"NCI-H1944 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
Hs 870.T细胞系相关产品:RPVSMC细胞、MRC5细胞、KYSE510细胞
SUPB-15细胞系相关产品:CCD-841-CoN细胞、HCT-8细胞、NCI-H446细胞
EAC细胞系相关产品:U-373 MG细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞、Swiss-3T3细胞
细胞生长:贴壁
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
NCI-H1944 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
9L细胞系相关产品:ZYM-DIEC02细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、HCC1008细胞
H-1882细胞系相关产品:IPECJ2细胞、K7M2细胞、MIA PaCa-2细胞
H2052细胞系相关产品:K-562细胞、P560细胞、L cells (TK-)细胞
JHH-2细胞系相关产品:MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞
细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次
几种实验室细胞培养基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定;2)酸钠的作用是什么?酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM;3)加入HEPES有何好处?培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐,它可提供营养,但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer,加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M,常温保存。培养基中的终浓度为25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中;4)红的作用是什么?红在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色;5)谷酰胺的作用是什么?几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培养基中,使其终浓度为2mM培养基。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H1944 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
OCI-AML-5细胞系相关产品:SNU398细胞、16HBE细胞、SK-N-BE(2C)细胞
HCASMC细胞系相关产品:NR-8383细胞、J-774细胞、MA-104细胞
NCI-H2030细胞系相关产品:TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、H-2591细胞、BIU-87/Adr细胞
FD-LSC-1细胞系相关产品:DI-TNC1细胞、DK-MG细胞、C127细胞
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
LS 180细胞系相关产品:HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞
ME-1 [Human leukemia]细胞系相关产品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、U373MG细胞、NCIH2591细胞
H1838细胞系相关产品:DCS细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞、MDAMB157细胞
NRCC细胞系相关产品:Fu97细胞、8505C细胞、COLO320HSR细胞
NPA87细胞系相关产品:DU 145细胞、Sc-1细胞、SHEP1细胞
Jurkat, Clone E6-1细胞系相关产品:H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞
BJ1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、T241细胞、NCI-H510A细胞
MT4细胞系相关产品:B6Tert-1细胞、XWLC-05细胞、MRC-5细胞
NCI-H1944 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
rRTEC细胞系相关产品:H596细胞、NCI-H1105细胞、MCF7ADR细胞
CCD 841 CoTr细胞系相关产品:COLO-320HSR细胞、CHP212细胞、C3H-10T1/2细胞
MDAMB435细胞系相关产品:NCIH647细胞、PTK1细胞、UACC 812细胞
Ly1细胞系相关产品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、Sp2/0细胞、NCIH847细胞
C-28I2细胞系相关产品:RPPVEC细胞、H-1650细胞、NCI-H1993细胞
JVM-3细胞系相关产品:KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞
H2029细胞系相关产品:CAL27细胞、Panc08.13细胞、Hs 274细胞
Hs819T细胞系相关产品:HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞
Hs819T细胞系相关产品:HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞
Hs_578t细胞系相关产品:NOZC-1细胞、MILE SVEN 1细胞、NCIH1876细胞
H1869细胞系相关产品:PA12细胞、SW900细胞、H283细胞
TGBC11TKB细胞系相关产品:NCIH2085细胞、NCTC-3960细胞、OVCAR-433细胞
HepG2/C3A细胞系相关产品:SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞
SJCRH30细胞系相关产品:SBC-3细胞、RCC-10RGB细胞、NCI660细胞
OCIAML4细胞系相关产品:NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞
HPAF2细胞系相关产品:EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞
GM03569B细胞系相关产品:NCI-H1819细胞、HCC1588细胞、MOLT 3细胞
H-1755细胞系相关产品:NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞
mREC细胞系相关产品:SKNBE(2c)细胞、16-HBE14o细胞、LLC-PK-1细胞
HCC-70细胞系相关产品:Swiss/3T3细胞、HBL100细胞、C8D1A细胞
SBC-5细胞系相关产品:SACC-LM细胞、Soleus clone 8细胞、253J-Bladder-V细胞
Co320细胞系相关产品:HOMEC细胞、H-508细胞、SU-DHL1细胞
L929(NCTC)细胞系相关产品:C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞
TPC1细胞系相关产品:TE-4细胞、Mono Mac 1细胞、U-373MG细胞
SHIN3细胞系相关产品:HO8910PM细胞、H187细胞、PC 61细胞
NCI-H2171细胞系相关产品:AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞
HMC-1细胞系相关产品:ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞
BNL CL2细胞系相关产品:BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
KP-N-RT细胞系相关产品:NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞
LLC-WRC 256细胞系相关产品:HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞
OKa-C-1细胞系相关产品:RPMI-1788细胞、C33细胞、N-87细胞
SW 839细胞系相关产品:EL 4细胞、TT细胞、FU-97细胞
D324 Med细胞系相关产品:HFL细胞、FHCRC-11细胞、PANC0504细胞
OCI-Ly 18细胞系相关产品:8305C细胞、F81细胞、P-3J细胞
HEK293FT细胞系相关产品:U-87-MG细胞、251MG细胞、B16F10细胞
H1581细胞系相关产品:HSC-6细胞、L 132细胞、SPDC-CCL141细胞
3T6细胞系相关产品:L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞
3T6细胞系相关产品:L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞
TSUpr1细胞系相关产品:SNU761细胞、UCLA NPA871细胞、KG1细胞
DMS 153细胞系相关产品:Hs852T细胞、CHO细胞、T/G HA VSMC细胞
Panc08.13细胞系相关产品:PC-3M-1E8细胞、MEL-526细胞、NIH3T3-L1细胞
NSI/1-Ag4-1细胞系相关产品:NCI-H2066细胞、Nthy-ori 3.1细胞、alpha TC1 clone 6细胞
SW-1417细胞系相关产品:Jurkat FHCRC细胞、NCI-H889细胞、JURKAT E-6.1细胞
KU-19-19细胞系相关产品:MM1.S细胞、SK-NEP-1细胞、HT细胞
Mono Mac 1细胞系相关产品:BHP-10细胞、KE 37细胞、Leukemia 1210细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞系相关产品:Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、Okayama University Medical School-23细胞、FHL124细胞
TE-13细胞系相关产品:Jurkat clone A3细胞、HOS (TE85)细胞、NRK细胞
Hs934T细胞系相关产品:Kit-225-K6细胞、hRPTC细胞、HEK293F细胞
beta TC6细胞系相关产品:RPMI1788细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞、STTG1细胞
Kit225-K6细胞系相关产品:NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
Lu99A细胞系相关产品:B16-F1细胞、Renal Carcinoma细胞、MBT2细胞
NCI-H1944 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
M20 [Human melanoma]细胞系相关产品:WM115细胞、CAL 78细胞、SUDHL-16细胞
NS653细胞系相关产品:H1869细胞、HECCL-1细胞、NCI H747细胞
H1836细胞系相关产品:H-1581细胞、FRH-0201细胞、NHLF细胞
SK-MEL3细胞系相关产品:Human Embryo Lung-1细胞、HC-11细胞、HEK-293-F细胞
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