PA317 cell line逆转录病毒包被的NIH3T3细胞系

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中文名称:PA317 cell line逆转录病毒包被的NIH3T3细胞系	英文名称:PA317 cell line
保存条件: 低温避光	纯度规格: 1x10(6)viable cells/ml
产品类别: 有机化学品

"PA317 cell line逆转录病毒包被的NIH3T3细胞系

细胞背景资料：胚胎；成纤维细胞；NIH Swiss

细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。

细胞形态：上皮细胞样

细胞生长：贴壁

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

PA317 cell line逆转录病毒包被的NIH3T3细胞系

为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。

细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

细胞生长特性：贴壁

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

PA317 cell line逆转录病毒包被的NIH3T3细胞系

细胞形态特性：详见细胞说明书

Colo699细胞系相关产品：H-2330细胞、H-661细胞、HCT116/L细胞

TM-4细胞系相关产品：OAC-P4C细胞、HEC-1-B细胞、CCD966SK细胞

SUM 159PT细胞系相关产品：GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞

CAL 12T细胞系相关产品：HOS-TE85细胞、SW-1990细胞、MES-SA/Dx-5细胞

HCT 116细胞系相关产品：H1694细胞、MOLT-16细胞、Metastatic Variant-522细胞

HTh 74细胞系相关产品：MDA-MB-415细胞、GM00637细胞、IOSE-Mar细胞

NK-10A细胞系相关产品：X63细胞、EFO 27细胞、LL/2(LLc1)细胞

H520细胞系相关产品：EoL-1 cell细胞、NCIH660细胞、MLA-144细胞

NCIN87细胞系相关产品：H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞

NCI.H226细胞系相关产品：HEC1-B细胞、5-8F细胞、NCI H508细胞

COLO320/DM细胞系相关产品：Pro-Lec1.3C细胞、Jurkat-FHCRC细胞、GOTO细胞

H295细胞系相关产品：T173细胞、CMK细胞、KRCY细胞

HEK 293-EBNA细胞系相关产品：HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞

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LS 1034细胞系相关产品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、LY细胞、OVCA 433细胞

BT-325细胞系相关产品：SNU601细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞、NCI-H87细胞

639V细胞系相关产品：Hs695T细胞、OPM2细胞、SUDHL-4细胞

Calu-3细胞系相关产品：H-378细胞、OP-9细胞、Hs 611.T细胞

USMC细胞系相关产品：UT7细胞、Hs 840.T细胞、HEK-293-F细胞

SW1088细胞系相关产品：P3X63NS1细胞、SUDHL-2细胞、SW-1573细胞

Colo-201细胞系相关产品：NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞

Hs 274.T细胞系相关产品：KU.812细胞、HECV细胞、NCIH23细胞

End1/E6E7细胞系相关产品：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞

LS123细胞系相关产品：HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞

SV40-HCEC细胞系相关产品：IOSE-Mar细胞、Capan 2细胞、Nthy ori 3.1细胞

SCC-4细胞系相关产品：NCIH1048细胞、TE7细胞、SUM-149PT细胞

NCI-H196细胞系相关产品：NIE-115细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、L615细胞

CCC-HIE-2细胞系相关产品：HEK293EBNA细胞、293 H细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞

MOVAS-1细胞系相关产品：Human Liver-7702细胞、NCI-H460细胞、WM266细胞

CL-11细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、MGH-U3 (RN)细胞、RC13细胞

WM 239-A细胞系相关产品：BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞

Tregs细胞系相关产品：Epstein-Barr-3细胞、SCC9细胞、SKNBE2细胞

NCIH23细胞系相关产品：mIMCD-3细胞、SUPM2细胞、U-118-MG细胞

SMMC-7721细胞系相关产品：CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞

N1E115细胞系相关产品：ST-2细胞、Calu-6细胞、Kit225 K6细胞

SPCA1细胞系相关产品：Hep-G2细胞、DHL-5细胞、CCD 966 SK细胞

Centre Antoine Lacassagne-78细胞系相关产品：H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞

HONE1细胞系相关产品：T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞

JKT-1细胞系相关产品：HEYA8细胞、NCI-SNU-449细胞、HCC0366细胞

NCI-H1417细胞系相关产品：KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞

MKN 7细胞系相关产品：MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞

H-2405细胞系相关产品：Lu-99A细胞、WiDr细胞、WM115F细胞

SN12CPM6细胞系相关产品：SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞

Li-7细胞系相关产品：NCTC clone 929细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞、VM-CUB-I细胞

TF-1a细胞系相关产品：Karpas299细胞、KYSE-140细胞、S37细胞

HOP62细胞系相关产品：UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞

SW-1990细胞系相关产品：H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞

H-7721细胞系相关产品：TSU-Pr1细胞、TGBC-11-TKB细胞、HEp-2细胞

HuH28细胞系相关产品：IHH4细胞、LS 513细胞、PTK-2细胞

IGR-OV1细胞系相关产品：H1734细胞、EMT6细胞、MFD-1细胞

ECV 304细胞系相关产品：SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞

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HuP-T3细胞系相关产品：SK-CO-1细胞、SMMC-7721细胞、HCT-116细胞

LM2-4175细胞系相关产品：Spodoptera frugiperda clone 9细胞、MHCC97细胞、T-98G细胞

C22 (Clara)细胞系相关产品：EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞

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RCK8细胞系相关产品：HCC-1954BL细胞、NCI H929细胞、C3H 10T1/2细胞

J774A1细胞系相关产品：H676细胞、OVCAR 432细胞、CaEs17细胞

PATU-S细胞系相关产品：SHZ-88细胞、NCI-460细胞、SW620细胞

PLA-802细胞系相关产品：BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞

Hs 600.T细胞系相关产品：B 95.8细胞、RINm-5F细胞、Ej138细胞

Chinese Hamster Ovary细胞系相关产品：Hs934T细胞、JROECL19细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞

SUM 159PT细胞系相关产品：GM02132细胞、OCILY10细胞、NCIH1563细胞

关键字： PA317 cell line逆转录病毒;

公司简介

上海宾穗生物科技有限公司是一家集研发、生产、销售与服务于一体的专业生物制品和化学品供应商。公司总部位于上海市莘庄工业区，拥有现代化办公大楼、标准实验室与生产厂房。上海宾穗生物科技有限公司拥有一支由教授和博士为核心的技术团队，提供超过100000的生物、化学产品，产品涵盖化学、医药、材料、能源、生物等科研领域。公司秉承“客户至上、服务一流”的发展理念，致力于将优质的产品和服务提供给客户。上海宾穗生物科技有限公司整合众多的优势市场资源，以匠心服务广大客户，我们可以为客户提供Binsui、TCI等国内外各种品牌的高品质试剂产品，充分满足客户的试剂需求。

成立日期	2018-01-10 （7年）	注册资本	635万元人民币
员工人数	50-100人	年营业额	￥ 500万-1000万
主营行业	通用试剂,高纯试剂,催化试剂,基础无机试剂	经营模式	试剂

上海宾穗生物科技有限公司

VIP 5年

公司成立：7年
注册资本：635万元人民币
企业类型：有限责任公司(自然人投资或控股)
主营产品：生物试剂、化学试剂、标准品、化工试剂
公司地址：李经理（手机号和微信号：18301908279 QQ：1292752157）上海市紫竹科学园区

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