HeLa Cells(赠送Str鉴定报告)|人宫颈癌细胞

"HeLa Cells(赠送Str鉴定报告)|人宫颈癌细胞

细胞背景资料：HeLa是个来自人体组织经连续培养获得的非整倍体上皮样细胞系，它由GeyGO等在１９５１年从３１岁女性黑人的宫颈癌组织建立。经原始组织切片重新观察，Jones等将其诊断为腺癌。已知该细胞系含有人乳头状瘤病毒HPV１８序列，需在２级生物安全防护台操作。该细胞角蛋白阳性，p５３表达量较低，但表达正常水平的pRB（视网膜母细胞瘤抑制因子）。

细胞形态：上皮细胞样

接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。

细胞生长：贴壁

beta TC6细胞类似产品：：RPMI1788细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞、STTG1细胞

Anglne细胞类似产品：：COC1/CDDP细胞、HO-8910 PM细胞、GM03573细胞

CMT93细胞类似产品：：SK-MEL-2细胞、HCS2/8细胞、SK.OV.3细胞

KYSE 30细胞类似产品：：P3HR1细胞、EA.Hy926细胞、PCI-04B细胞

LM TK negative细胞类似产品：：SW1088细胞、P3J细胞、HR1K细胞

HeLa Cells(赠送Str鉴定报告)|人宫颈癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：３传代，２-３天换液一次

SuDHL 8细胞类似产品：：ACC-M细胞、Duck embryo细胞、SK-MEL-28细胞

PANC-28细胞类似产品：：CHAGOK1细胞、NCI-H510A细胞、H-EMC-SS细胞

UCLA SO M14细胞类似产品：：H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞

PLA801-95D细胞类似产品：：SJSA细胞、Panc05.04细胞、MPC 11细胞

PL-9细胞类似产品：：IOSE-29细胞、NCIH508细胞、NPC-039细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

HeLa Cells(赠送Str鉴定报告)|人宫颈癌细胞

细胞生长特性：贴壁生长

H2009细胞类似产品：：MCF7细胞、OC-316细胞、HEK293-H细胞

AN3CA细胞类似产品：：MB 157细胞、C6661细胞、Rat podocyte细胞

LN-229细胞类似产品：：RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞

hTERT-RPE细胞类似产品：：NPA'87细胞、MEG-01细胞、Adeno-293细胞

CCD-1112sk细胞类似产品：：Renal Carcinoma细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞、H727细胞

H841细胞类似产品：：B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

RPMI7951细胞类似产品：：SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞

AE 1201细胞类似产品：：Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞

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SUP-T1细胞类似产品：：N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞

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GA-10(Clone 4)细胞类似产品：：hTERTHME1细胞、UCH1细胞、MKN-45细胞

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B16/F1细胞类似产品：：H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞

AX-Mel细胞类似产品：：TCMK-1细胞、OCUM-1细胞、AE 1201细胞

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NS653细胞类似产品：：H1869细胞、LAPC-4细胞、PLA-802细胞

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PK (15)细胞类似产品：：GM07404D细胞、Hs-578T细胞、NCIH2286细胞

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SUD6细胞类似产品：：NCI-H1623细胞、RCS细胞、Walker-256-TC细胞

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Jurkat-FHCRC细胞类似产品：：SNK-1细胞、SKLMS1细胞、H-508细胞

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MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞类似产品：：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞

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H-2227细胞类似产品：：HT1197细胞、HUT 125细胞、J.E6-1细胞

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GA-10-Clone-4细胞类似产品：：MGH-U3细胞、NCIH2135细胞、SKLMS-1细胞

LS 1034细胞类似产品：：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、LY细胞、OVCA 433细胞

SKRC20细胞类似产品：：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞

130T细胞类似产品：：L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞

F56 [Human neoplasm]细胞类似产品：：CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞

TYK-nu细胞类似产品：：SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞

CCLP1细胞类似产品：：HS0578T细胞、HNEpC细胞、SUD6细胞

P31/FUJ细胞类似产品：：SNUC2A细胞、OP9细胞、HTh-74细胞

SCC 15细胞类似产品：：VeroC1008细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、LED-WiDr细胞

686LN-M4e细胞类似产品：：MADB 106细胞、HCE细胞、HEK.EBNA细胞

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