KMY1022 EB病毒转化的人B淋巴细胞系

"KMY1022 EB病毒转化的人B淋巴细胞系
细胞背景资料：B淋巴细胞；EBV转化 
细胞形态：淋巴母细胞样 
公司主营ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell、INCELL、Promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学来源细胞系及原代细胞，全程提供细胞系背景、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件、传代方法等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！公司由在国外工作和学习多年的留学人员创办，由国内中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所，复旦大学，同济大学等多名工作在线的细胞培养专家，提供细胞培养技术支持。公司依靠自身一些的技术和理念，以世界一流的技术支撑阵容，提供一系列细胞相关的技术服务。为中国的生命科学事业赶超欧美，提供了重要的基石；公司将依靠自主研究开发的高技术高质量和有绝对的价格竞争力的产品，立足国内，面向世界。力争打破国外大公司在细胞培养科学领域接近垄断的地位，为中国在生命科学的这一领域一席之地。公司筹划未来三年内，在沈阳、济南、北京、西安、宁夏、武汉、等国内代表城市建立细胞培养分实验室，以便更好的服务国内广大医院、大学、制药企业等，你们的每一份关心和支持，都是我们前进的动力！ 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KMY1022 EB病毒转化的人B淋巴细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
KMY1022 EB病毒转化的人B淋巴细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
H-810细胞系相关产品：SKRC-42细胞、COLO-320DM细胞、H 9细胞 
MBdSMC细胞系相关产品：NCIH810细胞、MC3T3-E细胞、HCT.116细胞 
HCV29细胞系相关产品：GS9L细胞、HCC-1171细胞、WEHI 164细胞 
CNE-2细胞系相关产品：HCT15细胞、RMC-1细胞、MDA-330细胞 
H-1869细胞系相关产品：Tb 1-Lu细胞、ES2细胞、EoL-1细胞 
CCD-841CoTr细胞系相关产品：Fao细胞、NuTu 19细胞、UPCI-SCC-090细胞 
ATDC-5细胞系相关产品：KMST-6细胞、OVCAR-3细胞、MBMEC细胞 
HCoEpiC细胞系相关产品：P36细胞、C8D1A细胞、HONE-1细胞 
MADISON LUNG TA-109细胞系相关产品：PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞 
HIT-T15细胞系相关产品：SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞 
HLE B-3细胞系相关产品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞 
H4-II-E细胞系相关产品：Hmy.2 CIR细胞、PANC 203细胞、624细胞 
LM2-4175细胞系相关产品：Spodoptera frugiperda clone 9细胞、MHCC97细胞、T-98G细胞 
L-cells细胞系相关产品：UPCI-SCC-090细胞、HCT 116细胞、Hopkins-92细胞 
C3A细胞系相关产品：TCC-SUP细胞、GAK细胞、CII细胞 
WML2细胞系相关产品：UMR-106细胞、BCP1细胞、K7M2细胞 
WML2细胞系相关产品：UMR-106细胞、BCP1细胞、K7M2细胞 
GM02219C细胞系相关产品：MCF 10A细胞、Lec1细胞、RD 2细胞 
NRK clone 52E细胞系相关产品：PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞 
CDC/EU.HMEC-1细胞系相关产品：NCIH2227细胞、SKN-SH细胞、NCI-H209细胞 
KMY1022 EB病毒转化的人B淋巴细胞系
Clone Y-1细胞系相关产品：C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞 
OV-1063细胞系相关产品：C127细胞、SKMES1细胞、HCT-15细胞 
Be Wo细胞系相关产品：MDAMB330细胞、LNCaP C4-2B细胞、IMR-32细胞 
KAT-5细胞系相关产品：NCIH2030细胞、NCIH1993细胞、CMT93细胞 
Michigan Cancer Foundation-12F细胞系相关产品：HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞 
NBLS细胞系相关产品：CEF细胞、RT-BM 1细胞、RK 13细胞 
OP9细胞系相关产品：SNU354细胞、P3X63 Ag8细胞、HCC-1187细胞 
SKOV-3细胞系相关产品：MOLT 3细胞、MADB-106细胞、G-292细胞 
