L-5178-Y:小鼠淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：悬浮

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

BN-CL2细胞类似产品：：SW-1271细胞、OCI/AML-4细胞、Calu-3细胞

HNE1细胞类似产品：：RINm5F细胞、TE-14细胞、AX-Mel细胞

DMS-79细胞类似产品：：U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞

CNE1细胞类似产品：：OE33细胞、KMS-11细胞、HEK-293细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

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细胞形态：淋巴母细胞样

Swiss-3T3细胞类似产品：：H-1688细胞、Capan2细胞、HCC1395细胞

NK-92.05细胞类似产品：：32D-Cl3细胞、H1573细胞、NCI-H146细胞

SK-OV-3细胞类似产品：：WM-239-A细胞、TCMK1细胞、NCIH2405细胞

培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。

H1781细胞类似产品：：MAC1细胞、mREC细胞、HEC151细胞

TPC-1细胞类似产品：：OUMS23细胞、D407 RPE细胞、RTE细胞

NPC-TW-039细胞类似产品：：MDAMB231细胞、OV433细胞、LWnt3A细胞

WC00059细胞类似产品：：GM01232细胞、LTEPa2细胞、NCI H157细胞

CCC-HEH-2细胞类似产品：：SK-GT-4细胞、Tn5 B1-4细胞、MESSADX5细胞

C-4-I细胞类似产品：：Capan2细胞、beta-TC6细胞、Jijoye细胞

ANA1细胞类似产品：：C-127细胞、KBM7细胞、H-2081细胞

SKG-IIIa细胞类似产品：：IOSE80细胞、BC-019细胞、H-2196细胞

1E8-H细胞类似产品：：RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞

MC3T3-L1细胞类似产品：：C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞

VAESBJ细胞类似产品：：ELD-1细胞、NCI-H322T细胞、MyLa2059细胞

TMD-8细胞类似产品：：293-FT细胞、SKNBE-2细胞、CEM-0细胞

SKBr3细胞类似产品：：Hs-281-T细胞、HFTF细胞、OAW 42细胞

M-NFS-60细胞类似产品：：ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞

Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞类似产品：：Hs729T细胞、BMU-S1细胞、Rca-B细胞

NT2细胞类似产品：：T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞

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MC-116细胞类似产品：：SBC3细胞、NPA87-1细胞、H-510细胞

PLC细胞类似产品：：Hs739T细胞、RPMI-1788细胞、OVCA-432细胞

P3X63 AG 8.653细胞类似产品：：C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞

SUDHL1细胞类似产品：：GC-1 spg细胞、ZR7530细胞、Huh 7.5.1细胞

870细胞类似产品：：H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞

HCC2157细胞类似产品：：IMR-32细胞、Panc10.05细胞、OV433细胞

LAN6细胞类似产品：：TE-8细胞、AD-293细胞、U373细胞

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THP-1细胞类似产品：：OVCAR420细胞、P388-D1细胞、High Five细胞

JB6Cl30细胞类似产品：：MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞

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NCI-H2171细胞类似产品：：AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞

NCIH2347细胞类似产品：：SW-48细胞、MFE296细胞、KOPN8细胞

E.G7-OVA细胞类似产品：：EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞

RSC96细胞类似产品：：PG [Human lung carcinoma]细胞、H-322细胞、Y 1细胞

NCIH208细胞类似产品：：L6565细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、M-G63细胞

GA-10细胞类似产品：：NIH3T3-L1细胞、HIEC-6细胞、K1细胞

PNT1-a细胞类似产品：：DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞

RC13细胞类似产品：：JF305细胞、BE2-C细胞、HSC5细胞

T-T细胞类似产品：：CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞

HBE细胞类似产品：：NCI-446细胞、RL细胞、mIMCD3细胞

TF-1细胞类似产品：：Chang liver细胞、Alexander cells细胞、hTERT RPE1细胞

Z138细胞类似产品：：NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞

MLMEC细胞类似产品：：U-266细胞、GDM-1细胞、HuT-78细胞

LAN-5细胞类似产品：：GA-10细胞、HCC941122细胞、HEM-L细胞

OV-2008细胞类似产品：：IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞

KOSC2细胞类似产品：：TALL-104细胞、SU-DHL2细胞、HGF-1细胞

33604细胞类似产品：：KMS-18细胞、H-711细胞、U118细胞

MAD109细胞类似产品：：Karpas422细胞、S16细胞、Hs-940细胞

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Tca8113细胞类似产品：：Hs 695T细胞、SUDHL-5细胞、Tu-212细胞

CAL 120细胞类似产品：：CV-1.K细胞、D562细胞、MRC9细胞

SK-RC-39细胞类似产品：：PE/CA-PJ34细胞、BT.549细胞、COR-L51细胞

WB-F344细胞类似产品：：NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞

HS5细胞类似产品：：huH 1细胞、PLB985细胞、COLO829细胞

H-2135细胞类似产品：：ROS17/28细胞、SKRC20细胞、Epstein-Barr-1细胞

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SW527细胞类似产品：：R3/1细胞、P3/NS-1细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞

