注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
FGF6 Protein Human 重组人 FGF6 / FGF-6 蛋白5-甲酰水杨酸5-Formylsalicylic acid质量规格:>97%
B16-F10(小鼠皮肤色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人小神经胶质细胞HM阿脲Alloxan, monohydrate质量规格:>98%,进分
人肺动脉成纤维细胞总RNAHPAF NA柠檬酸二铵,柠檬酸氢二铵Ammonium , dibasic质量规格:>99%,AR
CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人细胞裂解液 (阳性对照) 乳酸钙五水(>98%,USP)Calcium (L)-lactate, pentahydrate质量规格:>98%,USP
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS32'-脱氧胸苷-5'-一1酸二钠盐dTMP, 2'-Deoxythymidine-5'-monophosphate di salt质量规格:>97%,分子生物学级
人脐带间充质干细胞HUMSC辛标准溶液(100μg/ml,u=4%)质量规格:100μg/ml,u=4% Phoxim solution
猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞;RF/6A 胶质瘤细胞,SHG44细胞 RD(恶性胚胎横纹肌瘤细胞)辛标准溶液(10μg/ml,u=6%)质量规格:10μg/ml,u=6%Phoxim solution
EB病毒转化的人B细胞;KMY1002甲基橙(IND)质量规格:INDMethyl orange
NOG Others Human 人 Noggin / NOG 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲基红钠盐(IND)质量规格:INDMethyl Red salt
CM-R037大鼠小肠隐窝上皮细胞完全培养基100mL甲基红钠盐(ACS reagent,95 %)质量规格:ACS reagent,95 %Methyl Red salt
PK15-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)猪肾上皮细胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin莱苞迪甙A质量规格:>98%,BRRebaudioside A
IL13 Protein Human 重组人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 标签)莱苞迪甙A(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Rebaudioside A
人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 ) RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞 Rattus环亮氨酸甲酯盐酸盐质量规格:>98%Cycloleucine Methyl Ester.HCl
兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2水溶性四氮唑-3质量规格:BRGLT003
IL27 Others Mouse 小鼠 IL27 / Ierleukin-27 人细胞裂解液 (阳性对照) 表儿茶素没食子酸酯(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品(−)-Epicatechin gallate/ECG
SMR3B Others Human 人 SMR3B 人细胞裂解液 (阳性对照) 马尿酸-L-本酸shēng huà shì jì容量:保存:-20℃25毫克
CL-0029B16(小鼠色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2变色素2R Chromotrope 2R 4197-7-3 1G 通用试剂
H4细胞,人脑神经胶质瘤细胞 人大动脉平滑肌细胞,HASMC细胞 正常大鼠肾细胞(EGF受体阳性);NRK49F酪蛋柏胨 IRON PqPTONcTq 91079-40-
BSC-1(猴肾细胞) 5×106cells/瓶×2N-乙酰-D-基葡萄糖shēng huà shì jì容量:RT25克
COMP Others Human 人 COMP 人细胞裂解液 (阳性对照) 12501-23-41钨酸Phosphotungstic acid
操作流程:
FOR Complement C4-A ELISA Kit(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。