RIN-m 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞系

"RIN-m 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
RIN-m 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
细胞组成了组织，组织组成了器官，器官的组织就形成了一个个体，所有的组织和器官都是由细胞分化增殖形成的，通过汲取营养物质，最后形成个体。把人体的单个小细胞比喻成一个地球，人体组织呢就是一个太阳系，器官就是银河系，这样生动形象的比喻，可以让我们很容易了解到细胞与组织、组织与器官之间的关系。人的身体就像一个庞大的机器工厂，每时每秒都在进行着能量的传输与转化，它也像个巨大的产业链，一旦某个环节出了问题，同样伴随着的是人的身体也会出现不同程度的功能障碍，这也就是为什么人到某一定阶段以后身体的某些功能会逐渐衰退的原因。人的基本生命活动是通过细胞实现的，细胞的活动或功能异常，人体就容易生病。人之所以会得病就是人体内的细胞除了问题，一旦细胞有问题——组织就有问题——器官就有问题——系统就有问题——人就会得病。人体细胞每天都在分裂增殖，但是增长到一定阶段后就开始停止、病变或凋亡，如果不及时修复或增加，人体就会出现不同程度的疾病症状，小到病毒感冒，大到疑难杂症无一不都是因为人体内的细胞出了问题。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
RIN-m 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
AQ-Mel细胞系相关产品：SUM149PT细胞、NCI522细胞、Jurkat E6.1细胞 
MPP89细胞系相关产品：HNEpC细胞、MBdSMC细胞、KS-SLK细胞 
H1876细胞系相关产品：22Rv-1细胞、Mo7e细胞、GC9811-P细胞 
H345细胞系相关产品：NPC-TW039细胞、UMR106细胞、P3-X63-Ag8细胞 
HPDLF细胞系相关产品：HCC2935细胞、MLO-Y4细胞、J774 A.1细胞 
3T3细胞系相关产品：Me-Wo细胞、WERIRb1细胞、Line 207细胞 
HCe-8693细胞系相关产品：MOLM-16细胞、UACC893细胞、OCIAML5细胞 
C3A细胞系相关产品：TCC-SUP细胞、GAK细胞、CII细胞 
H-2009细胞系相关产品：NTera 2细胞、SJSA-1细胞、Caco2-BBE细胞 
KG1细胞系相关产品：BE2M17细胞、U-87MG ATCC细胞、Hs 766T细胞 
N1S1细胞系相关产品：NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞 
MSTO-211细胞系相关产品：HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞 
UPCI-SCC-154细胞系相关产品：C-28/I2细胞、NCIH209细胞、WM-115细胞 
HCC0366细胞系相关产品：MCF/Adr细胞、RN-c细胞、NTC200细胞 
U-251 MG细胞系相关产品：AML-EOL-1细胞、AMO1细胞、PC615.3细胞 
CAL27细胞系相关产品：MDA MB 231细胞、R.K.13细胞、TO175T细胞 
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P19细胞系相关产品：KYSE140细胞、LN-18细胞、L 363细胞 
NCTC clone 929细胞系相关产品：MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞 
RIN-m 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞系
TSUpr1细胞系相关产品：SNU761细胞、UCLA NPA871细胞、KG1细胞 
NCI-HUT-596细胞系相关产品：675T细胞、A 253细胞、CWR22Rv1细胞 
2BS细胞系相关产品：alphaTC1 Clone 6细胞、NCI-H2030细胞、H69细胞 
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LC-MS细胞系相关产品：NCIH1963细胞、SNU601细胞、NCI-H2170细胞 
MLE-12细胞系相关产品：MDA361细胞、Sp 2817细胞、TMK1细胞 
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P30-OHK细胞系相关产品：MDA468细胞、KU812-F细胞、H441细胞 
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B16-F10-BL6细胞系相关产品：OVCAR.4细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NP69细胞 
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H-1869细胞系相关产品：Tb 1-Lu细胞、YAC细胞、A375细胞 
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