HNE-3 人鼻咽癌细胞系

"HNE-3 人鼻咽癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手：１)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；２)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：７５%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒３０min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制３００ml的饱和酸铜加３L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
HNE-3 人鼻咽癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
HNE-3 人鼻咽癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
H-322细胞系相关产品：LOU-NH91细胞、NCI-H125细胞、KLM1细胞 
MDCK-2细胞系相关产品：Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞 
Capan 1细胞系相关产品：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞 
C643细胞系相关产品：VCaP细胞、CL1细胞、Hepa1-6细胞 
HSAS1细胞系相关产品：hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞 
FU-OV-1细胞系相关产品：NCIH526细胞、MDA-MB-231-GFP细胞、U-CH1细胞 
Panc 1细胞系相关产品：PA317细胞、TE5细胞、OCI-Ly01细胞 
SK UT 1细胞系相关产品：SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞 
Baby Hamster Kidney 21细胞系相关产品：H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞 
NCIH1048细胞系相关产品：SW-1573细胞、OCIAML5细胞、MDCC-MSB1细胞 
mRMEC细胞系相关产品：A375mel细胞、SCL-II细胞、SK-GT-2细胞 
Pt K1 (NBL-3)细胞系相关产品：Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞 
X63-Ag8-653细胞系相关产品：CemT4细胞、C-4-I细胞、NCIH1155细胞 
C-4-I细胞系相关产品：Capan2细胞、beta-TC6细胞、Jijoye细胞 
GM2132细胞系相关产品：CCD 841 CoTr细胞、H2347细胞、WEHI-3细胞 
RKOE6细胞系相关产品：SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞 
RKOE6细胞系相关产品：SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞 
OVCAR 433细胞系相关产品：COLO394细胞、SMMC7721细胞、RPMI 8226细胞 
MDST8细胞系相关产品：NCIH2286细胞、A-704细胞、MBdSMC细胞 
UCH-1细胞系相关产品：RCC10RGB细胞、LA-N-5细胞、H1944细胞 
HNE-3 人鼻咽癌细胞系
TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞系相关产品：NCI-1155细胞、H-2052细胞、Panc05.04细胞 
BSC40细胞系相关产品：J 82细胞、HCC-1599细胞、751-NA细胞 
LY细胞系相关产品：H7721细胞、H35 Reuber细胞、Karpas-422细胞 
K299细胞系相关产品：CL34细胞、H-2347细胞、NK-92细胞 
HCC-1187细胞系相关产品：High 5细胞、Wistar Institute-38细胞、OCI-Ly8细胞 
LA-N-6(OAN)细胞系相关产品：Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞 
Y3-Ag1,2,3细胞系相关产品：HO-8910细胞、CD18/HPAF细胞、LLC-MK2细胞 
SUM 52PE细胞系相关产品：OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞 
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞系相关产品：SUDHL4细胞、HT细胞、HCEC-B4G12细胞 
SU4细胞系相关产品：NW38细胞、MCA-38细胞、CAL-39细胞 
P3JHR-1细胞系相关产品：SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞 
Hs 578T细胞系相关产品：SK-N-AS细胞、F98细胞、WM 239-A细胞 
JHH2细胞系相关产品：DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞 
COR-L88细胞系相关产品：FLC-7细胞、JCA1细胞、H-1385细胞 
Panc-08.13细胞系相关产品：C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞 
NCIH1417细胞系相关产品：SUP-T1细胞、E.L.4细胞、Panc 2.03细胞 
K7M2细胞系相关产品：GM03569D细胞、Pro-Lec1.3C细胞、NCI-H1092细胞 
MDA-MB-435细胞系相关产品：NCI-H28细胞、3T3 L1细胞、HEK 293FT细胞 
GA-10(Clone 4)细胞系相关产品：hTERTHME1细胞、UCH1细胞、MKN-45细胞 
HCC15细胞系相关产品：FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞 
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞系相关产品：HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞 
TN5B14细胞系相关产品：MV4;11细胞、SKES-1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞 
SKES1细胞系相关产品：Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞 
BXPC3细胞系相关产品：ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞 
NPC-TW 039细胞系相关产品：Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、LLC PK1细胞、CAL51细胞 
NCI-H660细胞系相关产品：SK-MEL5细胞、GM03573细胞、LS 1034细胞 
NCI-BL2141细胞系相关产品：UO31细胞、H3255_DA细胞、HO8910/PM细胞 
UM-RC-2细胞系相关产品：PNEC30细胞、B95.8细胞、Hs832T细胞 
NCI-H78细胞系相关产品：SK LU 1细胞、PK-136细胞、HEL-1细胞 
M14-MEL细胞系相关产品：MDA-MB 361细胞、SW982细胞、CCD-966SK细胞 
SU-DHL-10细胞系相关产品：BC-020细胞、Rat-2细胞、NCIH2170细胞 
JC细胞系相关产品：NCI H157细胞、THEECs细胞、MDCKII-WT细胞 
BL1339细胞系相关产品：L363细胞、OVISE细胞、H-358细胞 
95D细胞系相关产品：OCUM-1细胞、C4-2细胞、NTHY-ORI3.1细胞 
SUIT 2细胞系相关产品：K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞 
PLC-8024细胞系相关产品：aTC1-6细胞、BT-B细胞、AMC-HN8细胞 
PLC-8024细胞系相关产品：aTC1-6细胞、BT-B细胞、AMC-HN8细胞 
TF-1细胞系相关产品：Chang liver细胞、Alexander cells细胞、hTERT RPE1细胞 
IEC18细胞系相关产品：MB231细胞、SU-DHL1细胞、QBC-939细胞 
ACC-3细胞系相关产品：4T1-LUC细胞、HRA 19细胞、SUM-149细胞 
SW 1990细胞系相关产品：MLE12细胞、NB19细胞、R2C细胞 
HNE-3 人鼻咽癌细胞系
BJ [Human fibroblast]细胞系相关产品：H-2591细胞、PGBE1细胞、JCA-1细胞 
SW756细胞系相关产品：UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞 
NCIADR.RES细胞系相关产品：SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞 
NCIH1792细胞系相关产品：HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞 
CEM/0细胞系相关产品：NCI-H1734细胞、GM01232E细胞、NTera-2D1细胞 
KYSE70细胞系相关产品：TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞 
H2170细胞系相关产品：MBdSMC细胞、IM95细胞、MADB 106细胞 
SW 837细胞系相关产品：NCIH2122细胞、NCM-460细胞、Kasumi-1细胞 
M-14细胞系相关产品：SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞 
OVCA-433细胞系相关产品：HOS细胞、Colon-38细胞、RBE4细胞 
C4-2细胞系相关产品：BC-024细胞、MIN-6细胞、Swiss-3T3细胞 
Capan 1细胞系相关产品：CAOV3细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、OCI-AML2细胞 
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