适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染
杆粒提取试剂盒 Bacmid Extraction Kit 产品货号:10123 产品规格:100 次/200 次 产品简介: 适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染。 产品内容: 产 品 名 称 100 次 200 次 储 存 条 件 Solution 1 30ml 60ml 2-8℃ Solution 2 30ml 60ml 室 温 KAC 30ml 60ml 2-8℃ Wash Buffer 50ml 100ml 室 温 End Solution 4ml 8ml 2-8℃ 操作步骤: 1. 5ml 离心管 12000rpm 离心 1min 收集细胞。 2. 真空吸干上清,0.3ml 的 Solution 1 重悬沉淀,轻轻地震荡或上下混匀。 3. 0.3ml 的 Solution 2 轻轻混匀,室温孵育 5min。注意:悬浮的沉淀应该从浑浊到几乎半透明。 4. 缓慢加入 0.3ml KAC,加入过程中轻轻混匀,冰上放置 5-10min。 5. 12000rpm 离心 10min。 6. 轻轻将上清转移到含有 0.8ml 异丙醇的离心管,不要吸到白色沉淀,颠倒混匀,冰上孵育 5-10min。 7. 室温 12000rpm 离心 15 min。 8. 小心弃去上清,不要浮起沉淀,加入 0.5ml Wash Buffer,颠倒离心管数次清洗沉淀。 9. 室温 12000rpm 离心 5 min。重复 8 和 9。 10. 轻轻吸弃上清,室温 5-10 min 干燥沉淀,不要过分干燥。注意:勿使用真空离心选装蒸发仪去干燥 DNA。 11. 40μl End Solution重新溶解DNA沉淀,为避免剪切,勿机械重悬DNA,让溶液顺管子轻轻流下溶解DNA。 注意事项: 1. 不推荐纯化的杆粒 DNA 存在-20℃,因为反复冻融会剪切 DNA。 2. 分析重组杆粒 DNA(PCR 鉴定重组杆粒 DNA)或转染昆虫细胞。
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