杂交瘤细胞无血清培养基
【杂交瘤细胞无血清培养基 用途与描述】
1、杂交瘤细胞无血清培养基可用于小鼠杂交瘤细胞的培养。一般不需驯化,可直接转入杂交瘤细胞无血清培养基中。
2、杂交瘤细胞无血清培养基也可用于大鼠及仓鼠杂交瘤细胞培养,但一般需要驯化,方可适应无血清的培养环境。
3、杂交瘤细胞无血清培养基中蛋白含量低,有利于表达抗体的纯化。
4、杂交瘤细胞无血清培养基内毒素低于0.25EU/mL,减少了腹水条件下困难的内毒素去除操作。
5、三种适合不同生产用量的配套工艺(摇瓶、透气袋、生物反应器)
杂交瘤细胞是将免疫的小鼠脾淋巴细胞(B细胞)与小鼠骨髓瘤细胞融合在一起,该细胞既具备细胞能够产生特异性抗体的特性,又具备肿瘤细胞能够无限传代(永生性)的特点。因此通过杂交瘤细胞的不断传代,就会得到所需种类的单克隆抗体。
【杂交瘤细胞无血清培养基 规格与保存】
产品货号 |
产品名称 |
产品规格 |
保存条件 |
有限期限 |
NC0301 |
杂交瘤细胞无血清培养基 |
1000mL/瓶 |
2-8℃保存 |
12个月 |
NC0301.S |
杂交瘤培养基抗增剂 |
100mL/瓶 |
2-8℃保存 |
12个月 |
在杂交瘤细胞株培养的后期添加杂交瘤培养基抗增剂,可以刺激单克隆抗体表达。
【杂交瘤细胞无血清培养基 主要成分】
杂交瘤细胞无血清培养基主要成分:氨基酸,无机盐,人白蛋白,转铁蛋白,胰岛素,微量元素等。
【杂交瘤细胞无血清培养基 实验数据】
一、杂交瘤细胞不同培养方式细胞数量与抗体产量对照表(1号细胞株)
培养条件 |
最高细胞密度(1号株) |
最高抗体浓度(1号株) |
静态培养 |
1.470x106/ml |
322.5mg/L |
摇瓶培养 |
2.185x106/ml |
510.0mg/L |
静态培养条件:T25培养瓶,5mL培养基。细胞接种密度7.0x104/mL。连续7天不换液培养。
摇瓶培养条件:125mL摇瓶,30mL培养基,转速90rpm。细胞接种密度7.0x104/mL。连续7天不换液培养。
二、杂交瘤细胞不同培养方式细胞数量与抗体产量对照表(2号细胞株)
培养条件 |
最高细胞密度(2号株) |
最高抗体浓度(2号株) |
静态培养 |
1.350x106/ml |
384mg/L |
摇瓶培养 |
1.588x106/ml |
521mg/L |
静态培养条件:T25培养瓶,5mL培养基。细胞接种密度4.0x104/mL。连续7天不换液培养。
摇瓶培养条件:125mL摇瓶,30mL培养基,转速90rpm。细胞接种密度4.0x104/mL。连续7天不换液培养。
三、三种适合不同生产用量的配套工艺(摇瓶、透气袋、生物反应器)的培养数据
1、培养瓶静态培养数据
1号细胞株
培养瓶静态培养条件:T25培养瓶,5mL培养基。细胞接种密度3.5x105/mL。连续7天不换液培养。
培养瓶静态细胞峰值:1.282x106/mL
培养瓶静态抗体峰值:329.5mg/L(检测方法:小鼠IgG Elisa检测)
2号细胞株
培养瓶静态培养条件:T25培养瓶,5mL培养基。细胞接种密度2.6x105/mL。连续7天不换液培养。
培养瓶静态细胞峰值:1.335x106/mL
培养瓶静态抗体峰值:390mg/L(检测方法:小鼠IgG Elisa检测)
2、摇瓶培养数据
1号细胞株
摇瓶培养条件:125mL摇瓶,30mL培养基,转速90rpm。细胞接种密度7x104/mL。连续7天不换液培养。
摇瓶细胞峰值:2.185x106/mL
摇瓶抗体峰值:510mg/L(检测方法:小鼠IgG Elisa检测)
2号细胞株
摇瓶培养条件:125mL摇瓶,30mL培养基,转速90rpm。细胞接种密度4x104/mL。连续7天不换液培养。
摇瓶细胞峰值:1.588x106/mL
摇瓶抗体峰值:521mg/L(检测方法:小鼠IgG Elisa检测)
3、2L培养袋培养数据(静态培养)
1号细胞株
培养袋静态培养条件:2L培养袋,1L培养基。接种密度3.4x105/mL。连续9天根据密度补液培养。
培养袋细胞峰值:2.542x106/mL
培养袋抗体峰值:480.3mg/L(检测方法:小鼠IgG Elisa检测)
2号细胞株
培养袋静态培养条件:2L培养袋,1L培养基。接种密度2.0x105/mL。连续9天根据密度补液培养。
培养袋细胞峰值:2.170x106/mL
培养袋抗体峰值:522.5mg/L(检测方法:小鼠IgG Elisa检测)
四、与现有国外品牌的部分对照数据
细胞密度方面:Yocon培养基最高细胞密度为1.282x106/mL,*****培养基最高细胞密度为1.370x106/mL。最高细胞密度确实差异不大。
细胞倍增时间方面:Yocon培养基第2天即达到了细胞密度峰值,*****培养基第3天达到细胞密度峰值。细胞倍增时间差异显著。
抗体表达方面:
1号细胞株。Yocon小鼠IgG抗体表达量峰值为329.5mg/L,相比*****的240.0mg/L。多出37%。差异明显。
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