NCI-H740 人肺癌细胞系

"NCI-H740 人肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
NCI-H740 人肺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
NCI-H740 人肺癌细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
Karpas422细胞系相关产品：CAL 12细胞、Hepa 1-6细胞、W133细胞 
LS1034细胞系相关产品：NRK-52E细胞、NCL-H548细胞、SK-N-F1细胞 
BL2141细胞系相关产品：CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞 
MDA-MB-231-GFP细胞系相关产品：EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞 
SK-N-F1细胞系相关产品：Hs 274.T细胞、IM-95细胞、SW 1271细胞 
KPL4细胞系相关产品：GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞 
3T3 Swiss Albino细胞系相关产品：OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞 
PANC1005细胞系相关产品：H-2198细胞、N-87细胞、MOLM-16细胞 
COLO206F细胞系相关产品：TC7细胞、INS1细胞、MonoMac6细胞 
HDSMC细胞系相关产品：LTEPsm细胞、MHH-CALL-2细胞、Kit 225-K6细胞 
SACCLM细胞系相关产品：HEK 293细胞、HCT/Taxo1细胞、Det. 562细胞 
NUGC2细胞系相关产品：SuDHL 1细胞、GM05887A细胞、P3/X63/Ag8.653细胞 
P31 FUJ细胞系相关产品：MDA-MB453细胞、PAMC82细胞、NT2/D1细胞 
KMH-2细胞系相关产品：OCI-Ly1细胞、SJRH-30细胞、aTC1 Clone 6细胞 
RL952细胞系相关产品：MV-4:11细胞、IA-LM细胞、Sf-21细胞 
RL细胞系相关产品：SCC90细胞、NCIH596细胞、C22细胞 
RL细胞系相关产品：SCC90细胞、NCIH596细胞、C22细胞 
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞系相关产品：QBC(939)细胞、JB 6细胞、HIT T15细胞 
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞系相关产品：OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞 
KY180细胞系相关产品：SW1353细胞、SW 1088细胞、RKO-E6细胞 
NCI-H740 人肺癌细胞系
CEMO-1细胞系相关产品：HCC-1395细胞、MADB 106细胞、NUGC-3细胞 
SP2细胞系相关产品：CCD1095Sk细胞、SW 13细胞、HPB-ALL细胞 
MCF/Adr细胞系相关产品：BE(2)M-17细胞、BEL-7404细胞、CCC-ESF-1细胞 
HemECs细胞系相关产品：Beta-TC-6细胞、H-1184细胞、COS-7细胞 
MDAMB134细胞系相关产品：HIT.T15细胞、Panc-10.05细胞、Nittby-Salford 1细胞 
COLO-320-DM细胞系相关产品：GEO细胞、KYSE-520细胞、SW1353细胞 
Normal Rat Kidney-49F细胞系相关产品：A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞 
HUT 125细胞系相关产品：LTEP a2细胞、TPC1细胞、SW260细胞 
OCI-AML-2细胞系相关产品：PSN1细胞、DMS79细胞、KLE细胞 
PC-3M 2B4细胞系相关产品：KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞 
Hep G2细胞系相关产品：SKLU1细胞、NCI-H187细胞、C8166-CD4细胞 
HFL-I细胞系相关产品：Tregs细胞、HT1376细胞、H-295细胞 
N1S1细胞系相关产品：NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞 
Hs 578Bst细胞系相关产品：HCC1171细胞、Tu686细胞、J82细胞 
HEp-2细胞系相关产品：Jurkat-E6细胞、HCC38细胞、beta TC6细胞 
U118MG细胞系相关产品：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞 
KMB 17细胞系相关产品：MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞 
CAL 148细胞系相关产品：TPC-1细胞、SNK-1细胞、HRA-19细胞 
8226细胞系相关产品：HCT-15细胞、H-1930细胞、NCI H295R细胞 
DMS 273细胞系相关产品：AN-3细胞、OCI-Ly7细胞、Hs940-T细胞 
HC-11细胞系相关产品：Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞 
HA细胞系相关产品：HOS/MNNG细胞、UCW 100细胞、SCC VII细胞 
NCTC1469细胞系相关产品：SkChA1细胞、RL952细胞、Madison 109细胞 
OSKM-1细胞系相关产品：CMEC/D3细胞、Hs 839.T细胞、CCD-841-CoTr细胞 
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品：SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞 
PANC0403细胞系相关产品：L-540细胞、RGE细胞、A704细胞 
JROECL 21细胞系相关产品：KATOIII细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、MeT5A细胞 
SV-HUC细胞系相关产品：AD-293细胞、231-luc细胞、NCM356细胞 
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SF 767细胞系相关产品：TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞 
HCC1438细胞系相关产品：SK-N-BE-2细胞、OVCA-433细胞、A-673细胞 
FaDu细胞系相关产品：Farage细胞、D-407细胞、SK-MES-1细胞 
RS4-11细胞系相关产品：H1688细胞、H-292细胞、C-643细胞 
TE 354.T细胞系相关产品：NFHIOSE-80细胞、EB-1细胞、RPMI 7951细胞 
HG2855细胞系相关产品：P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞 
IOSE-29细胞系相关产品：LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞 
IOSE-29细胞系相关产品：LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞 
CL1-0细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、NCIADR.RES细胞、PK(15)细胞 
M1细胞系相关产品：VM-CUB-1细胞、COLO-320细胞、MDA-MB-435S细胞 
NCIH2107细胞系相关产品：H295R细胞、CD-18细胞、Hs 822.T细胞 
B-16细胞系相关产品：SU-86-86细胞、U-2 OS细胞、H1975细胞 
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SNU398细胞系相关产品：G 401细胞、SKUT-1细胞、SK-N-BE(2)-C细胞 
EOL1细胞系相关产品：H-2126细胞、NCI-SNU-475细胞、CMT.64细胞 
VMM39细胞系相关产品：A498细胞、SK-ML2细胞、KCL22细胞 
SUDHL-1细胞系相关产品：NCI-SNU-119细胞、JIMT-1细胞、COS1细胞 
PC10细胞系相关产品：MIMVEC细胞、BNCL2细胞、NCI-H2106细胞 
NCI-SNU-449细胞系相关产品：MDA-MB-330细胞、D-341Med细胞、EOC20细胞 
NCI-H522细胞系相关产品：SJCRH30细胞、RIN-m 14B细胞、H2170细胞 
NBL-3细胞系相关产品：RL952细胞、H-2085细胞、WSUDLCL2细胞 
CV-1 in Origin Simian-7细胞系相关产品：MCF-7/ADR细胞、U937细胞、Vero C1008细胞 
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞系相关产品：SNU-869细胞、PC 12细胞、HTori-3细胞 
NCIH2066细胞系相关产品：CAL-62细胞、HFSF细胞、ANA1细胞 
BL2141细胞系相关产品：CAL148细胞、ssMCF-7细胞、NCI/ADR-RES细胞 
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