注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755维库溴铵(标准品)Vecuronium Bromide质量规格:>99%,标准品
LTEP-s细胞,人肺鳞癌细胞 小鼠皮肤细胞,JB6-C30细胞 CL-0114Hs 578T(人癌细胞)5×106cells/瓶×2JNJ-26854165 (Serdemetan)JNJ 26854165质量规格:>98%
Tca-8113(人舌鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2SB505124SB-505124质量规格:>98%
HBdMEC-c 人膀胱微血管内皮细胞(HBdMEC) 500,000cells 皮下脂肪细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)NLG919NLG-919质量规格:>98%,IDO抑制剂
前列腺成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)维莫德吉(GDC0449)Vismodegib;GDC-0449质量规格:>98%,hedgehog抑制剂
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1川陈皮素(标准品)Nobiletin质量规格:HPLC≥98%,标准品
MGC80-3细胞,胃癌细胞 人喉癌细胞,TU212细胞 正常大鼠肾细胞;NRK川楝素(标准品)Toosendanin质量规格:HPLC≥98%,标准品
杂交瘤(B类);Z153A2A5B3A12川芎嗪(标准品)Tetramethylpyrazine质量规格:HPLC≥98%,标准品
RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人细胞裂解液 (阳性对照) 川芎嗪Tetramethylpyrazine质量规格:≥98%,BR
人间充质干细胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg川续断皂苷VI;木通皂苷D(标准品)Asperosaponin Ⅵ质量规格:HPLC≥98%,标准品
脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)wo7iumMETABISULFITE焦亚钠(重亚钠)ACS级白色粉末RTsigma
IB2 Others Human 人 IB2 / B2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 3-氧基-1,2-炳二醇 3-qTHOXY-1,2-PROPcNqDIOL 1874-6-0
小鼠成肌细胞;C2C12蜡样芽孢杆菌计数显色培养基支RT
Lec1细胞,卵巢细胞 人肝癌细胞,FL62891细胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌细胞)5×106cells/瓶×2NEUTRALRED>90%中性红高级暗绿色粉末RTsigma
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K113986-18-0四水合扶化锌ZINC FLUORIDE TETRAHYDRATE
TCN2 Others Human 人 TCN2 人细胞裂解液 (阳性对照) TOOSwo7iumsaltN-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)间胺钠盐25克BR,98%
肠平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)氘代晴 cCqTOnitnILq-D3 06-6-0
BTC Others Human 人 BTC / Betacellulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-10 9050-68-4 25G 分离试剂
人B细胞瘤细胞;RAMOS乙二安四乙酸二钠锌盐100克2~8℃
293E细胞,稳定表达EBNA1的人胚肾细胞 中国仓鼠卵巢细胞,CTLA4 Ig-24细胞 CL-0286M1(小鼠白血病细胞)5×106cells/瓶×228631-66-5本胺蓝CI 42755
操作流程:
FOR Antithrombin-III ELISA Kit(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。