OVCA432_Bast细胞类似产品：：NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞

LLCPK1细胞类似产品：：SK-NMC细胞、B-CPAP细胞、HBEpiC细胞

MLTC-1细胞类似产品：：MV3细胞、HemECs细胞、SK N SH细胞

H-2195细胞类似产品：：H-226细胞、Hs683细胞、D324 Med细胞

KGN细胞类似产品：：SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞

SW-1783细胞类似产品：：FRhK4细胞、Jeko1细胞、G 401细胞

SUM-102细胞类似产品：：H-1651细胞、IPAM-WT细胞、ACC-2细胞

NPC-TW-039细胞类似产品：：MDAMB231细胞、NCI.H23细胞、HCC1833细胞

MC3T3-E1 Subclone 14细胞类似产品：：P3/X63/Ag8.653细胞、FLS细胞、DMS 53细胞

Ku812F细胞类似产品：：159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞

SCL1细胞类似产品：：NCTC clone 1469细胞、HTR-8细胞、RWPE1细胞

Hs688(A)T细胞类似产品：：WM266-4细胞、mousepodocyte细胞、HTR8/SVneo细胞

Colon38细胞类似产品：：H125细胞、RC13细胞、JF305细胞

L78细胞类似产品：：L929(NCTC)细胞、HEC-151细胞、MCF-12F细胞

343 MG细胞类似产品：：SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞

CAL851细胞类似产品：：CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞

COLO 684细胞类似产品：：NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞

End1/E6E7细胞类似产品：：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞

WPE-int细胞类似产品：：HCC-2108细胞、DMS-53细胞、BIC细胞

H-1781细胞类似产品：：RD-2细胞、CHG-5细胞、HSC4细胞

NSC34细胞类似产品：：NTera 2/cl.D1细胞、H.Ep. #2细胞、LC1-Sq细胞

H766T细胞类似产品：：Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞

NCIH211细胞类似产品：：NIH:OVCAR-10细胞、MDA-361细胞、NCI-H740细胞

FET细胞类似产品：：CTLL-2细胞、N-Tera-2细胞、H-1563细胞

Sol8细胞类似产品：：RAW2647细胞、Oregon J-111细胞、U-118MG细胞

LK-2细胞类似产品：：RAEC细胞、COLO 829细胞、A1847细胞

COLO 201细胞类似产品：：Madin Darby Canine Kidney细胞、HuP-T3细胞、Bovine Turbinate细胞

Wien133细胞类似产品：：CHL-CL-11细胞、BALL1细胞、LTEP-a2细胞

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HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞类似产品：：RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞

Hs-695-T细胞类似产品：：H226细胞、JB6 Cl 30细胞、OVCA-420细胞

TE-13细胞类似产品：：Jurkat clone A3细胞、HOS (TE85)细胞、NRK细胞

NCI-H2172细胞类似产品：：Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞

MC 116细胞类似产品：：GM06141细胞、KFB细胞、MH-S细胞

IGR.OV1细胞类似产品：：HT 1197细胞、C38细胞、GM17346细胞

P3/NS1/1-Ag4-1细胞类似产品：：EU-3细胞、GM 2132细胞、SHP-77细胞

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SU86_86细胞类似产品：：HFL-I细胞、Melan-a细胞、L-Wnt3A细胞

C1R细胞类似产品：：HEK-293细胞、UMNSAH-DF1细胞、NOR 10细胞

EU-3细胞类似产品：：PANC0203细胞、Vero 76细胞、DHL-5细胞

GL261细胞类似产品：：GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞

HCC 94细胞类似产品：：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞

SN-12C细胞类似产品：：BRL 3A细胞、KM.12细胞、MCF7细胞

G519细胞类似产品：：NCI H747细胞、OVCAR-432细胞、GTL 16细胞

MESSA Dx5细胞类似产品：：PASMCS细胞、CCD19-Lu细胞、U251细胞

OUMS-27细胞类似产品：：KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞

Panc_04_03细胞类似产品：：YD38细胞、J 111细胞、SNU-739细胞

AML-12细胞类似产品：：HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞

Rat Chondrosarcoma Swarm细胞类似产品：：HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞

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SK-MES-1细胞类似产品：：NEC细胞、SU-86-86细胞、Simpson细胞

Hs 445细胞类似产品：：OP9细胞、TK.10细胞、H-1963细胞

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C2-C12细胞类似产品：：AQ-Mel细胞、WEHI3细胞、KYSE-450细胞

PAEC细胞类似产品：：HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞

OV433细胞类似产品：：HMO6细胞、SH-SY5Y细胞、RSC96细胞

AG06814-J细胞类似产品：：BAC1.2F5细胞、Pt K2细胞、LWnt-3A细胞

COS-1细胞类似产品：：OACP4C细胞、H-2172细胞、CL-34细胞

HN13细胞类似产品：：16-HBEo细胞、B16 F10细胞、R 1610细胞

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