HDQ-P1 人乳腺癌细胞系

"HDQ-P1 人乳腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
HDQ-P1 人乳腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
HDQ-P1 人乳腺癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
Human ErythroLeukemia细胞系相关产品：EBC-1细胞、LAN6细胞、GM3570细胞 
SK_N_BE2C细胞系相关产品：MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞 
LC-2 ad细胞系相关产品：C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞 
NCI-SNU-423细胞系相关产品：CNE2细胞、JKT-1细胞、PMVEC细胞 
N1S1细胞系相关产品：NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞 
Mel-624细胞系相关产品：CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞 
Panc 5.04细胞系相关产品：WBF344细胞、CA-OV-3细胞、MESSA Dx5细胞 
H4-II-EC3细胞系相关产品：SUM-190细胞、SKRC-20细胞、T241细胞 
Ra #1细胞系相关产品：PC-10细胞、MDAMB157细胞、H-1781细胞 
GM637A细胞系相关产品：HO-8910 PM细胞、686LN-M4e细胞、Hs 746.T细胞 
CAL 12细胞系相关产品：PTK2细胞、HO8910/PM细胞、IPLB-SF 21细胞 
Chinese Hamster Lung细胞系相关产品：H-1568细胞、PNT1-a细胞、COLO-320-DM细胞 
Hmy.2 CIR细胞系相关产品：Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞 
RS 4;11细胞系相关产品：MPC5细胞、H-1404细胞、D-341 Med细胞 
L132细胞系相关产品：SW 579细胞、UCLA SO M14细胞、SK-LMS-1细胞 
HIC细胞系相关产品：hA549细胞、GP2d细胞、SF 763细胞 
HIC细胞系相关产品：hA549细胞、GP2d细胞、SF 763细胞 
KMS18细胞系相关产品：NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞 
PLA801-95D细胞系相关产品：SJSA细胞、Panc05.04细胞、MPC 11细胞 
MARC-145细胞系相关产品：MC-26细胞、HUVEC细胞、HOMEC细胞 
HDQ-P1 人乳腺癌细胞系
MDA-468细胞系相关产品：HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞 
JKT1细胞系相关产品：Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞 
HS-294T细胞系相关产品：HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞 
Sp2/0-Ag14细胞系相关产品：SUDHL5细胞、OCI-Ly 8细胞、CEMO-1细胞 
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞系相关产品：GM04671细胞、RKOE6细胞、CW2细胞 
293F细胞系相关产品：NCIH1876细胞、T_T_细胞、MV4;11细胞 
PL11细胞系相关产品：BHK细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞、PF-382细胞 
NCIH747细胞系相关产品：SK Mel 1细胞、RFL-6细胞、U266BL细胞 
SW962细胞系相关产品：A375.S2细胞、HTR-8/SVneo细胞、3T6-Swiss albino细胞 
L-428细胞系相关产品：NBLS细胞、SKGIIIA细胞、SNU-638细胞 
HPF细胞系相关产品：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞 
T 84细胞系相关产品：SACC83细胞、Strain L-929细胞、BCP1细胞 
HLEB3细胞系相关产品：McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞 
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞 
NS-20Y细胞系相关产品：CCRF CEM细胞、VK2细胞、U2932细胞 
LY-R细胞系相关产品：EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞 
IBRS2细胞系相关产品：DoTc2-4510细胞、NCI-H1092细胞、SW780细胞 
HDMEC细胞系相关产品：Hs895.T细胞、GLC-82细胞、Karpas 422细胞 
HEK-293FT细胞系相关产品：B16F10细胞、Jiyoye(P-2003)细胞、High 5细胞 
MDAMB330细胞系相关产品：Sarcoma OSteogenic-2细胞、OsA-CL细胞、MADISON LUNG TA-109细胞 
H647ell细胞系相关产品：SMMC-7721细胞、C3H10T1/2细胞、OCIAML4细胞 
SUM52细胞系相关产品：PC-12细胞、NCIH2081细胞、NCI-H524细胞 
PK15细胞系相关产品：WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞 
WEHI-3细胞系相关产品：BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞 
CHL细胞系相关产品：Panc-03.27细胞、MALME.3M细胞、SUDHL-8细胞 
SJSA细胞系相关产品：CAL 12T细胞、MHCC-LM3细胞、Th17细胞 
HS-445细胞系相关产品：PC.3细胞、HLE-SRA-01/04细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞 
SUD-4细胞系相关产品：CHOK1细胞、H4-II-E-C3细胞、CHL-IU细胞 
UCLA RO-81A-1细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、Hep3B细胞、M14-MEL细胞 
Psi-2-DAP细胞系相关产品：EAC-E2G8细胞、IEC-6细胞、OKa-C-1细胞 
HIT细胞系相关产品：SUM-52细胞、PLA801C细胞、MEL-526细胞 
H2107细胞系相关产品：38C-13细胞、HIT T-15细胞、KB细胞 
MOLM-13细胞系相关产品：NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞 
CAKI.1细胞系相关产品：SK-ChA1细胞、NKM1细胞、HGMC细胞 
GS9L细胞系相关产品：Mouse INsulinoma 6细胞、RAMOS2G64C10细胞、RGE细胞 
293 c18细胞系相关产品：NCI-SNU-668细胞、HPAF-I细胞、A431/P细胞 
Nb2a细胞系相关产品：CEM clone 7细胞、PIGI细胞、Kato-III细胞 
MIMVEC细胞系相关产品：A2780细胞、CCLP1细胞、SW-780细胞 
COS-1细胞系相关产品：OACP4C细胞、H-2172细胞、CL-34细胞 
Scott细胞系相关产品：GOS3细胞、SCC 4细胞、SW1116细胞 
SUDHL-16细胞系相关产品：F-81细胞、Porcine Kidney-13细胞、NCIH1781细胞 
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H-1915细胞系相关产品：S180细胞、NPC-TW039细胞、Pt-K2细胞 
HNE3细胞系相关产品：GM04678细胞、KYSE-410细胞、LM-TK-细胞 
TE13细胞系相关产品：H1944细胞、GM05372细胞、CT26.CL25细胞 
MPC5细胞系相关产品：COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞 
U251n细胞系相关产品：IM-9细胞、NCIH748细胞、H-1672细胞 
SCC-4细胞系相关产品：NCIH1048细胞、TE7细胞、SUM-149PT细胞 
CO115细胞系相关产品：SK.MEL.5细胞、PECAPJ34细胞、MADB-106细胞 
MEL-526细胞系相关产品：Tj-905细胞、HEK 293-H细胞、WILL2细胞 
NT2细胞系相关产品：T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞 
FM88细胞系相关产品：BaF3细胞、MG-63细胞、HEK293FT细胞 
Renal Carcinoma细胞系相关产品：LNCaP subline C4-2细胞、Ramos-RA1细胞、SNU-484细胞 
LC-2 ad细胞系相关产品：C17.2细胞、HIT-T15细胞、BOWES细胞 
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