293-EBNA细胞系相关产品：Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、NRK49F细胞、CBRH-7919细胞 
M-O7e细胞系相关产品：HCE-T细胞、EFO27细胞、NCIH548细胞 
UMNSAH/DF-1细胞系相关产品：NCM-460细胞、NCIH1666细胞、H-1993细胞 
P815细胞系相关产品：SKMEL2细胞、NPA'87细胞、hFOB 1.19细胞 
Mo 59J细胞系相关产品：GA-10 clone 4细胞、HuTu 80细胞、Ca759细胞 
HT-29/CX-1细胞系相关产品：231-luc细胞、PC-3/M细胞、HL60细胞 
CF-1 MEF细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-62细胞、RM1细胞、NCI-H-82细胞 
H-1650细胞系相关产品：IPLB-SF 21细胞、DAKIKI Clone 1细胞、U 266细胞 
MDA-415细胞系相关产品：HUVEC细胞、Mouse INsulinoma 6细胞、C22 (Clara)细胞 
MDA-415细胞系相关产品：HUVEC细胞、Mouse INsulinoma 6细胞、C22 (Clara)细胞 
Mel624细胞系相关产品：NCIH847细胞、CAL 148细胞、SK Mel 24细胞 
COLO_320DM细胞系相关产品：HANK-1细胞、SUDHL-8细胞、H22细胞 
RIN Cl-5F细胞系相关产品：SNB19细胞、HCC9204细胞、GM15452细胞 
NU-GC-3细胞系相关产品：MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞 
MN 60细胞系相关产品：NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞系相关产品：YH-13细胞、SLK细胞、NCIH1869细胞 
H2172细胞系相关产品：alphaTC clone 6细胞、Med 341细胞、MKN74细胞 
HUT 28细胞系相关产品：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞 
GC-2spd(ts)细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞 
NCI-H125细胞系相关产品：J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞 
CAKI1细胞系相关产品：Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞 
HB 611细胞系相关产品：RPMI #1846细胞、CAL12T细胞、H2405细胞 
NTERA2-cloneD1细胞系相关产品：GL-261细胞、MB49细胞、SUNE 1细胞 
H292细胞系相关产品：SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞 
G361mel细胞系相关产品：VP 267细胞、HCC-202细胞、HPB/ALL细胞 
EFM19细胞系相关产品：HCC78细胞、MC3T3细胞、SKRC-52细胞 
T98G细胞系相关产品：RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞 
SVHUC细胞系相关产品：H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞 
NCIH1563细胞系相关产品：GM03570E细胞、COLO-738细胞、TOV112D细胞 
U-226AR1细胞系相关产品：H-1417细胞、U-937细胞、WML2细胞 
HDF-a细胞系相关产品：MDA-330细胞、HCC-38细胞、MILE SVEN 1细胞 
PK13细胞系相关产品：MIA PaCa-2细胞、MM1S细胞、BEAS-2B细胞 
OV-90细胞系相关产品：P3JHR-1细胞、RK-13细胞、OK-WT细胞 
KMY1022 EB病毒转化的人B淋巴细胞系
AdHek细胞系相关产品：BHT101细胞、WPE-int细胞、Hs 766细胞 
NCI/ADR-RES细胞系相关产品：FM-88细胞、DC 2.4细胞、L-cell细胞 
COC1/CDDP细胞系相关产品：UCLA RO-81A-1细胞、IFRS1细胞、DHL-6细胞 
COLO-680N细胞系相关产品：HEK-293FT细胞、KP 4细胞、HGSMC细胞 
PF-382细胞系相关产品：HuT-102细胞、Hs888 Lu细胞、SNU-398细胞 
DB细胞系相关产品：RGB细胞、NBL-3细胞、HEL299细胞 
Case 3细胞系相关产品：NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞 
Immortalized Human Hepatocytes细胞系相关产品：H-7721细胞、H-774细胞、CaES-17细胞 
TE8细胞系相关产品：RASMC细胞、NKM-1细胞、PLA-801D细胞 
HCA-7细胞系相关产品：VP267细胞、F9细胞、C127细胞 
NCIH929细胞系相关产品：U-251MG细胞、BC-022细胞、HCC 38细胞 
HCV-29细胞系相关产品：E.L.4细胞、NCI-H69细胞、3396细胞 
"