抗体反应的因素:
1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应最适温度。
膜粘连蛋白6抗体 别 名 Annexin VI; 67 kDa calelectrin; Annexin A6; Annexin VI p68; AnnexinA6; AnnexinVI; ANX 6; ANX A6; ANX6; ANXA 6; ANXA6; Calcium binding protein p68; Calelectrin; Calphobindin II; CalphobindinII; CBP 68; CBP68; Chromobindin 20; Chromobindin20; CPB II; CPBII; Lipocortin VI; LipocortinVI; p68; P70; Protein III; ProteinIII.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Chicken, Dog, Pig
产品类型 一抗
英文名称 Anti-Annexin VI
中文名称 膜粘连蛋白6抗体
研究领域 肿瘤 细胞生物 结合蛋白 细胞膜蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 67-74kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Annexin VI
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
实验步骤:
1、石蜡切片,常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
11、显色剂显色(DAB 或AEC)
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)抗体亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
抗体反应特点:
1.高度特异性,特异性是抗原抗体反应的最主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;
3.适当浓度和比例;
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
含试剂:
1、一抗(应用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、无色试剂:内源性过氧化物酶阻断剂
3、试剂A:封闭用正常山羊血清工作液
4、试剂B:生物素标记二抗工作液:生物素标记羊抗兔IgG
5、试剂C:辣根酶标记链酶卵白素工作液
6、显色液D液 (棕色) 1ml
7、显色液E液(白色)20ml
微黄八叠球菌 SarcinasubflavaRavenel
粪产碱菌 Alcaligenes faecalis Castellani et Chalmers
荚膜红细菌 Rhodobactercapsulatus(Molisch)Imhoffetal.
沼泽红假单胞菌 Rhodopseudomonas palustris
谢氏丙酸杆菌 PropionibacteriumshermaniivanNiel
丙酮丁醇梭菌(丙酮丁醇杆菌) ClostridiumacetobutylicumMcCoyetal.
猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种 Salmonellacholeraesuissubsp.Choleraesuis
痤疮丙酸杆菌 Propionibacteriumacnes(Gilchrist)DouglasandGunterdepositedasCorynebacteriumacnes
巴氏醋杆菌巴氏亚种 Acetobacterpasteurianussubsp.PasteurianusDeLeyetFrateur
德氏乳杆菌保加利亚亚种 Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus
WILKINS-CHALGREN厌氧菌琼250克WILKINS-CHALGREN Agar厌氧菌的分离培养
产气荚膜梭菌琼250克MCP Agar产气荚膜梭菌的计数和培养
乳糖-明胶培养基250克Lactose-Gelatin Medium产气荚膜梭菌明胶液化试验
TSC琼250克TSC Agar产气荚膜梭菌的平板计数
Hektoen琼培养基250克Hektoen Enteric Agar用于沙门氏菌属和志贺菌属的分离培养
克氏铁琼100克KIA肠杆菌科的初步鉴定
GAM琼250克Anaerobic Agar用于梭菌和其他厌氧菌的分离培养
GAM肉汤250克Anaerobic Broth用于专性厌氧菌培养
PY培养基250克PY Medium产气荚膜梭菌的培养
产芽孢肉汤250克Sporulation Broth产气荚膜梭菌的产芽孢培养
脱氧胆钠琼250克DCLA大肠菌群的平板测定以及肠道菌的选择性培养
中国蓝琼250克China Blue Lactose Agar弱选择性培养基,肠道致病菌选择分离
免疫调节蛋白AIRE抗体Sinomenine中文名:青藤碱别名:分子式:C19H23NO4
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体5-Methoxycanthin-6-one中文名:5-甲氧基铁屎米酮别名:分子式:C15H10N2O2
乙醛脱氢酶2型抗体Browniine中文名:别名:Salt form分子式:C25H42NO7
γ-氨基丁酸醛脱氢酶抗体Glabratine中文名:别名:分子式:C27H34N2O9
衰老相关蛋白5抗体Isoboldine中文名:异波尔定碱别名:分子式:C19H21NO4
膜粘连蛋白6抗体 PenicilliumurticaeBainier种属:PenicilliumurticaeBainier
安全等级:1
模式菌株:no
应用领域:产灰黄霉素
培养方法
培养基:15
生长条件:25-26℃荨麻青霉