GA-10 clone 4:人B淋巴细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：悬浮

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

BNCL-2细胞类似产品：：CAKI 2细胞、QGY-7701细胞、A72细胞

RL-65细胞类似产品：：U266S细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞、MDA468细胞

NCIH508细胞类似产品：：UACC893细胞、SUM-52PE细胞、Evsa T细胞

Tj-905细胞类似产品：：GH 3细胞、COLO678细胞、mousepodocyte细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

GA-10 clone 4:人B淋巴细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：淋巴母细胞样

C 6细胞类似产品：：3T3-L1细胞、NT2D1细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞

OVCAR5细胞类似产品：：SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞

WERI-Rb-1细胞类似产品：：HDLM-2细胞、RT112细胞、UM-UC-1细胞

细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理HAO工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，Zui大的YOU点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

细胞传代方法：每２-３天换液

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮生长 

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

SKM1细胞类似产品：：QBC-939细胞、KBM-5细胞、NCIH647细胞

A253细胞类似产品：：RPE-hTERT细胞、ME16C细胞、LED-WiDr细胞

H-2107细胞类似产品：：rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞

MC 3T3-E1细胞类似产品：：SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞

C3H/10T1/2细胞类似产品：：JIMT-1细胞、SF763细胞、RTMC细胞

FCCH1024细胞类似产品：：751-NA细胞、KBM-7细胞、Emory University-3细胞

FCCH1018细胞类似产品：：VP 229细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞、EFM-192C细胞

28SC细胞类似产品：：CCC-ESF-1细胞、HEC1A细胞、COLO201细胞

Panc-03.27细胞类似产品：：COLO 320F细胞、NKT细胞、B16-BL6细胞

HCC1599细胞类似产品：：ARO 81-1细胞、ChaGo-K-1细胞、HCC95细胞

Vero 76 clone E6细胞类似产品：：EFO 27细胞、HMCB细胞、PaTu-8988s细胞

PaTu-8988s细胞类似产品：：8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞

SNB19细胞类似产品：：TOV21细胞、PFSK-1细胞、H748细胞

SK MEL 5细胞类似产品：：OVCA 420细胞、AKR细胞、Case 3细胞

TM-3细胞类似产品：：LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞

PK 15细胞类似产品：：MDCC-MSB1细胞、HCC95细胞、Panc 3.27细胞

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H748细胞类似产品：：MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞

HOS-143B细胞类似产品：：DSL6A/C1细胞、SK_N_FI细胞、RCCJF细胞

TE3A细胞类似产品：：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞

Hs 600.T细胞类似产品：：B 95.8细胞、SuDHL 1细胞、H1963细胞

H2.35细胞类似产品：：LNT-229细胞、CCD1112Sk细胞、Karpas 299细胞

H69C细胞类似产品：：H522细胞、MEF (CF-1)细胞、Jurkat E6-1细胞

NCIH2106细胞类似产品：：GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞

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SK-N-BE(1)细胞类似产品：：AZ-521细胞、NOR-10细胞、RAMOS2G64C10细胞

KYSE270细胞类似产品：：2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞

H1944细胞类似产品：：Giant Cell Tumor细胞、HFF1细胞、8505C细胞

LA-N-6(OAN)细胞类似产品：：Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞

H1688细胞类似产品：：T/G HA VSMC细胞、KLM1细胞、HEL-299细胞

HME-1细胞类似产品：：ACT-1细胞、GM02219C细胞、MIHA细胞

Wistar Institute-38细胞类似产品：：PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞

Henrietta Lacks cells细胞类似产品：：IM 9细胞、OVHM细胞、MOLT16细胞

BxPC-3细胞类似产品：：RPMI-7666细胞、M 1细胞、H-345细胞

MDA-175细胞类似产品：：Tn-5细胞、KY180细胞、M4e细胞

MX-1细胞类似产品：：HFE-145细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、N-2a细胞

P3.times.63 Ag8.653细胞类似产品：：KYSE-520细胞、NCI.H460细胞、MM1-S细胞

H-1105细胞类似产品：：UWB1289细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞

BPH1细胞类似产品：：U118MG细胞、MDA-MB-435-S细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞

A72细胞类似产品：：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞

NCI H345细胞类似产品：：TOV112D细胞、Earles's cells细胞、PATU-S细胞

Hs675T细胞类似产品：：A2780/CP70细胞、Tu-177细胞、624 MEL细胞

130T细胞类似产品：：L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞

RGE细胞类似产品：：Hs 683.T细胞、L615细胞、NOZC-1细胞

Y3-Ag 1.2.3细胞类似产品：：0V-1063细胞、DU_145细胞、ECC-10细胞

CCD18细胞类似产品：：T-98G细胞、IM9细胞、NCI-H2110细胞

CCD18细胞类似产品：：T-98G细胞、IM9细胞、NCI-H2110细胞

TK10细胞类似产品：：KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞

U-373MG ATCC细胞类似产品：：IPLB-Sf21-AE细胞、A2780-CP细胞、HK-2 [Human kidney]细胞

FL-83B细胞类似产品：：SW954细胞、Hi-5细胞、MDA175细胞

EB1细胞类似产品：：Colo320细胞、CCFSTTG1细胞、J774A1细胞

LS 180细胞类似产品：：HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞类似产品：：LNCaP-FGC细胞、HOC-1细胞、CMT-64细胞

