"DU4475 Cells|人乳腺上皮细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
Panc 10.05细胞系相关产品：U373-MG细胞、CMT-93细胞、SNUC2A细胞
SK-MEL-3细胞系相关产品：HBZY-1细胞、GM07404D细胞、Strain L-929细胞
H-7721细胞系相关产品：TSU-Pr1细胞、TGBC-11-TKB细胞、HEp-2细胞
细胞生长：贴壁
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
DU4475 Cells|人乳腺上皮细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
MHH-CALL-2细胞系相关产品：HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞
Caco2BBe细胞系相关产品：Tn-5B1-4细胞、OVCAR4细胞、LS174T细胞
SKRC-39细胞系相关产品：H1155细胞、SPDC-CCL141细胞、MOLT-3细胞
SL-29细胞系相关产品：MB39细胞、LED-WiDr细胞、E0771细胞
细胞传代方法：每周换液２—３次
传代细胞培养注意事项：１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤：瘤细胞悬液接种１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml/部位，＞１０(６)细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种：将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下：１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１×１０(６)腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７-１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DU4475 Cells|人乳腺上皮细胞系
细胞生长特性：悬浮，多细胞聚集
Rat Skin 1细胞系相关产品：UCLA SO M21细胞、B16BL-6细胞、CAL39细胞
LS 1034细胞系相关产品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、LY细胞、OVCA 433细胞
HEL 299细胞系相关产品：H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞
OCI AML5细胞系相关产品：H-1693细胞、Hs-688A-T细胞、X63Ag8.653细胞
贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。
A-875细胞系相关产品：OVCA-433细胞、Helacyton gartleri细胞、MIA Paca2细胞
C6661细胞系相关产品：MOLP-8细胞、THLE-3细胞、NS1细胞
PC-3M-1E8细胞系相关产品：OVCAR-4细胞、ARH 77细胞、QBI-293A细胞
NW-38细胞系相关产品：Y3-Ag1.2.3细胞、BEAS-2B细胞、Mevo细胞
Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品：SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
SKMel-28细胞系相关产品：Line 207细胞、Hs 888.Lu细胞、A-498细胞
SUDHL-1细胞系相关产品：NCI-SNU-119细胞、JIMT-1细胞、COS1细胞
CEM-T4细胞系相关产品：MDA-MB 468细胞、OCI-AML-2细胞、MDCK (NBL-2)细胞
DU4475 Cells|人乳腺上皮细胞系
NFHIOSE-80细胞系相关产品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、RBL2H3细胞、COLO394细胞
PC-3细胞系相关产品：Lec1细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞、H2141细胞
H295R-S1细胞系相关产品：AU565细胞、AN3-CA细胞、HEK-2细胞
H-1341细胞系相关产品：A1847细胞、MDBK (NBL-1)细胞、D-341Med细胞
S.B.细胞系相关产品：BEL7402细胞、HEK-293-EBNA细胞、DU 145细胞
CCD 841 CoTr细胞系相关产品：COLO-320HSR细胞、CHP212细胞、C3H-10T1/2细胞
C42细胞系相关产品：LUDLU-1细胞、1E8-H细胞、PLA 802细胞
SKG3A细胞系相关产品：IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
SKG3A细胞系相关产品：IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
NCIH1770细胞系相关产品：J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞
H548细胞系相关产品：Jurkat, Clone E6-1细胞、CCD18Co细胞、TSCCa细胞
WM 2664细胞系相关产品：TE-9细胞、SK-MEL24细胞、MV411细胞
SW-579细胞系相关产品：OCI/AML3细胞、M-G63细胞、MAVER细胞
SK-MEL-28细胞系相关产品：HSF细胞、AQ-Mel细胞、4-1st细胞
Caco 2细胞系相关产品：HEM-L细胞、hSCC-25细胞、FRO细胞
A375S2细胞系相关产品：H1341细胞、PANC 1005细胞、PNT1-a细胞
HSKMC细胞系相关产品：C8166-CD4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、SIRC细胞
38C-13细胞系相关产品：MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞
LAN-1细胞系相关产品：NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞
P-815细胞系相关产品：P3-X63-Ag8细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞、Panc-327细胞
Porcine Kidney-13细胞系相关产品：H-1048细胞、P3HRI细胞、HPAF II细胞
SMMC7721细胞系相关产品：CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞
NCIH647细胞系相关产品：Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞
H2087细胞系相关产品：MIN6细胞、HCC0827细胞、CCD-33Co细胞
NSH细胞系相关产品：THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
OSC-19细胞系相关产品：BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞
Panc_05_04细胞系相关产品：JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞
HR-1细胞系相关产品：HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
Vero 76 clone E6细胞系相关产品：EFO 27细胞、HMCB细胞、PaTu-8988s细胞
HOP62细胞系相关产品：UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞
Pa18C细胞系相关产品：HS-766T细胞、BSC40细胞、NCI-441细胞
YES 2细胞系相关产品：SNU520细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、SUM-159细胞
SKG IIIa细胞系相关产品：HS578T细胞、NIH:OVCAR-3细胞、WEHI 3细胞
NCIH295R细胞系相关产品：TI-73细胞、NCIH1755细胞、NCI-H2591细胞
P30OHK细胞系相关产品：Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞
H2085细胞系相关产品：Epstein-Barr-1细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、H1618细胞
3T3 L1细胞系相关产品：NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
NW-MEL-38细胞系相关产品：LL/2(LLc1)细胞、D324 Med细胞、NCIH1944细胞
Tu686细胞系相关产品：UCLA-RO 81细胞、SUM102细胞、RPMI8402细胞
SKMEL-24细胞系相关产品：MDA-134细胞、AE 1201细胞、MV4II细胞
Sf21细胞系相关产品：U-251_MG细胞、NHRF细胞、HT-3细胞
COR-L105细胞系相关产品：HSC1细胞、NCIH1435细胞、Tca-8113细胞
BE(2)-C细胞系相关产品：NCI-H209细胞、MESSA/Dx5细胞、COLO679细胞
HuTu-80细胞系相关产品：Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
Hs-675-T细胞系相关产品：HO8910细胞、C4 I细胞、RPMI-8226S细胞
H-650细胞系相关产品：LCLC103H细胞、ARO 81-1细胞、AtT 20细胞
HeLa229细胞系相关产品：RT-BM-1细胞、CA-46细胞、OCI-Ly 7细胞
NCI H23细胞系相关产品：H-747细胞、C4-2B细胞、SCCVII细胞
HPAF-II/CD18细胞系相关产品：MSC细胞、GM-346细胞、SUP-B15细胞
HG2855细胞系相关产品：P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞
NOMO1细胞系相关产品：Keio University-19-19细胞、Evsa T细胞、Kit 225 K6细胞
DU4475 Cells|人乳腺上皮细胞系
HFLS-OA细胞系相关产品：HFF-1细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HGF-1细胞
CTV1细胞系相关产品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、SPC-A-1细胞、CORL23细胞
PC-3M-1E8细胞系相关产品：OVCAR-4细胞、SW1271细胞、NOR 10细胞
THLE2细胞系相关产品：C3H10T1/2 clone8细胞、RSMC细胞、LN 382细胞
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