ST486:人B淋巴细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：悬浮

有一些细胞是数量多一点比较HAO生长，生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不HAO，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

SNU869细胞类似产品：：Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞

NCI-H2029细胞类似产品：：Ku812细胞、P30 OHK细胞、SK-NEP-1细胞

M14细胞类似产品：：SK MEL-28细胞、T1-73细胞、Douglas Foster-1细胞

Nb2细胞类似产品：：C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

ST486:人B淋巴细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：淋巴母细胞样

NCIH1299细胞类似产品：：H1650_CO细胞、JS1细胞、Swiss 3T6细胞

UCLA RO-81-A-1细胞类似产品：：293 EBNA细胞、Molm 13细胞、SUDHL8细胞

NCIH647细胞类似产品：：Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞

培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。

细胞传代方法：每２-３天换液

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮生长 

细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。

OCILY19细胞类似产品：：hFOB 1.19细胞、NCIH2029细胞、Walker-256细胞

MHCC-LM3细胞类似产品：：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞

HuCCT-1细胞类似产品：：T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞

SK RC 20细胞类似产品：：OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞

OSA细胞类似产品：：SHIN3细胞、SUDHL-4细胞、OCI-Ly07细胞

NCI-H508细胞类似产品：：293-H细胞、NCI660细胞、JVM3细胞

Calu-1细胞类似产品：：KYSE-140细胞、BCAP37细胞、NCI-BL2141细胞

PL45细胞类似产品：：4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞

EA. hy 926细胞类似产品：：SUM190PT细胞、THLE-2细胞、AU 565细胞

PAI细胞类似产品：：UPCISCC090细胞、MS751细胞、H1404细胞

MuM-2C细胞类似产品：：Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞

H-2330细胞类似产品：：Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞

MC57细胞类似产品：：NB19-RIKEN细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、NPA细胞

OVCA432_Bast细胞类似产品：：NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞

E0771细胞类似产品：：Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、BC-3-H-I细胞、kms 11细胞

RD 2细胞类似产品：：SACCLM细胞、PANC-10-05细胞、COLO-HSR细胞

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CCD841CoTr细胞类似产品：：A-72细胞、MFM223细胞、U-343细胞

MDA-330细胞类似产品：：SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞

HuT78细胞类似产品：：P3J HR1-K细胞、MHCC 97细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞

SUPB15细胞类似产品：：SN12C-PM6细胞、HRPEpiC细胞、A 2058细胞

TOV-112D细胞类似产品：：ECGI10细胞、HEK293-H细胞、Hs68细胞

PaCa2细胞类似产品：：NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞

Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞类似产品：：NIH/3T3细胞、BV-173细胞、HEK/293细胞

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PA1细胞类似产品：：Nb2a细胞、EJ-1细胞、K-562细胞

MOLT-4细胞类似产品：：HEL92.1.7细胞、RGC-5细胞、SNU668细胞

HBE 135-E6E7细胞类似产品：：SaOS细胞、HPAEpiC细胞、Clone 929细胞

H-II-E-C3细胞类似产品：：beta-TC6细胞、MDCK-2细胞、NE1细胞

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H2126细胞类似产品：：AMC-HN-8细胞、NCI-HUT-520细胞、K562/ADP细胞

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HECCL-1细胞类似产品：：K422细胞、OK细胞、H-1694细胞

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NCIH1915细胞类似产品：：SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞

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Capan 1细胞类似产品：：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞

87 MG细胞类似产品：：Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞

H82细胞类似产品：：FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞

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MHCC97L细胞类似产品：：MESSADX5细胞、COLO 741细胞、CEM-C7细胞

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G361-mel细胞类似产品：：KBM-5细胞、TK-1细胞、REC 1细胞

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G402细胞类似产品：：MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞

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786-O细胞类似产品：：P-19细胞、Y3M细胞、KU812-F细胞

MSB-1细胞类似产品：：WEHI3细胞、MC57细胞、NBL-5细胞

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CHP 212细胞类似产品：：HCC-1806细胞、H-1155细胞、KMS-11细胞

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MADB 106细胞类似产品：：HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞

HCC366细胞类似产品：：L-363细胞、KYSE70细胞、GM00637H细胞

LL/2 (LLC1)细胞类似产品：：HeLa229细胞、ROS 17/2.8细胞、LAN6细胞

UMUC1细胞类似产品：：HLE细胞、HFL-1细胞、H-2029细胞

Walker/LLC-WRC 256细胞类似产品：：GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞

PNT1A细胞类似产品：：RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞

HT 1376.T细胞类似产品：：U138细胞、hADSCs细胞、OVCA432细胞

SUM 159PT细胞类似产品：：GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞

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MDAMB361细胞类似产品：：HuH-6细胞、SW1783细胞、HT1080细胞

LNCaP.FGC细胞类似产品：：NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞

WM 266-4细胞类似产品：：CMT 167细胞、SNU484细胞、CTLL-2细胞

MC3T3细胞类似产品：：P3-NS1/1-Ag4-1细胞、Panc 02细胞、COLO 201细胞

hCMEC/D3细胞类似产品：：SACC-83细胞、EBTr细胞、MN9D细胞

SUM149细胞类似产品：：KBM7细胞、PA317细胞、SP-2/0-AG14细胞

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