LLC-MK2 Cell|恒河猴肾细胞

"LLC-MK2 Cell|恒河猴肾细胞

细胞背景资料：胚胎；肾；自发永生

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，HAO象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用８ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，GAO倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良HAO，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提GAO细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。

细胞生长：贴壁

8226细胞类似产品：：HCT-15细胞、H-1930细胞、NCI H295R细胞

NCI-H2087细胞类似产品：：SW962细胞、SRS-82细胞、HBZY1细胞

QGY-7703细胞类似产品：：FLC7细胞、LNCaP细胞、FET细胞

G361-mel细胞类似产品：：KBM-5细胞、SKCol1细胞、K7M2细胞

UPCI-SCC-90细胞类似产品：：Epstein-Barr-1细胞、SKRC20细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

LLC-MK2 Cell|恒河猴肾细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们Zui常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不HAO），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板HAO掌握，效果没有96孔板HAO。培养瓶里面加HAO细胞以后(比如传代HAO/分HAO细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。

OVMANA细胞类似产品：：SK-MEL-5细胞、LIXC-002细胞、PA317细胞

TR 146细胞类似产品：：SW1222细胞、SNB19细胞、KM H-2细胞

SK-RC-39细胞类似产品：：PE/CA-PJ34细胞、BT.549细胞、COR-L51细胞

Hs604T细胞类似产品：：TSCCa细胞、P3X63细胞、GA-10 clone 4细胞

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

细胞系永生化原理介绍：多数正常细胞的寿命是有限的，能传20-100代，但有些细胞，尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞，可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的，在传到12代左右以后可能出现危相，多数细胞在这个阶段死亡了，但少数细胞存活下来，并拥有了更GAO的生长率，成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程，包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作，病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原，可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长，同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性，从而使基因组的不稳定性增加，也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染，足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有：EBV用于淋巴母细胞样细胞；SV40 LT用于黏附细胞，如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。

UMUC14细胞类似产品：：Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞

HTR-8细胞类似产品：：NCI-H2330细胞、MDA-157细胞、V 79细胞

SU-DHL6细胞类似产品：：HuT78细胞、NCI-H661细胞、IOSE-29细胞

ADR-RES细胞类似产品：：SG231细胞、B-16细胞、Hs600T细胞

alpha TC1 clone 6细胞类似产品：：Leukemic 1210细胞、COLO-320-HSR细胞、H19-7细胞

Panc327细胞类似产品：：KPL-1细胞、BEL-7402细胞、COLO-320HSR细胞

OCI-AML3细胞类似产品：：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞

M-14细胞类似产品：：SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞

HFLS-OA细胞类似产品：：HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞

NEC-8细胞类似产品：：TE-10细胞、Panc2_03细胞、KTA7细胞

LLC-MK2 Cell|恒河猴肾细胞

RT 112细胞类似产品：：PLC/PRF5细胞、H-2291细胞、KYSE0520细胞

TE7细胞类似产品：：NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞

hTERT-RPE1细胞类似产品：：Hs821T细胞、STTG1细胞、DR2R 1610细胞

MDA-MB-134-VI细胞类似产品：：MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞

Karpas 422细胞类似产品：：WC00059细胞、NS-1细胞、TC7细胞

KU-19-19细胞类似产品：：MM1.S细胞、SK-NEP-1细胞、HT细胞

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Blotchy fibroblast-11细胞类似产品：：Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞

TE1细胞类似产品：：H-2228细胞、COLO-320HSR细胞、Med 341细胞

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Centre Antoine Lacassagne-51细胞类似产品：：LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞

FCCH1024细胞类似产品：：751-NA细胞、KBM-7细胞、Emory University-3细胞

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Ramos.G6.C10细胞类似产品：：MC-3T3细胞、ONS-76细胞、HUC细胞

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SUM149PT细胞类似产品：：HCC1954细胞、hTERT RPE1细胞、HEK293-F细胞

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LM6细胞类似产品：：NFS 60细胞、NCI-H735细胞、P30-OHKUBO细胞

Panc02.03细胞类似产品：：H2198细胞、U118MG细胞、UWB1-289细胞

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