B16-F0 小鼠黑色素瘤细胞系

"B16-F0 小鼠黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
B16-F0 小鼠黑色素瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
贴壁细胞传代实验准备事项：将15mL离心管、T25细胞培养瓶、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌；细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA从4℃冰箱中取出后，复温至室温，备用。贴壁细胞传代实验步骤：将准备好的培养基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；从培养箱中取出待处理的细胞，在显微镜下观察细胞状态；用酒精消毒培养瓶，放入安全柜中；轻轻吸去细胞上清；加入2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，轻轻晃匀、覆盖所有细胞后，置于37℃培养箱静置消化；消化1min左右，在显微镜下观察细胞消化情况；消化完全后，加3ml完全培养基终止；按比例将细胞悬液分装至培养瓶中；在显微镜下观察传代后的细胞密度及状态；将培养瓶放入培养箱中培养。注意事项：培养过程中需维持细胞处于对数生长期，80%左右即可传代，传代比例请参照说明书建议；消化时间不宜过长，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，难消化的细胞可分次消化，每次时间不超过5min；培养过程中需要定期换液，一般细胞建议2~3天换液一次。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
B16-F0 小鼠黑色素瘤细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
CMK细胞系相关产品：LS-411细胞、CV-1细胞、NCI-H128细胞 
Med 341细胞系相关产品：373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞 
GM00215A细胞系相关产品：HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞 
JurkatE6-1细胞系相关产品：Walker-256-TC细胞、NR8383.1细胞、28SC细胞 
HELF细胞系相关产品：BAR-T细胞、MBT-2细胞、CAL-120细胞 
SW-780细胞系相关产品：U-251 MG细胞、Kasumi 1细胞、ID8细胞 
MIA-Pa-Ca-2细胞系相关产品：451-LU细胞、JEG-3细胞、Panc 08.13细胞 
Capan 1细胞系相关产品：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞 
Walker256细胞系相关产品：NCI-H1993细胞、kms 11细胞、624mel细胞 
H-650细胞系相关产品：LCLC103H细胞、ARO 81-1细胞、AtT 20细胞 
Capan-2细胞系相关产品：H-1341细胞、NOR 10细胞、NG10815细胞 
MC-3T3细胞系相关产品：CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞 
MDA-MB-453细胞系相关产品：H-2444细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞、HS-729细胞 
RGM1细胞系相关产品：C1R细胞、HT-29细胞、SKMel-28细胞 
Mv.1.Lu细胞系相关产品：YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞 
HCC-827细胞系相关产品：MCF-7B细胞、NCI-H1341细胞、SW 527细胞 
HCC-827细胞系相关产品：MCF-7B细胞、NCI-H1341细胞、SW 527细胞 
KMM-1细胞系相关产品：MCF12F细胞、RPMI 2650细胞、CCRFCEM细胞 
EVSAT细胞系相关产品：MB49细胞、HCC0044细胞、PVEC细胞 
DHL-4细胞系相关产品：NTHY-ORI3.1细胞、Panc-813细胞、H2110细胞 
B16-F0 小鼠黑色素瘤细胞系
OsACL细胞系相关产品：Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、LU65细胞、SUM-159-PT细胞 
HFB细胞系相关产品：SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞 
HEK-293A细胞系相关产品：ECV-304细胞、U-373 MG细胞、KPL-4细胞 
MC 3T3-E1细胞系相关产品：SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞 
SKNDZ细胞系相关产品：751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞 
MDA MB 175 VII细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、H-1623细胞、TO 175.T细胞 
KYSE-450细胞系相关产品：MHHCALL2细胞、LA-N-1细胞、SW480细胞 
OB2细胞系相关产品：Lieming Xu-2细胞、OCI/AML4细胞、A2780细胞 
TI-73细胞系相关产品：Hep 3B2.1-7细胞、KS-SLK细胞、P3J.HR1K细胞 
