系相关产品：FL62891细胞、Panc_04_03细胞、KYSE 450细胞 
H-1770细胞系相关产品：RSC 96细胞、ABC-1细胞、FRTL-5 Cl 2细胞 
NCI-H2347细胞系相关产品：KATO III细胞、H-69细胞、KBM5细胞 
"