英文名称:Human monocyte chemotactic protein 4 (MCP-4 / CCL13) ELISA kit
规格:96T/48T
使用范围:科研范围内使用
各种种属:人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、牛、羊…
标本齐全:血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液、关节液、胸腔yi液等…
保存条件:2-8℃
样品收集、处理及保存方法 1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗 3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。 2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。 3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。 4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。 5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。 6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。 7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。 8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。 9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
上海西格生物科技有限公司
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