NS-1细胞类似产品：：MADB 106细胞、MLOY4细胞、KYSE-140细胞

HSC/mHSC细胞类似产品：：Human Embryonic Kidney 293细胞、Danio rerio Gill细胞、hESC细胞

Ca9-22细胞类似产品：：C643细胞、MV-4-11细胞、NCIH128细胞

Colo-201细胞类似产品：：NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞

SACCLM细胞类似产品：：HEK 293细胞、HCT/Taxo1细胞、Det. 562细胞

TGBC-11-TKB细胞类似产品：：RPMI7951细胞、J82 COT细胞、LC-1 sq细胞

UPCI-SCC-090细胞类似产品：：U20-S细胞、R3/1细胞、OVMANA细胞

TGHAVSMC细胞类似产品：：HCC70细胞、M-20细胞、PTK2细胞

NCI-SNU-216细胞类似产品：：KPL4细胞、NCI-SNU-216细胞、SNU520细胞

H2107细胞类似产品：：38C-13细胞、HCO细胞、NCIH2405细胞

TE 32细胞类似产品：：Pro-5 Lec1.3c细胞、T-ALL 1细胞、NCI-H23细胞

Me Wo细胞类似产品：：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞

SK-ChA1细胞类似产品：：Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞

BV173细胞类似产品：：RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞

NCIADR.RES细胞类似产品：：SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞

Bat lung细胞类似产品：：LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞

Jiyoye细胞类似产品：：ABC-1细胞、LNCaP C4-2细胞、3AO细胞

Becker细胞类似产品：：WI38细胞、L cell line细胞、PCI:SG231细胞

CAL851细胞类似产品：：CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞

H660细胞类似产品：：TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞

CEM-C1细胞类似产品：：Reuber H35细胞、AG06814-J细胞、Hs 729细胞

EL4细胞类似产品：：MDCK.2细胞、SK-MEL3细胞、SV40-HCEC细胞

SUM-149细胞类似产品：：RAMOS2G64C10细胞、HMEC-1细胞、KYSE-150细胞

BNL-HCC细胞类似产品：：Walker 256细胞、Vero细胞、QGY细胞

H-2126细胞类似产品：：A253细胞、VCaP细胞、Be Wo细胞

CAL-120细胞类似产品：：Ishikawa细胞、RAT2细胞、MBT-2细胞

BEL7405细胞类似产品：：GDM1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、CAL33细胞

STC-1细胞类似产品：：Tu-686细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞、NIH/3T3细胞

FM88细胞类似产品：：BaF3细胞、NCTC-1469细胞、SKO007细胞

H69/P细胞类似产品：：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞

H69/P细胞类似产品：：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞

SUDHL-1细胞类似产品：：NCI-SNU-119细胞、JIMT-1细胞、COS1细胞

LOU-NH91细胞类似产品：：CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞

Normal fibroblast-10细胞类似产品：：58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞类似产品：：HFB细胞、PL-5细胞、MCF 7B细胞

HT1197细胞类似产品：：190PT细胞、MKN1细胞、A-375细胞

CHL/IU细胞类似产品：：NCI-747细胞、DoTc2细胞、MOLP8细胞

Centre Antoine Lacassagne-27细胞类似产品：：MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞

Hs683T细胞类似产品：：H1836细胞、PBL细胞、HTori3细胞

RERF-LC-MS细胞类似产品：：NH6细胞、H-211细胞、RBL-I细胞

HEL9217细胞类似产品：：Kato-III细胞、H1836细胞、TE 85.T细胞

3T3(A31)细胞类似产品：：MKN-1细胞、H-548细胞、PL-11细胞

Hs 683细胞类似产品：：RDES细胞、Hs606细胞、HuH-6细胞

SUDHL-1细胞类似产品：：NCI-SNU-119细胞、JIMT-1细胞、COS1细胞

D324 Med细胞类似产品：：HFL细胞、FHCRC-11细胞、PANC0504细胞

18G3.cl 1细胞类似产品：：SNU-216细胞、NCI H157细胞、SKGIIIA细胞

MH-22a细胞类似产品：：High-5细胞、NCI-H2286细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞

Mouse Colon 38细胞类似产品：：KTC1细胞、SNU-484细胞、MDA-231细胞

SK-ChA-1细胞类似产品：：CHL细胞、PC-3细胞、TOV-112D细胞

NTHY-ORI3.1细胞类似产品：：hEEC细胞、Mv1Lu细胞、HMy2.CIR细胞

GM05887A细胞类似产品：：MDCK Type II细胞、H2196细胞、CORL51细胞

293-EBNA细胞类似产品：：Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、NRK49F细胞、CBRH-7919细胞

293H细胞类似产品：：SMC-1细胞、HEK (AD293)细胞、MSB-1细胞

87 MG细胞类似产品：：Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞

GA-10 clone 4:人B淋巴细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

Madison lung细胞类似产品：：WEHI-279细胞、CFPAC-1细胞、K 562细胞

VM-CUB-I细胞类似产品：：SHIN-3细胞、HFL 1细胞、HOS(TE85)细胞

HBEpiC细胞类似产品：：RWPE-2细胞、SKO3细胞、GM03571细胞

PC-3M 2B4细胞类似产品：：KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞

H-2085细胞类似产品：：BC-PAP细胞、GTL16细胞、NCTC 3960细胞

751-NA-15细胞类似产品：：SMA-560细胞、SW 480细胞、KYSE 70细胞

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