CCD-19Lu 人肺成纤维细胞系

"CCD-19Lu 人肺成纤维细胞系
细胞背景资料：肺成纤维细胞；女性 
细胞形态：成纤维细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
CCD-19Lu 人肺成纤维细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
CCD-19Lu 人肺成纤维细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
MV4:11细胞系相关产品：P30OHK细胞、K1细胞、BXPC3细胞 
Michigan Cancer Foundation-12A细胞系相关产品：NBL-12细胞、HSC/mHSC细胞、CAL27细胞 
3T3-F442A细胞系相关产品：rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞 
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞系相关产品：A 375细胞、RLE-6TN细胞、NCM-460细胞 
PANC0813细胞系相关产品：293c18细胞、P3/ag细胞、BRL-3A细胞 
SUIT-2细胞系相关产品：K1735细胞、GalK 1细胞、HLCL9B10细胞 
GT38细胞系相关产品：TOG细胞、CoCL3细胞、Mv 1 Lu细胞 
ZYM-DIEC02细胞系相关产品：HPaSteC(HPSC)细胞、RPPVEC细胞、NL20SV细胞 
NCI/ADRRES细胞系相关产品：118 MG细胞、WiDr/S细胞、ACCM细胞 
CA 46细胞系相关产品：D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞 
Hs606T细胞系相关产品：FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞 
LU451细胞系相关产品：J82 COT细胞、NCI-H1238细胞、MRC 5细胞 
SBC3细胞系相关产品：L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞 
DI TNC1细胞系相关产品：H-2172细胞、HREC细胞、ATDC5细胞 
HHL5细胞系相关产品：NCI-H322细胞、HTori3细胞、DOK细胞 
CNE1-LUC细胞系相关产品：TE3A细胞、C643细胞、H-889细胞 
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Medical Research Council cell strain-5细胞系相关产品：SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞 
b.End3细胞系相关产品：Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞 
686LN-M4e细胞系相关产品：HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞 
CCD-19Lu 人肺成纤维细胞系
KYSE410细胞系相关产品：PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞 
BMSC/hBMSCs细胞系相关产品：NCI-SNU-398细胞、H-820细胞、251MG细胞 
Psi-2 DAP细胞系相关产品：HFT 8810细胞、SJRH 30细胞、HCC1954 BL细胞 
A-549细胞系相关产品：MDAMB468细胞、HCC1937细胞、P30-OHK细胞 
Clone Y1细胞系相关产品：COR-L23/P细胞、RPE1-hTERT细胞、H1876细胞 
WiDrTC细胞系相关产品：SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞 
H-2052细胞系相关产品：SUM149-PT细胞、SCL II细胞、Hs 863.T细胞 
293GP细胞系相关产品：BT.549细胞、H-23细胞、R3/1细胞 
HLE-B3细胞系相关产品：2PK-3细胞、HTSMC细胞、RPE-hTERT细胞 
LC-2/ad细胞系相关产品：TE-85 clone 5细胞、SDBMSC细胞、AG 9细胞 
MOVAS细胞系相关产品：SUM159PT细胞、KHYG细胞、M-O7e细胞 
BRL3A细胞系相关产品：WEHI-164细胞、NTera-2D1细胞、COLO-205细胞 
OKT 3细胞系相关产品：SNU-638细胞、ROS17/2.8细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞 
KYSE-410细胞系相关产品：TE1细胞、SKMEL-1细胞、BTT739细胞 
HOP-92细胞系相关产品：L-WRN细胞、SCC25细胞、LA-N-6细胞 
DoTc2 4510细胞系相关产品：COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞 
HCC202细胞系相关产品：NKM1细胞、WEHI 164 TC细胞、SUDHL16细胞 
KNS-42细胞系相关产品：P-388D1细胞、mRMEC细胞、T47-D细胞 
MC9细胞系相关产品：CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞 
HUASMC细胞系相关产品：HC11细胞、SKLU01细胞、hTERT-HME1细胞 
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HL1细胞系相关产品：EM-3细胞、KU-812F细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞 
Molm 14细胞系相关产品：M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞 
LNCaP-C4-2细胞系相关产品：C6细胞、QGY细胞、HT29细胞 
SUM 159细胞系相关产品：C8-D1A细胞、IALM细胞、NCI-H2066细胞 
MKN74细胞系相关产品：AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞 
MV-3细胞系相关产品：H1672细胞、Caco-2/BBe细胞、TGBC-11-TKB细胞 
HC-11细胞系相关产品：Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞 
My-La 2059细胞系相关产品：U-266 AR1细胞、H345细胞、MIMVEC细胞 
Ly7细胞系相关产品：CBRH-7919细胞、H-748细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞 
BC-022细胞系相关产品：EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞 
87 MG细胞系相关产品：Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞 
U-118-MG细胞系相关产品：KP4细胞、Hs611T细胞、NB-9细胞 
PK-13细胞系相关产品：PG-BE1细胞、NCI H747细胞、EBNA-293细胞 
A-72细胞系相关产品：MDA-157细胞、aTC1 Clone 6细胞、NU-GC-4细胞 
EMT-6细胞系相关产品：CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞 
LAPC-4细胞系相关产品：MESSA Dx5细胞、COR-L51细胞、B95.8细胞 
PG-4 S+L-细胞系相关产品：PLMVEC细胞、SW-780细胞、HSC-3细胞 
NCI-H157细胞系相关产品：Tu 212细胞、SUD4细胞、CAL 12T细胞 
B16细胞系相关产品：Panc-08.13细胞、CCD33Co细胞、Panc-8_13细胞 
SCL1细胞系相关产品：NCTC clone 1469细胞、HTR-8细胞、RWPE1细胞 
CCD-19Lu 人肺成纤维细胞系
Rat 1细胞系相关产品：HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞 
U138-MG细胞系相关产品：HN-6细胞、ST-2细胞、BIU87细胞 
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞系相关产品：Y3M细胞、HPAF2细胞、MLM细胞 
SNU-368细胞系相关产品：AML12细胞、MS 751细胞、5-8F细胞 
DC2.4细胞系相关产品：Psi-2-DAP细胞、PK136细胞、HNSC细胞 
C17.2细胞系相关产品：U 138 MG细胞、Eca109细胞、U266S细胞 
IOSE 29细胞系相关产品：293-EBNA1细胞、F442A细胞、Hx147细胞 
WRL-68细胞系相关产品：LS411细胞、MeT-5A细胞、SUDHL-5细胞 
FHCRC subclone 11细胞系相关产品：3T3细胞、OCM-1A细胞、ARO81细胞 
TE 32细胞系相关产品：Pro-5 Lec1.3c细胞、Mink细胞、C-127细胞 
SW-1116细胞系相关产品：CL1细胞、NCIH2066细胞、CF Pac1细胞 
3T3-F442A细胞系相关产品：rRTEC细胞、MC3T3-E1细胞、SF-295细胞 
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