Hs 578T 人乳腺癌细胞系

"Hs 578T 人乳腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
Hs 578T 人乳腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
Hs 578T 人乳腺癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
PANC 1005细胞系相关产品：BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞 
MCF7/WT细胞系相关产品：MDAMB134VI细胞、MMAc-Serum Free细胞、C26细胞 
MB157细胞系相关产品：SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞 
RERFLCMS细胞系相关产品：DI TNC-1细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞 
LC-1Sq细胞系相关产品：NCIH2172细胞、Hs 281.T细胞、Ramos G6.C10细胞 
H-2135细胞系相关产品：ROS17/28细胞、SKRC20细胞、Epstein-Barr-1细胞 
GM03569细胞系相关产品：UCLA NPA-87-1细胞、NCIH3255细胞、BV2细胞 
SK-NSH细胞系相关产品：COV-362细胞、HCC 38细胞、C4-1细胞 
SRA01/04 (HLE)细胞系相关产品：AMO-1细胞、SBC3细胞、3-LL细胞 
RD-ES细胞系相关产品：BSC1细胞、H-810细胞、OCI-AML-4细胞 
SCL II细胞系相关产品：IBRS-2细胞、HO-8910细胞、J774.A1细胞 
FBHE细胞系相关产品：NCI-H1781细胞、A2780/CP细胞、MHCC97L细胞 
CoCL2细胞系相关产品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、143BTK-细胞、J774A.1细胞 
A10细胞系相关产品：SK-MEL2细胞、alphaTC clone 6细胞、OV90细胞 
CCD 841 CoTr细胞系相关产品：COLO-320HSR细胞、CHP212细胞、C3H-10T1/2细胞 
Hs742T细胞系相关产品：Colo741细胞、CEM-C7细胞、SUM190PT细胞 
Hs742T细胞系相关产品：Colo741细胞、CEM-C7细胞、SUM190PT细胞 
H-1915细胞系相关产品：S180细胞、NPC-TW039细胞、Pt-K2细胞 
BGC823细胞系相关产品：KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞 
MPC5细胞系相关产品：COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞 
Hs 578T 人乳腺癌细胞系
MHCC97-H细胞系相关产品：Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、RIN m5F细胞、MC3T3-E1(C4)细胞 
SPC-A1细胞系相关产品：H548细胞、NCIH1793细胞、HMEC-1细胞 
RMG-I细胞系相关产品：HMCB细胞、C3H-10T1/2细胞、293T/17细胞 
C2BBe1细胞系相关产品：PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞 
JF305细胞系相关产品：HT115细胞、HT22细胞、HTh74细胞 
Ly19细胞系相关产品：CRFK细胞、SuperTube细胞、NB9细胞 
ARH-77细胞系相关产品：RFL-6细胞、NCI-N87细胞、HEK/EBNA细胞 
KG1A细胞系相关产品：Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞 
aTC1-6细胞系相关产品：WM115mel细胞、P31FUJ细胞、RCC-4细胞 
H-1876细胞系相关产品：DHL-6细胞、SNU-182细胞、AML-193细胞 
HFL-I细胞系相关产品：Tregs细胞、HT1376细胞、H-295细胞 
5-8F细胞系相关产品：Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞 
PC-10细胞系相关产品：NCI-HUT-69细胞、NCIH2591细胞、P3X63NS1细胞 
HuH7细胞系相关产品：CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞 
H1666_DA细胞系相关产品：RK13细胞、NCI-SNU-387细胞、ARO细胞 
M-NFS-60细胞系相关产品：ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞 
H441细胞系相关产品：HHL5细胞、H748细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞 
190PT细胞系相关产品：Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞 
RT-BM 1细胞系相关产品：B95.8细胞、SK MEL-28细胞、CemT4细胞 
AG06814-N细胞系相关产品：H-838细胞、SKNO1细胞、TE8细胞 
SKNBE2C细胞系相关产品：C17细胞、ECV细胞、JiyoyeP-2003细胞 
VCaP细胞系相关产品：Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞 
H-1882细胞系相关产品：IPECJ2细胞、K7M2细胞、MIA PaCa-2细胞 
Panc-327细胞系相关产品：HCEC-12细胞、SN12C细胞、SNU-C2B细胞 
H184A1细胞系相关产品：28SC细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞、Hs888 Lu细胞 
801-D细胞系相关产品：IPEC1细胞、Panc02细胞、PANC0813细胞 
G-401细胞系相关产品：NCIH889细胞、OC316细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞 
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞系相关产品：18G3.cl 1细胞、NCIH226细胞、Pa16C细胞 
686LN-M4e细胞系相关产品：HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞 
OPM2细胞系相关产品：KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞 
CEM-C7细胞系相关产品：CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞 
FHs74Int细胞系相关产品：D341细胞、KP-N-RT-BM细胞、CAL85-1细胞 
SK MEL-28细胞系相关产品：Mv 1 Lu细胞、SK-ChA1细胞、RGCs细胞 
SKMES细胞系相关产品：THLE2细胞、HcerEpic细胞、hFOB1.19细胞 
Ramos 1细胞系相关产品：HBE 135-E6/E7细胞、SK-N-BE-2c细胞、Sc-1细胞 
NCI-H322细胞系相关产品：CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞 
H-441细胞系相关产品：769-P细胞、OVCAR 5细胞、SUM-190PT细胞 
DMS 53细胞系相关产品：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞 
NCI-H1963细胞系相关产品：IMR-90细胞、MSB1细胞、OsA-CL细胞 
HAEC细胞系相关产品：Baby Hamster Kidney 21细胞、A-72细胞、DU4475细胞 
KNS-62细胞系相关产品：UMNSAH-DF-1细胞、SK-N-BE(2)细胞、MNNG/HOS细胞 
Hs 578T 人乳腺癌细胞系
MHCC-LM3细胞系相关产品：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞 
ReNcell CX细胞系相关产品：HM06.A1细胞、U251MG细胞、P3-x63-Ag8 653细胞 
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞系相关产品：HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞 
NCI-H1703细胞系相关产品：LC1sq细胞、NH-6细胞、OVCAR3细胞 
H-2029细胞系相关产品：NCTC-929细胞、UM-UC3细胞、SK MES 1细胞 
NCI-H1155细胞系相关产品：H-146细胞、MDCK-II细胞、RSMC细胞 
MOLT4细胞系相关产品：HME-1细胞、VeroE6细胞、Medical University of Graz-Chordoma 1细胞 
P3/NS1/Ag4-1细胞系相关产品：2008细胞、AA-Mel细胞、SMMC-7721细胞 
NCI-H747细胞系相关产品：C 6细胞、BIC-1细胞、MDAMB134VI细胞 
NCI-H1568细胞系相关产品：MC26细胞、H2052细胞、Ramos细胞 
BEAS2B细胞系相关产品：JOSK-M细胞、HEK-293-H细胞、PK(15)细胞 
MB157细胞系相关产品：SNU-1细胞、MIHA细胞、NTERA-2细胞 
"