Lu-165 人肺腺癌细胞系

"Lu-165 人肺腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
Lu-165 人肺腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
Lu-165 人肺腺癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SF 763细胞系相关产品：GM2131细胞、RD细胞、HT-29细胞 
NCI-H1385细胞系相关产品：TCCSUP细胞、H1703细胞、LYR细胞 
T2 (174 x CEM.T2)细胞系相关产品：Bowes melanoma cells细胞、NCIH2347细胞、GP2d细胞 
MDA-MB 453细胞系相关产品：LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞 
A704细胞系相关产品：VP229细胞、HFLS细胞、Hs606细胞 
NCM460细胞系相关产品：Metastatic Variant 522细胞、Panc-02细胞、NCI-H774细胞 
HAPI细胞系相关产品：ARO细胞、H1944细胞、NCIH2227细胞 
C-Lu65细胞系相关产品：MOLP-2细胞、RCC10细胞、NCIH2009细胞 
H1672细胞系相关产品：MIHA细胞、H-1437细胞、HS-695T细胞 
HPAEC细胞系相关产品：Vero细胞、FBHE细胞、SK-SH-SY5Y细胞 
A-10细胞系相关产品：Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞 
L-6 myoblast细胞系相关产品：P30-OHKUBO细胞、SKCO-1细胞、TALL-104细胞 
DHL-8细胞系相关产品：NS-1细胞、CAL-51细胞、PTK 2细胞 
C12细胞系相关产品：DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞 
CHL/IU细胞系相关产品：NCI-747细胞、DoTc2细胞、MOLP8细胞 
MV 4;11细胞系相关产品：KYSE 140细胞、CV-1.K细胞、RAW2647细胞 
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STTG1细胞系相关产品：QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞 
Raji细胞系相关产品：VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞 
HNE1细胞系相关产品：RINm5F细胞、TE-14细胞、AX-Mel细胞 
Lu-165 人肺腺癌细胞系
HeLaS3细胞系相关产品：KP-N-RT-BM细胞、HCC0202细胞、AC29细胞 
2V6.11细胞系相关产品：IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞 
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NCI-H1666细胞系相关产品：Mouse Bladder Tumor line-2细胞、MDA-MB-435 S细胞、GM02131细胞 
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OCI-Ly01细胞系相关产品：Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞 
FL62891细胞系相关产品：PCI-SG231细胞、SNU-601细胞、SNU-668细胞 
NT2-D1细胞系相关产品：Lewis Lung细胞、SK-MES细胞、A253细胞 
BHP-10细胞系相关产品：SK-Mel 2细胞、FCCH1018细胞、OE33细胞 
SK-ES1细胞系相关产品：HS-5细胞、PSN1细胞、PFSK1细胞 
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DMS-79细胞系相关产品：U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞 
2B4细胞系相关产品：MOPC细胞、PK 15细胞、KY180细胞 
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CF-PAC1细胞系相关产品：NCIH2452细胞、P30/Ohkubo细胞、NCC-IT细胞 
NCI-H1373细胞系相关产品：HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞 
GM637A细胞系相关产品：HO-8910 PM细胞、686LN-M4e细胞、Hs 746.T细胞 
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SK.MEL.2细胞系相关产品：Strain KB细胞、NIH-3T3-L1细胞、95-D细胞 
SP-2细胞系相关产品：FBHE细胞、U-226AR1细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞 
High-5细胞系相关产品：NCIH446细胞、CL-40细胞、HCC-1359细胞 
HCS2/8细胞系相关产品：SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞 
Ls-174-T细胞系相关产品：H87细胞、HT 115细胞、BC-020细胞 
MN60细胞系相关产品：COLO-679细胞、SUM 52PE细胞、UMUC14细胞 
T2 (174 x CEM.T2)细胞系相关产品：Bowes melanoma cells细胞、NCC-IT细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞 
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