A2780 Cells(赠送Str鉴定报告)|人卵巢癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

BrCL12细胞类似产品：：LM2-4175细胞、HM06.A1细胞、EOL1细胞

H69细胞类似产品：：KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞

HIEC细胞类似产品：：Hs 600.T细胞、DoHH-2细胞、CCRF.CEM细胞

293 H细胞类似产品：：RGC5细胞、NCI-H2291细胞、H-125细胞

A2780CP70细胞类似产品：：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞

A2780 Cells(赠送Str鉴定报告)|人卵巢癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２传代

SV-HUC-1细胞类似产品：：Neuro 2a细胞、NCI-UMC-11细胞、NCI-SNU-475细胞

TCam-2细胞类似产品：：SKMES-1细胞、NB-9细胞、HFF细胞

SCL-I细胞类似产品：：WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞

Calu-3细胞类似产品：：H-378细胞、OP-9细胞、Hs 611.T细胞

BXPC3细胞类似产品：：ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

U266B1细胞类似产品：：OV433细胞、EO771细胞、OV1063细胞

MEG01细胞类似产品：：OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞

6-T CEM细胞类似产品：：1.1B4细胞、TR146细胞、Walker256细胞

U 937细胞类似产品：：EAHY-926细胞、N1S1细胞、HBdSMC细胞

CF PAC-1细胞类似产品：：WSU-DLCL(2)细胞、NCI-H841细胞、TE12细胞

CNLMG-B5537SKIN细胞类似产品：：UPCI:SCC90细胞、L 540细胞、SK-N-BE2细胞

如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但ZuiHAO为对数生长期细胞。在冻存前一天ZuiHAO换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做HAO防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏ZuiHAO用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

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FRhK4细胞类似产品：：NCIH508细胞、CCLP-1细胞、Tn 5B1-4细胞

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OACP4 C细胞类似产品：：H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞

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VMM5A细胞类似产品：：CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞

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TE-85细胞类似产品：：Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞

NEC8细胞类似产品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Rca-B细胞、KYSE410细胞

WERI-Rb-1细胞类似产品：：HDLM-2细胞、RT112细胞、UM-UC-1细胞

Human Embryo Lung-1细胞类似产品：：H-1437细胞、SKNBE(1)细胞、TKB-1细胞

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BIC-1细胞类似产品：：BALB/c 3T3 clone A31细胞、SW-756细胞、ONS76细胞

CL-40细胞类似产品：：HNE-3细胞、BL-6细胞、TYKnu细胞

LS513细胞类似产品：：OCI Ly1细胞、MDA-MB-468-RED细胞、H-1184细胞

HEB细胞类似产品：：KMS26细胞、Colon38细胞、H295R-S1细胞

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