Calu-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺腺癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

TGW-I-nu细胞类似产品：：NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞

TOG细胞类似产品：：Human Epidermoid carcinoma #2细胞、H441细胞、CCRF-SB细胞

HCC-94细胞类似产品：：RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞

CORL23细胞类似产品：：DoTc2细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞、RF/6A细胞

BRL3A细胞类似产品：：WEHI-164细胞、NTera-2D1细胞、COLO-205细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：消化１０分钟。１：２。３-４天长满

OVCA432_Bast细胞类似产品：：NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞

IFRS1细胞类似产品：：SNU-423细胞、GM06141细胞、TE13细胞

H209细胞类似产品：：HN6细胞、SKHEP1细胞、SPCA1细胞

PNT1A细胞类似产品：：RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞

C 6细胞类似产品：：3T3-L1细胞、NT2D1细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

WIL2 S细胞类似产品：：OSKM-1细胞、SW-1222细胞、HCC-2218细胞

SF295细胞类似产品：：H-2081细胞、Lu-165细胞、PK136细胞

CMK细胞类似产品：：LS-411细胞、CV-1细胞、NCI-H128细胞

BJ1细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、T241细胞、NCI-H510A细胞

OVMANA细胞类似产品：：SK-MEL-5细胞、LIXC-002细胞、PA317细胞

N-2a细胞类似产品：：SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

P-3J细胞类似产品：：TE14细胞、NCI-H1944细胞、VMCUB-1细胞

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HeLa-S3细胞类似产品：：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、P3-X63-Ag8细胞、SW 579细胞

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Hs 706.T细胞类似产品：：NUGC4细胞、HCC1438细胞、HCC-1599细胞

TE3A细胞类似产品：：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞

HCC-2218细胞类似产品：：WRL 68细胞、SCC4细胞、RT-BM 1细胞

Caki2细胞类似产品：：BE2C细胞、OKT 3细胞、CAL-78细胞

NCI-H1395细胞类似产品：：NCI-HUT-520细胞、MESSA细胞、H-748细胞

SU.86.86细胞类似产品：：D6P2T细胞、U031细胞、IMR90细胞

H-676细胞类似产品：：X63-Ag 8.6.5.3细胞、Hs742T细胞、H1238细胞

Y 1细胞类似产品：：MESSA/Dx5细胞、U-251-MG细胞、P3J HR-1细胞

Colo-206F细胞类似产品：：Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、V-79细胞、NCI-H1930细胞

THP 1细胞类似产品：：HUT-226细胞、C2C12细胞、KMS-26细胞

FO [Mouse myeloma]细胞类似产品：：P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞

HME1细胞类似产品：：MC 116细胞、H-1341细胞、SCC-4细胞

OCI/AML-4细胞类似产品：：IGR.OV1细胞、VM-CUB-1细胞、Hs 729.T细胞

32D clone3细胞类似产品：：A9细胞、NCI-H196细胞、MCF-10 Attached细胞

253J-BV细胞类似产品：：RC-K8细胞、GTL 16细胞、MIA PaCa-2细胞

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