"LS513 Cells|人盲肠癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
L 929细胞系相关产品：SUNE-1细胞、HPAF-II/CD18细胞、H711细胞
HeLaS3细胞系相关产品：KP-N-RT-BM细胞、HCC0202细胞、AC29细胞
NCI-H1618细胞系相关产品：3396细胞、H-1417细胞、SNU-1细胞
细胞生长：贴壁
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
LS513 Cells|人盲肠癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
P3X63-Ag8.653细胞系相关产品：8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
ECC 10细胞系相关产品：LC1-Sq细胞、HCC-2218细胞、HEEpiC细胞
OVCAR 8细胞系相关产品：CCRF-CEM/S细胞、Ball 1细胞、JIMT细胞
Reuber-H-35 hepatoma细胞系相关产品：HCC-1588细胞、MPC5细胞、SW-527细胞
细胞传代方法：１：３—１：４传代，每周换液２次
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。传代细胞培养操作步骤：１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２-５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２-３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LS513 Cells|人盲肠癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
NCTC-929细胞系相关产品：SW1417细胞、HGSMC细胞、HO8910PM细胞
Mouse Colon 38细胞系相关产品：KTC1细胞、SNU-484细胞、MDA-231细胞
JIMT细胞系相关产品：HECV细胞、OCILY19细胞、SUPB15细胞
NCI-1155细胞系相关产品：GM05372细胞、MCF7-GFP细胞、102PT细胞
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
SNU-449细胞系相关产品：NCI-H2347细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞、TPC1细胞
COLO-320HSR细胞系相关产品：UACC-812细胞、G-401细胞、NIH3T3细胞
CNE-1细胞系相关产品：HPBALL细胞、SUSM1细胞、IA-LM细胞
HANK1细胞系相关产品：MCA-38细胞、H-1781细胞、NCI-H322细胞
U-226AR1细胞系相关产品：H-1417细胞、U-937细胞、WML2细胞
Hs 606.T细胞系相关产品：NCI-SNU-16细胞、TM3细胞、HDSMC细胞
HSC5细胞系相关产品：SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞
P3X63Ag8-6-5-3细胞系相关产品：SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞
LS513 Cells|人盲肠癌细胞系
FOXNY细胞系相关产品：B16/F1细胞、P815细胞、251 MG细胞
PL9细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-78细胞、CAKI1细胞、MDA-MB-231-GFP细胞
H128细胞系相关产品：Caco2BBe细胞、MBVP细胞、MGH-U3 (RN)细胞
NB4细胞系相关产品：Hep G2细胞、H524细胞、COR-L105细胞
Wien-133细胞系相关产品：NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞
SKLU01细胞系相关产品：WM 239细胞、MM-1S细胞、ATDC-5细胞
CAL 85-1细胞系相关产品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、HIBEpiC细胞、SCC-7细胞
MIA-PaCa-2细胞系相关产品：Dakiki细胞、HSC3细胞、HCPEpiC细胞
MIA-PaCa-2细胞系相关产品：Dakiki细胞、HSC3细胞、HCPEpiC细胞
HFTF细胞系相关产品：HeLa细胞、AX-Mel细胞、NCIH1048细胞
RL-65细胞系相关产品：U266S细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞、MDA468细胞
M210B4细胞系相关产品：BT-20细胞、NCIH358细胞、H-920细胞
CL34细胞系相关产品：HuP-T4细胞、RCCJF细胞、OCI AML3细胞
H-211细胞系相关产品：SUM 190细胞、HT1197细胞、CEM C7细胞
huH 1细胞系相关产品：Lewis lung carcinoma细胞、D283 Med细胞、343MG细胞
U138-MG细胞系相关产品：HN-6细胞、ST-2细胞、BIU87细胞
NCIADRRES细胞系相关产品：RWPE-1细胞、CEL细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞
NCI-H1792细胞系相关产品：MA 104细胞、COLO 678细胞、A-375SM细胞
JEG-3细胞系相关产品：H-295R细胞、GM02131A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞
RenCa细胞系相关产品：NIE 115细胞、SVOG细胞、MT-2细胞
MDA2B细胞系相关产品：WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞
PFSK1细胞系相关产品：DC 2.4细胞、Hs-274-T细胞、TK 10细胞
HR-1细胞系相关产品：HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
Daoy细胞系相关产品：KMB-17细胞、UMRC-2细胞、Rat-2细胞
LCMS细胞系相关产品：KRC-Y细胞、Tj-905细胞、CT-26细胞
COLO206F细胞系相关产品：TC7细胞、INS1细胞、MonoMac6细胞
KRC-Y细胞系相关产品：Human Foreskin Fibroblast细胞、EAC细胞、Y3M细胞
GM00637I细胞系相关产品：NCIH292细胞、Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、HS-940-T细胞
RA-FLSs细胞系相关产品：HCC0044细胞、ZR75-30细胞、L6细胞
H-1568细胞系相关产品：HKC细胞、Me Wo细胞、NP69SV40T细胞
BL2141细胞系相关产品：CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞
GM637细胞系相关产品：OCI-Ly19细胞、DMS273细胞、H865细胞
138MG细胞系相关产品：TYKnu细胞、HEK293-EBNA1细胞、DrG细胞
Pt K2细胞系相关产品：Mouse podocyte细胞、MHCC 97-H细胞、KM12细胞
BAR-T细胞系相关产品：HEK-293F细胞、H22-H8D8细胞、CWR-22rv1细胞
Tadarida brasiliensis 1 lung细胞系相关产品：JCA-1细胞、SCC15细胞、P30/OHK细胞
H-2073细胞系相关产品：Sf21细胞、KMB17细胞、Huh-7细胞
SMMC-7721细胞系相关产品：CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞
SK-N-SH细胞系相关产品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、DMS-79细胞、STC-1细胞
KYSE-270细胞系相关产品：MCA 38细胞、NCI-H2108细胞、GM02132C细胞
EMT-6细胞系相关产品：CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞
293-EBNA1细胞系相关产品：NS-1-Ag4-1细胞、RAW264.7细胞、Blotchy fibroblast-11细胞
KASUMI1细胞系相关产品：9L细胞、Tca-8113细胞、NCI-H295R细胞
rHSC-99细胞系相关产品：624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞
AgC11x3A细胞系相关产品：Cloudman M3细胞、SUM 102细胞、NTera 2/cl.D1细胞
NEC-8细胞系相关产品：TE-10细胞、Panc2_03细胞、KTA7细胞
Ra No. 1细胞系相关产品：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞
HCC-1438细胞系相关产品：LN229细胞、PA I细胞、BpRcl细胞
Rainbow Trout Embryo细胞系相关产品：SupB15W细胞、BOWES细胞、TOG细胞
SNU-1040细胞系相关产品：SCL-2细胞、MSC细胞、SW-1353细胞
NCI-H1688细胞系相关产品：MOLT3细胞、P 3 HR 1细胞、CCD 1112SK细胞
LS513 Cells|人盲肠癌细胞系
NCIH2073细胞系相关产品：BCECs细胞、TE 85.T细胞、DHL4细胞
JiyoyeP-2003细胞系相关产品：UCLA SO M14细胞、WM239A细胞、McCoy细胞
CNE-1细胞系相关产品：HPBALL细胞、HCEC-B4G12细胞、NCIH378细胞
SC1细胞系相关产品：PG-4 S+L-细胞、ARIP细胞、RPMI8402细胞
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