注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
HCT-8/VCR细胞,耐长春新碱结肠癌细胞系 人色素瘤细胞,HME6细胞 表达小鼠MHCⅠ类分子Kb的人胚肾细胞;293KB杯苋甾酮(标准品)Cyasterone质量规格:HPLC≥98%,标准品
H4(人脑神经胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2四氢小檗碱(标准品)Tetrahydroberberine,THB质量规格:HPLC≥98%,标准品
CD274 Others Human 人 PD-L1 人细胞裂解液 (阳性对照) 通关藤苷I(标准品)Tenacissoside I质量规格:HPLC≥98%,标准品
人肝脏星形细胞总RNAHHSteC NA通关藤苷G(标准品)Tenacissoside G质量规格:HPLC≥98%,标准品
JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人细胞裂解液 (阳性对照) 白花前胡丙素(标准品)Praeruptorin C质量规格:HPLC≥98%,标准品
兔源细胞DMP质量规格:BRDMP
TNFRSF1B Others Human 人 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人细胞裂解液 (阳性对照) 没食子酸月桂酯(>98.5%,BR)质量规格:>98.5%,BRDodecyl gallate
CL-0175OK(负鼠肾小管细胞)5×106cells/瓶×2dUMP;2'-脱氧尿苷-5'-1酸二钠盐质量规格:>98%,BRdUMP, 2'-Deoxyuridine-5'-monophosphate, di salt
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-吲哚基-beta-D-吡喃葡萄糖苷(>98%,BR)质量规格:>98%,BRIndoxyl-Glucoside
小鼠肠动脉内皮细胞完全培养基 100mL2-羟基-5-硝基烟酸(98%)质量规格:0.982-Hydroxy-5-nitronicotinic acid
人支气管上皮样细胞;BEAS-2B 人卵巢上皮细胞完全培养基 100mL乳白蛋白,英文名或英文缩写:α-Lactalbumin,级别:BR,50u/mg,规格:1克
人神经束膜细胞RNAHPC miRNA5 μg1,1,2-三录烷 1,1,2-Trichloroqthcnq;Vinyl trichloridq;β-Trichloroqthcnq 79-00-2
ACOX1 Others Human 人 ACOX1 / aox 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 麦芽糖糊精 Mcltodqxtrin 9020-36-6
兔源细胞甲基本基酮,英文名或英文缩写:Acetopxenone,级别:色标,99%,规格:100克
AsPC-1细胞,转移胰腺腺癌细胞 CoC1细胞耐药亚株,CoC1/DDP细胞 人非小细胞肺癌细胞;NCI-H232133-40-6L-脯酸盐酸盐metxyl L-prolinate xy7nochloride
肺血管平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)FISHGELATINBLOCKINGBUFFER,10%鱼明胶阻断试剂蛋白组学级琥珀色至浅棕色液体COLDsigma
SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人细胞裂解液 (阳性对照) β-葡萄糖苷酶 杏仁 (+4℃) BqTc-GLUCOSIDcSq 9001--3
人前列腺癌细胞;PC-3 [PC3]吉姆萨染料 Giemsa stain (for use as a blood stain) 51811-82-6 1G 染色剂
293细胞,人胚肾细胞 小鼠皮下结缔组织细胞,A9细胞 CL-0242Vero(非洲绿猴肾细胞)5×106cells/瓶×2甜醇,英文名或英文缩写:Dulcitol,级别:高,98%,规格:500毫克
YAC-1(小鼠瘤细胞) 5×106cells/瓶×2L-Threonine 25g/100g/250g/500g/1kg 国产
操作流程:
FOR Mitogen-activated protein kinase 1 ELISA Kit产品仅用于科研(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。