储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:蜡样芽孢杆菌sleL基因(bp)常规PCR检测试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2564
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Human MBD2 ELISA KitHuman AQP-5(Aquaporin-5) ELISA Kit焦磷酰氯BC-021
Human LCMT1(Leucine carboxyl methyltransferase 1) ELISA KitHuman CCND1(G1/S-specific cyclin-D1) ELISA Kit1-(2,4,6-Trimethylphenyl)-2-(dicyclohexylphosphino)imidazole,95% [cataCXium PlCy]BC-022
Human DNASE2(Deoxyribonuclease-2-alpha) ELISA KitHuman PKM2(Pyruvate kinase isozymes M1/M2) ELISA KitN,N'-双(叔丁氧羰基)肼BT-20
Human Anti-LAMP2(Anti-lysosomal Associated Membrane Protein 2 Antibody) ELISA KitHuman SST(Somatostatin) ELISA KitN,N'-双(叔丁氧羰基)肼HCC1937
Human anti-2019-nCoV(N) IgG ELISA KitHuman FBN1(Fibrillin-1) ELISA KitN,N'-双(叔丁氧羰基)肼MDA-MB-231
Human anti-2019-nCoV(N) IgM ELISA KitHuman GZMA(Granzyme A) ELISA Kit4,4'-二甲氧基苯酚酯MCF 7B
Human FOLR3(Folate receptor gamma) ELISA KitHuman NGB(Neuroglobin) ELISA Kit4,4'-二甲氧基苯酚酯MDA-MB-157
Human CTHRC1(Collagen triple helix repeat-containing protein 1) ELISA KitHuman IMPA2(Inositol monophosphatase 2) ELISA Kit劳丹素(半日花素)MDA-MB-415
蜡样芽孢杆菌sleL基因(bp)常规PCR检测试剂盒Ascosphaera larvis BissettRabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗大鼠IgM 2,3-二氯苯乙酸PHGDH磷酸甘油酸脱氢酶抗体特价促销
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗大鼠IgM 4'-甲氧基-2-苯基苯乙酮PASK/STK39丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶39抗体特价促销
Aliivibrio fischeri (Beijerinck) Urbanczyk ..Rabbit Anti-rat IgM/RBITC 罗丹明标记的兔抗大鼠IgM 5-乙基吡啶-2,3-二羧酸HES1转录因子HES-1抗体特价促销
Phialophora melinii (Nannfeldt) Conant, ana ..Rabbit Anti-rat IgM/FITC FITC标记的兔抗大鼠IgM 1,1-环丁基二羧酸二甲酯Factor VIII第八因子抗体特价促销
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Rabbit Anti-rat IgM/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗大鼠IgM 3-氯-4-甲氧基苯甲腈Noggin指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体特价促销
Penicillium aeneum Smith, anamorphRabbit Anti-rat IgM/Gold 胶体金标记的兔抗大鼠IgM 2-氨基-4-甲氧基吡啶GGT1/CD224γ谷氨酰转移酶抗体特价促销
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Rabbit Anti-rat IgM/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗大鼠IgM 4-甲硫基肉桂酸TAGL2/TAGLN2细胞骨架相关蛋白2抗体特价促销
frozenRabbit Anti-rat IgM/Bio 生物素标记的兔抗大鼠IgM 2-氯-4-氯甲基吡啶Peroxiredoxin 2/PRXII硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ/巯基抗氧化蛋白抗体特价促销
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
关键字: 蜡样芽孢杆菌sleL基因(bp)常规;PCR检测试剂盒;50T;FSP2564;
上海抚生实业有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。
上海抚生实业有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。
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