MRC-9 人胚肺细胞系

"MRC-9 人胚肺细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MRC-9 人胚肺细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
MRC-9 人胚肺细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
EoL-1-cell细胞系相关产品：BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞 
PANC0403细胞系相关产品：L-540细胞、RGE细胞、A704细胞 
RSMC细胞系相关产品：SU-DH-L5细胞、TKB1细胞、UWB1.289细胞 
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞 
DU 4475细胞系相关产品：WRL68细胞、32D.cl3细胞、K562/ADR细胞 
NCI-H1954细胞系相关产品：TE13细胞、HUT-226细胞、PCI:SG-231细胞 
CCC-HHM-2细胞系相关产品：CL40细胞、NCIH2171细胞、CCD19-Lu细胞 
HS-695T细胞系相关产品：HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞 
BE2M17细胞系相关产品：LLC-PK-1细胞、KU 19-19细胞、Ketr-3细胞 
ZR75_1细胞系相关产品：AML193细胞、CCC-ESF-1细胞、RPMI 2650细胞 
COR-L279细胞系相关产品：NS1细胞、Caov-4细胞、HCC0015细胞 
CEM/0细胞系相关产品：NCI-H1734细胞、GM01232E细胞、NTera-2D1细胞 
H-7721细胞系相关产品：TSU-Pr1细胞、TGBC-11-TKB细胞、HEp-2细胞 
Murine Lung Epithelial-12细胞系相关产品：OCI-LY-10细胞、JEG3细胞、HBVP细胞 
SUM 190细胞系相关产品：SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞 
MDA MB 361细胞系相关产品：H3255_DA细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HFF-1细胞 
U-937细胞系相关产品：MPC 11细胞、JM细胞、Epstein-Barr-2细胞 
UCLA-SO-14细胞系相关产品：NCI-H650细胞、HDSMC细胞、H-711细胞 
SUM102PT细胞系相关产品：H-920细胞、TE 354.T细胞、Chang liver细胞 
WIL2-S细胞系相关产品：COLO 824细胞、TH1细胞、HRPEpiC细胞 
MRC-9 人胚肺细胞系
C32 mel细胞系相关产品：MESSA-DX5细胞、C1R细胞、NGEC细胞 
CEMC1细胞系相关产品：DK-MG细胞、H9c2 (2-1)细胞、MDCK.2细胞 
NCIH128细胞系相关产品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞 
NCI-1155细胞系相关产品：GM05372细胞、MCF7-GFP细胞、102PT细胞 
HOC细胞系相关产品：H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞 
YT细胞系相关产品：LLC细胞、HCEpiC细胞、SKNMC细胞 
NCI-H1882细胞系相关产品：HOPC细胞、SEM细胞、SKCO-1细胞 
NCI-H2591细胞系相关产品：AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞 
Ramos (RA 1)细胞系相关产品：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞 
RCC10 RGB细胞系相关产品：HCC1187细胞、HEC-1B细胞、Rat Skin 1细胞 
SF-763细胞系相关产品：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞 
EBC-1/original细胞系相关产品：Caki-2细胞、ACC-3细胞、AN-3细胞 
PG-4(S+L-)细胞系相关产品：F36P细胞、NCI-H157细胞、VCaP细胞 
SKO-007细胞系相关产品：HCC1833细胞、NBL-5细胞、HKBML细胞 
NFHIOSE-29细胞系相关产品：NCM356细胞、NCI-H2029细胞、NCIH1341细胞 
CTV1细胞系相关产品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、NEC细胞、PANC.1细胞 
HuP-T3细胞系相关产品：SK-CO-1细胞、SMMC-7721细胞、HCT-116细胞 
U-251-MG细胞系相关产品：SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞 
TPC1细胞系相关产品：TE-4细胞、Mono Mac 1细胞、U-373MG细胞 
Huh-7.5细胞系相关产品：HEK 293-H细胞、NCI-H510细胞、MA104细胞 
Hs-274-T细胞系相关产品：GI-1细胞、HeLa S-3细胞、Pfeiffer细胞 
KASUMI1细胞系相关产品：9L细胞、Tca-8113细胞、NCI-H295R细胞 
LA4细胞系相关产品：293/EBNA-1细胞、NS1细胞、T HEECs细胞 
16HBEo-细胞系相关产品：NCIH3255细胞、MH7A细胞、aNK细胞 
Hs.27细胞系相关产品：H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞 
NB9细胞系相关产品：WM451细胞、A-9细胞、MPC11细胞 
DU-4475细胞系相关产品：HCC1359细胞、CCD 841 CoTr细胞、HSKMC细胞 
HeLa/S3细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞 
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C643细胞系相关产品：VCaP细胞、CL1细胞、Hepa1-6细胞 
Hs 746.T细胞系相关产品：SK_N_BE2C细胞、U87 MG细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞 
RAT2细胞系相关产品：Rat 2细胞、Walker256细胞、P31 FUJ细胞 
Beta-TC-6细胞系相关产品：HEK 293-F细胞、2T细胞、OCI-Ly10细胞 
RMG1细胞系相关产品：MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞 
NCI-H1650细胞系相关产品：P30/0HK细胞、Normal fibroblast-10细胞、SKRC-42细胞 
MLE12细胞系相关产品：KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞 
CF Pac1细胞系相关产品：bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞 
BEL/FU细胞系相关产品：KOSC-2 cl3-43细胞、HBL1细胞、RT-BM细胞 
Human Embryonic Skin细胞系相关产品：BeWo细胞、UMUC3细胞、SUDHL1细胞 
L cell line细胞系相关产品：IBMF-7细胞、Hs839T细胞、SUM102PT细胞 
KE 37细胞系相关产品：SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞 
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VMM39细胞系相关产品：A498细胞、SK-ML2细胞、KCL22细胞 
HEY A8细胞系相关产品：ME-180细胞、H-2198细胞、CMK细胞 
HGC-27细胞系相关产品：FLS细胞、H510细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞 
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GP5d细胞系相关产品：SKES-1细胞、GLRK 13细胞、VeroC1008细胞 
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