PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：布鲁塞尔德克酵母PCR试剂盒
英文名称：Dekkera bruxellensisPCR
编号： FSP1552
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
RENT1/hUPF1ATP依赖解旋酶RENT1抗体特价促销anti- DNTT,TDT antibodyAPC蛋白标记试剂盒黑色素瘤相关抗原B6抗体
Phospho-NMDAR2B (Tyr1474)磷酸化谷氨酸受体2B抗体特价促销anti- DNTT,TDT antibodyAMCA蛋白标记试剂盒黑色素瘤相关抗原B2抗体
Phospho-NMDAR2A + 2B (Tyr1246 + Tyr1252)磷酸化谷氨酸受体2A+2B抗体特价促销anti- DNTTIP1 antibodyRHODAMINE 110蛋白标记试剂盒黑色素瘤相关抗原B4抗体
Wnt11信号通路Wnt11抗体特价促销anti- DOC2B antibody5-ROX蛋白标记试剂盒黑色素瘤相关抗原C1抗体
TFE3转录因子E3特价促销anti- DOCK180 antibody5-TAMRA蛋白标记试剂盒组蛋白乙酰转移酶抗体（脑膜瘤表达抗原5）
NGN1/Neurogenin 1神经元素1抗体特价促销anti- DOCK180-Specific antibodyCY3蛋白标记试剂盒黑色素瘤相关抗原G1抗体（相关蛋白4）
Ubiquityl Histone H2A.X (Lys119)泛素化组蛋白H2AX抗体特价促销anti- DOCK3/MOCA antibodyCY5蛋白标记试剂盒黑色素瘤相关抗原C2抗体
phospho-CPLA2(Ser505)磷酸化胞浆型磷脂酶A2抗体特价促销anti- DOCK4 antibodySULFORHODAMINE蛋白标记试剂盒黑色素瘤抗原样基因2抗体
布鲁塞尔德克酵母PCR试剂盒Human PCBP2 ELISA KitTPST2 酪蛋白硫酸转移酶2抗体三乙二醇人参皂苷Rg1进口/国产BRLF1 立即早期癌因BRLF1抗体（鼻咽癌因）含量：HPLC≥98%
Human ICTP(Cross-linked C-terminal telopeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA KitAGPA/Alpha 1 Acid Glycoprotein α1酸性糖蛋白1/类粘蛋白1抗体对叔丁基甲苯人参皂苷Rg2进口/国产ADAR1 (C-terminus) 双链RNA苷酸脱氨酶抗体（C端）含量：HPLC≥98%
Human PCDH11Y ELISA KitPIWIL4 piwi样4蛋白抗体对叔丁基甲苯人参皂苷Rg3进口/国产Ractopamine /PAYLEAN (1B12) 小鼠抗莱克多巴单克隆抗体含量：HPLC≥98%
Human PCDH11X ELISA KitCARD7/NALP1 凋亡加强结构域蛋白7抗体三甲基乙醛人参皂苷Rh1进口/国产Cellulase 纤维酶含量：HPLC≥98%
Human PCDHA3 ELISA KitNALP4 癌/睾丸抗原58抗体三甲基乙醛人参皂苷Rh2进口/国产Pectinesterase 果胶酶抗体含量：HPLC≥98%
Human PCDHA2 ELISA KitNLRP10 富含亮氨酸重复结构域蛋白10抗体三甲基乙醛人参皂苷Rh3进口/国产DLK1/Delta/DLL1 (C-terminus) 穿膜蛋白DLK1抗体（C端）含量：HPLC≥98%
Human PCDH9 ELISA Kitbeta COP β衣被蛋白抗体三甲基乙醛人参皂苷Rc进口/国产ADD1/alpha Adducin 内收蛋白a1抗体含量：HPLC≥98%
Human PCDHGB3 ELISA KitCaspase 4/Caspase 11 半胱胺酸蛋白酶4/11抗体柠檬酸三乙酯人参皂苷Re进口/国产Gibberellins 牛磺酸/β-氨磺酸抗体含量：HPLC≥98%
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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上海抚生实业有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。
上海抚生实业有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学，暨南大学，南京工业大学，曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒，种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒；另有针对各种动物（鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼）的科研试剂。
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