注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
BNL CL.2(小鼠胚胎肝细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M046小鼠肠上皮细胞完全培养基100mL 人多发性骨髓瘤细胞;RPMI-8226 [RPMI8826]2-溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(GC))2-Bromo-9,9-dimethylfluorene质量规格:>98.0%(GC)
猕猴皮肤细胞;MMS42,7-二氨基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Diaminofluorene质量规格:>98.0%(HPLC)
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人细胞裂解液 (阳性对照) 9-溴-10-苯基蒽(>98.0%(GC))9-Bromo-10-phenylanthracene质量规格:>98.0%(GC)
人肺微血管内皮细胞完全培养基 100mL2-氯蒽(>98.0%(GC))2-Chloroanthracene质量规格:>98.0%(GC)
SK23细胞,人色素瘤细胞 嗜热乳酸链球菌 人脑瘤细胞;SF179,10-二氯蒽(>96.0%(GC))9,10-Dichloroanthracene质量规格:>96.0%(GC)
SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞亚甲蓝(标准品)质量规格:含量测定Methylthioninium Chloride Trihydrate
mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓 小鼠精母细胞,GC-2spd细胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮细胞)华法林钠(标准品)质量规格:供HPLC法含量测定用Warfarin
人类原巨核细胞型白血病细胞;UT-7华法林钠质量规格:>98%,BRWarfarin
CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人细胞裂解液 (阳性对照) 洛莫司汀(标准品)质量规格:HPLC含量测定Lomustine
小鼠T瘤细胞(鸡OVA基因修饰);E.G7-OVA度洛西汀质量规格:美国进口Duloxetine
TDGF1 Protein Human 重组人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签)偏重亚钾500克RT
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC 人胰腺星状细胞完全培养基 100mL三基录硅烷 Chlorotriqthylsilcnq 994-30-9
人癌细胞;MDA-MB-157异胍 (常规) Guanidine thiocyanate (≥97.0%) 593-84-0 25G 通用试剂
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) PEA琼脂10张/盒
CM-H134人角膜内皮细胞完全培养基100mL(二甲亚砜)
星形细胞生长添加物AGS马来酸,英文名或英文缩写:Maleic acid,级别:USP级,50万u/g,规格:25克
TE 354.T细胞,人皮肤基底细胞癌 人胚肾细胞,AAV-293细胞 原代单核细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml2-基炳1;异;1,1-二基1 2-Mqthylpropqnq;Isobutqnq; Isobutylqnq;1,1-DiMqthylqthylqnq 112-11-7
盘羊皮肤细胞;ASHS3腺甙脱酶,英文名或英文缩写:ADA,级别:BR,10u/ul,规格:1克
S100A1 Others Human 人 S100A1 人细胞裂解液 (阳性对照) D-丝酸盐酸盐100克
T-104AII型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mLPHA-P 5mg/10mg Sigma分装
操作流程:
FOR Kallikrein-5 ELISA Kit(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。