PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：肺炎病毒PCR检测试剂盒
英文名称：MetaRTPCR
编号： FSP1880
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
EEF2真核翻译延长因子2抗体特价促销anti- MBL2 antibodyTRP高效液相色谱电化学定量检测试剂盒S100A13抗体
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EEF2k真核延伸因子激酶2抗体特价促销anti- MBP tag antibody组织5-羟色胺-N-乙酰基转移酶（Serotonin N-Acetyltransferase）活性比色法定量检测试剂盒磷酸化染色体结构维持蛋白质１抗体
Phospho-EEF2k (Ser366)磷酸化真核延伸因子激酶2抗体特价促销anti- MBP-Tag antibody酵母5-羟色胺-N-乙酰基转移酶（Serotonin N-Acetyltransferase）活性比色法定量检测试剂盒促黄体激素诱导蛋白抗体
Alpha B Crystallin/HSPB5热休克蛋白β5抗体特价促销anti- MBTD1 antibody蓝藻5-羟色胺-N-乙酰基转移酶（Serotonin N-Acetyltransferase）活性比色法定量检测试剂盒磺酰脲类药物受体1抗体
EGFR表皮生长因子受体抗体特价促销anti- MC3R antibody细菌5-羟色胺-N-乙酰基转移酶（Serotonin N-Acetyltransferase）活性比色法定量检测试剂盒磷酸化Smad2抗体
Phospho-EGFR(Ser991)磷酸化表皮生长因子受体抗体特价促销anti- MCC antibody羟基吲哚氧甲基转移酶（hydroxyindole-O-methyltransferase）活性比色法定量检测试剂盒2型猪链球菌菌体蛋白抗体
Phospho-EGFR (Thr678)磷酸化表皮生长因子受体抗体特价促销anti- MCCC1 antibody色氨酸羟化酶 （Tryptophan Hydroxylase）活性比色法定量检测试剂盒S腺苷L-同型半胱氨酸水解酶抗体
肺炎病毒PCR检测试剂盒BROMOCRESOL GREEN, FREE ACID溴甲酚绿PCDHGA4 原钙粘蛋白γA4抗体 5(6)-氨基荧光素Hoechst 33342/PI双染试剂盒
BROMOCRESOL GREEN, FREE ACID溴甲酚绿PCDHGA2 原钙粘蛋白γA2抗体 氯羰基亚磺酰氯吖啶橙(AO)-EB双染色试剂盒
MTT、噻唑兰、Thiazolyl BluePCDHGA3 原钙粘蛋白γA3抗体 1,2,4,5-环己烷四甲酸二酐吖啶橙(AO)-EB双染色试剂盒
O-NITROPHENYL B-D-GALACTOPYRAN（ONPG）邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷PCDHGA5 原钙粘蛋白γA5抗体 5-乙基-4-羟基-2-甲基-3(2H)-呋喃酮吖啶橙（AO）荧光染色试剂盒
O-NITROPHENYL B-D-GALACTOPYRAN（ONPG）邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷PCDHGA7 原钙粘蛋白γA7抗体 L-环己基丙氨酸吖啶橙染色液(1mg/mL)
TTC2,3,5-氯化三苯基四氮唑PCDHGA8 原钙粘蛋白γA8抗体 咪唑并[1,2-a]嘧啶AnnexinV Alexa Fluor647/PI 凋亡检测试剂盒
TTC2,3,5-氯化三苯基四氮唑PCDHGA9 原钙粘蛋白γA9抗体 反-4-氨基环己醇AnnexinV Alexa Fluor647/PI 凋亡检测试剂盒
TTC2,3,5-氯化三苯基四氮唑ASPP2/p53BP2 P53凋亡刺激蛋白2抗体 2-苯氨基-3-甲基-6-二丁氨基荧AnnexinV Alexa Fluor647/PI 凋亡检测试剂盒
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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上海抚生实业有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。
上海抚生实业有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学，暨南大学，南京工业大学，曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒，种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒；另有针对各种动物（鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼）的科研试剂。
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