MUTZ-3细胞系相关产品：H1915细胞、NCIH1734细胞、DV-90细胞 
SKUT-1细胞系相关产品：H-498细胞、Kit225细胞、Ra #1细胞 
NCI-H2172细胞系相关产品：Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞 
KU1919细胞系相关产品：MC9细胞、NMC-G1细胞、Panc 04.03细胞 
NK-10A细胞系相关产品：X63细胞、EFO 27细胞、LL/2(LLc1)细胞 
IOSE-Van细胞系相关产品：VM Cub 1细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞、HMO6细胞 
JCA-1细胞系相关产品：NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞 
H1672细胞系相关产品：MIHA细胞、H-1437细胞、HS-695T细胞 
KMS-26细胞系相关产品：ARH-77细胞、H-2110细胞、HME1细胞 
WEHI231细胞系相关产品：LICR-HN6细胞、McA-RH 7777细胞、VMRC-RCZ细胞 
MDA-468细胞系相关产品：HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞 
MN-60细胞系相关产品：Wien133细胞、H-838细胞、HCC1599细胞 
H35细胞系相关产品：OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞 
bEND.3细胞系相关产品：ATDC5细胞、KP-N-NS细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞 
H1618细胞系相关产品：TE-12细胞、TCMK-1细胞、H810细胞 
SK-MEL 28细胞系相关产品：NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞 
DMS-114细胞系相关产品：MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞 
A 375细胞系相关产品：Hs 746T细胞、MCF-7/ADR细胞、451Lu细胞 
LM TK negative细胞系相关产品：SW1088细胞、P3J细胞、HR1K细胞 
VP303细胞系相关产品：Huh-7细胞、COLO 205细胞、MOLP-8细胞 
MCF7-GFP细胞系相关产品：P3/NS-1细胞、SW 1353细胞、CCRF-CEM C1细胞 
52PE细胞系相关产品：Panc04.03细胞、BT-20细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞 
H.Ep. No. 2细胞系相关产品：RBL 2H3细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞、OVCAR8/ADR细胞 
293S细胞系相关产品：CL-34细胞、LC1sq细胞、RBL-2H3细胞 
SuDHL 5细胞系相关产品：Hs 578.Bst细胞、LS-411细胞、ChaGo K-1细胞 
786O细胞系相关产品：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞 
H522细胞系相关产品：HUASMC细胞、JHH-2细胞、Daudi细胞 
H-358细胞系相关产品：PC-3M细胞、H-2126细胞、MG-63细胞 
102PT细胞系相关产品：KMH2细胞、COLO 16细胞、C2C12细胞 
NCI-H1819细胞系相关产品：NCIH2110细胞、KYSE 510细胞、CNE1细胞 
U-hth74细胞系相关产品：MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞 
H-1522细胞系相关产品：KNS-42细胞、CAL-78细胞、Hs 766.T细胞 
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L5178-R细胞系相关产品：Karpas-299细胞、GM3190细胞、P3X63-Ag8.653细胞 
P388-D1细胞系相关产品：SCL-I细胞、SU8686细胞、CoCL3细胞 
Hs819T细胞系相关产品：HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞 
CCK-81细胞系相关产品：H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞 
KMS18细胞系相关产品：NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞 
MCM细胞系相关产品：P-36细胞、C3H 10T1/2细胞、MFE280细胞 
NCIH1734细胞系相关产品：SUDHL-1细胞、NCI-H1395细胞、SW-403细胞 
SW-1990细胞系相关产品：H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞 
UC-3细胞系相关产品：HCFB（HCF）细胞、NCIH650细胞、DH-82细胞 
Clone 15 HL-60细胞系相关产品：Hs-578Bst细胞、PCI:SG231细胞、MDA MB 436细胞 
IOSE 80细胞系相关产品：H2330细胞、HEK293-F细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞 
GM00215A细胞系相关产品：HOSEpiC细胞、HEK 293FT细胞、4T1细胞 
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