"GAK Cells|人类恶性黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
NK 10a细胞系相关产品：NCIH1734细胞、alpha TC1.6细胞、MPP-89细胞
HBZY1细胞系相关产品：VeroE6细胞、Mac-1细胞、LS 174T细胞
OC-3-VGH细胞系相关产品：SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞
细胞生长：贴壁
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
GAK Cells|人类恶性黑色素瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
JS1细胞系相关产品：786-O RCC细胞、GM07404A细胞、CHP-126细胞
NCI-H847细胞系相关产品：Namalwa细胞、NCI-H-128细胞、IPLB-SF 21AE细胞
BMU-S1细胞系相关产品：Caco 2细胞、NCI-H1781细胞、SW 982细胞
SRA01/04细胞系相关产品：SUM-149PT细胞、MAEC细胞、Colo-201细胞
细胞传代方法：８.４ x １０^４ cells / sq.cm.
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。传代细胞培养操作步骤：１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２-５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２-３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
GAK Cells|人类恶性黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
MOLM-13细胞系相关产品：NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞
KALS-1细胞系相关产品：RA 1细胞、SUDHL1细胞、OVCA433细胞
Capan1细胞系相关产品：SK-RC-20细胞、UWB1-289细胞、HRMC细胞
Murine Lung Epithelial-12细胞系相关产品：OCI-LY-10细胞、JEG3细胞、HBVP细胞
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
OsA-CL细胞系相关产品：TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞
NCI-H2198细胞系相关产品：Ca761细胞、OVCAR5细胞、DSL6A/C1细胞
Scott细胞系相关产品：GOS3细胞、SCC 4细胞、SW1116细胞
ATN1细胞系相关产品：NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞
NCI-322细胞系相关产品：H-2171细胞、H226细胞、NCI-H460细胞
CMT93细胞系相关产品：SK-MEL-2细胞、HCS2/8细胞、SK.OV.3细胞
HUT28细胞系相关产品：COLO 320 HSR细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞、QSG7701细胞
SK-MEL24细胞系相关产品：IGROV 1细胞、EFM192B细胞、COLO-1细胞
GAK Cells|人类恶性黑色素瘤细胞系
CT26-clone 25细胞系相关产品：MRCV细胞、Hce8693细胞、SF 539细胞
EBNA293细胞系相关产品：HSC-I细胞、OV-1063细胞、MiaPaCa2细胞
Hs 766T细胞系相关产品：HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞
FHL124细胞系相关产品：GCT0404细胞、MADISON LUNG TA-109细胞、HeLa-229细胞
SNU761细胞系相关产品：NCIH1694细胞、H1755细胞、Bac 1.2F5细胞
MKN7细胞系相关产品：Panc 1细胞、HS-445细胞、WM266mel细胞
HepG2/C3A细胞系相关产品：SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞
NTera 2细胞系相关产品：N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
NTera 2细胞系相关产品：N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
T241细胞系相关产品：JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞
H1417细胞系相关产品：Jiyoye细胞、GM03671C细胞、GM2131细胞
Panc02.03细胞系相关产品：H2198细胞、U118MG细胞、UWB1-289细胞
U-226AR1细胞系相关产品：H-1417细胞、U-937细胞、WML2细胞
HCT 15细胞系相关产品：COV 434细胞、NCIH2170细胞、MSTO211H细胞
hESC细胞系相关产品：BCAP37细胞、TE12细胞、174xCEM.T2细胞
CCC-HHM-2细胞系相关产品：CL40细胞、NCIH2171细胞、CCD19-Lu细胞
CCD-841-CoTr细胞系相关产品：MEF (CF-1)细胞、LS513细胞、HCoEpiC细胞
LTEPa2细胞系相关产品：SNU-484细胞、PTK-1细胞、MADB106细胞
NCIH810细胞系相关产品：NCI-H2126细胞、NFHIOSE-29细胞、LS513细胞
4-1st细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HL 60细胞、NCI H548细胞
JS1细胞系相关产品：786-O RCC细胞、GM07404A细胞、CHP-126细胞
L-M (TK-)细胞系相关产品：Sp2/0细胞、SKGT2细胞、SKG IIIa细胞
TE353.SK细胞系相关产品：Calu-3细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞、BC-021细胞
Tb 1 Lu细胞系相关产品：MCF.10A细胞、BEL 7402细胞、NHRF细胞
IEC-6细胞系相关产品：AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞
JJN3细胞系相关产品：DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
A-549细胞系相关产品：MDAMB468细胞、HCC1937细胞、P30-OHK细胞
293-H细胞系相关产品：NCI/ADRRES细胞、SKNAS细胞、Vero E-6细胞
B16 melanoma细胞系相关产品：As-PC1细胞、End1/E6E7细胞、H889细胞
A-253细胞系相关产品：RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞
Okayama University Medical School-23细胞系相关产品：OC-316细胞、H-2108细胞、ELD-1细胞
A549细胞系相关产品：D-341Med细胞、38C13细胞、CATHa细胞
HCC-1500细胞系相关产品：SKMES1细胞、Nb-2细胞、SW-1783细胞
GM02132细胞系相关产品：SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞
NCI-H441细胞系相关产品：HCC-366细胞、MN 60细胞、DITNC1细胞
NPC-TW 039细胞系相关产品：Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、LLC PK1细胞、CAL51细胞
VMRC-RCZ细胞系相关产品：SW-839细胞、H-358细胞、Panc02.03细胞
VMRC-RCZ细胞系相关产品：SW-839细胞、H-358细胞、Panc02.03细胞
MES23.5细胞系相关产品：NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
Vero-E6细胞系相关产品：LS-513细胞、KMH-2细胞、PSN1细胞
SCaBER细胞系相关产品：QGY7703细胞、RGC6细胞、L 428细胞
P3-X63-Ag8细胞系相关产品：Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞
EB-3细胞系相关产品：SW 1783细胞、SK-NM-C细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞
MH-S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、PC12(高分化)细胞、KE39细胞
NTERA2细胞系相关产品：NBL-4细胞、NK-92 MI细胞、SW 1353细胞
HCGC细胞系相关产品：BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
Adeno-293细胞系相关产品：VMRC-LCD细胞、TSCC1细胞、8402细胞
SK BR 03细胞系相关产品：3T3NIH细胞、KTC1细胞、Hs 739.T细胞
UCLA-SO-M14细胞系相关产品：C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞
Hs27细胞系相关产品：K299细胞、OS-732细胞、HCC-44细胞
MN 60细胞系相关产品：NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞
GAK Cells|人类恶性黑色素瘤细胞系
SUDHL-10细胞系相关产品：MDCC-MSB-1细胞、OCIAML5细胞、U-251_MG细胞
Colon 38细胞系相关产品：SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SGC996细胞
Scott细胞系相关产品：GOS3细胞、LPC-H12细胞、H1355细胞
SK-Mel 1细胞系相关产品：Hi5细胞、H-87细胞、NK10a细胞
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